论文摘要
喉鳞状细胞癌（Laryngeal squamous cell carcinoma，LSCC）是头颈部常见的恶性肿瘤，其发病率逐年上升。从基因水平探索肿瘤的发生、发展、转移及治疗是目前的研究热点。新的观点认为细胞癌变是由于信号转导途径异常，细胞接受了异常生长、增殖、分化信号所致。整合素连接激酶（Integrin-linked kinase，ILK）是一种新发现的Ser/Thr蛋白激酶，它能参与整合素、生长因子和Wnt等多种信号通路，对细胞的生长、分化、迁移等多个方面进行调控。在多种癌组织研究中，ILK被证明是一个癌基因，与肿瘤细胞的持续增殖、粘附性丧失、迁移以及血管的生成都有密切的联系，参与了肿瘤发生机制中的许多过程，成为一个非常具有吸引力的肿瘤基因治疗研究对象，是一个抗肿瘤药物设计的理想靶点。组织微阵列／组织芯片技术是最近伴随基因芯片技术发展起来的一种新方法，可大规模高效检测临床组织样本，具有快速、方便、经济、准确的特点。目的：本实验将组织芯片技术运用于喉癌组织的免疫组织化学研究中，了解整合素连接激酶（intergrin-linked kinase ILK）在喉鳞状细胞癌中的表达情况，与临床分期、病理分级和淋巴结转移等特征之间的关系，并探讨其意义。方法：通过组织芯片打孔仪将36例喉癌组织和18例癌旁组织标本按照预先设计集中到同一个受体蜡块中，制成组织微阵列蜡块，经切片和烤片后即成为组织芯片。将组织芯片技术用于免疫组织化学SP法，检测ILK在36例喉癌及18例癌旁组织标本中的表达。利用SPSS统计学软件及x2检验进行统计学分析。结果：1．运用本方法制备的中等密度组织芯片，排列整齐，外形美观，组织点大小一致。HE染色结果均一，核浆对比明显，便于进行诊断和比较诊断。IHC染色清晰，便于观察和诊断。2．ILK在喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织中的表达率分别为69.44％（25／36）和22.22％（4／14），癌组织中的表达率明显高于癌旁组织，两组间有显著差异（P＜0.01）。3．ILK高分化鳞癌组织中的表达率为56.52％（13／23），而在中低分化鳞癌中的表达率为92.31％（12／13），两者之间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。4．有淋巴结转移的癌组织和无淋巴结转移的癌组织中的ILK的表达率分别为88.24％（15/17）和52.63％（10/19），两组有显著差异（P＜0.01）。5．Ⅰ—Ⅱ期喉癌组织中ILK的表达率为66.67％（8／12），而在Ⅲ—Ⅳ期喉癌组织中为70.83％（17／24），两者之间比较没有明显的统计学意义（P＞0.05）。ILK在声门上型喉癌组织中表达率为72.73％（8／11），在声门型喉癌组织中表达率为66.67％（16／24）。两者之间的差异没有明显的统计学意义（P＞0.05）。结论：1．组织芯片制备是一种比较成熟的技术。运用组织微阵列技术有快速、高精确度、节约资源，标准化等特点。2．我们的研究表明ILK在喉鳞状细胞癌中的表达明显高于癌旁组织。ILK的表达与喉鳞状细胞癌的恶性程度及淋巴结转移有关，ILK很可能参与了喉癌的发生、发展及侵袭过程。