霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织RANTES、ED-1表达的影响

论文摘要

目的：建立链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型并用霉酚酸酯（MMF）干预，动态观察RANTES、ED-1、CoⅠ、CoⅣ在肾组织中的表达，探讨MMF能否通过抑制。肾组织炎症反应达到保护肾脏的作用。方法：72只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（n=24）、糖尿病模型组（n=24）和MMF治疗组（n=24）。在适应性饲养1周后，经10％水合氯醛（0.3-0.4ml／100g）腹腔内注射麻醉，在无菌条件下行背部旁切口右肾摘除术。术后4周以STZ按60mg／kg的剂量行腹腔内注射，72小时后监测血糖、尿糖证实糖尿病大鼠模型建立，MMF治疗组于糖尿病成模后即予MMF15mg／kg／d灌胃干预，对照组和模型组均予等量蒸馏水灌胃。分别于干预后第4、6、10、14周每组各处死6只大鼠，处死前测24h尿蛋白定量，处死后留取肾组织做HE及Masson染色观察肾脏组织学改变；免疫组织化学方法检测RANTES、ED-1、Ⅰ型胶原和Ⅳ型胶原在肾组织中的表达；RT-PCR方法观察RANTES mRNA在肾组织中的表达。结果：1．与对照组比较，模型组大鼠24h尿蛋白排泄量显著上升（p＜0.01）；2．与对照组比较，模型组大鼠肾组织肾小球肥大、肾小管上皮细胞变性或脱落、单核／巨噬细胞浸润、细胞外基质（ECM）增多、肾间质纤维化等病理变化明显，并随病程进展纤维化程度加重；3．与对照组比较，模型组大鼠肾组织内RANTES、ED-1、CoⅠ、CoⅣ蛋白及RANTES mRNA表达均明显增强（p＜0.05或p＜0.01）；4．MMF干预后，与模型组比较，治疗组大鼠24h尿蛋白排泄量显著下降（p＜0.05），肾组织RANTES、ED-1、CoⅠ、CoⅣ蛋白及RANTESmRNA表达均有减少（p＜0.05或p＜0.01）。结论：MMF可能是通过下调RANTES在肾组织中的表达、减少单核／巨噬细胞在肾组织中的浸润，在早期抑制肾组织炎症反应，进而对肾脏具有一定的保护作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略词简表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 动物及来源
• 2.1.2 主要仪器
• 2.1.3 主要试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验动物及分组
• 2.2.2 动物模型的建立
• 2.2.3 药物干预
• 2.2.4 标本的采集和处理
• 2.2.5 HE 染色
• 2.2.6 Masson 染色
• 2.2.7 免疫组织化学染色
• 2.2.8 RT-PCR 检测
• 2.2.9 结果判定
• 2.3 统计学处理
• 第三章 实验结果
• 3.1 各组大鼠一般资料分析
• 3.2 肾脏组织学改变
• 3.2.1 大体标本
• 3.2.2 肾脏病理改变
• 3.3 肾组织免疫组织化学染色结果
• 3.3.1 RANTES 的表达
• 3.3.2 ED-1 阳性细胞的表达
• 3.3.3 I 型胶原的表达
• 3.3.4 IV 型胶原的表达
• 3.4 肾组织 PT-PCR 结果
• 3.4.1 RNA 的检测
• 3.4.2 RANTES mRNA
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间的主要研究成果