CdTe量子点及纳米金在DNA检测中的应用

论文摘要

DNA检测分析广泛应用于医疗诊断、环境监测、药物研究等领域、因此建立操作简单、检测时间短、灵敏度高、选择性好的DNA检测新方法一直是研究的热点。而纳米材料由于具有光、电、热和力学上的优异性质,近年来在DNA检测领域中也发挥出越来越重要的作用。基于以上研究背景,本文分别利用纳米金以及CdTe量子点的光学性质建立了三种方法对DNA进行了检测,主要内容及研究结果如下：1.Ru（bpy）32+作为一种电子受体,能够猝灭CdTe量子点的荧光。基于小牛胸腺DNA和Ru（bpy）32+之间的作用力,CdTe量子点的的荧光强度能够恢复。并且在小牛胸腺DNA浓度在1.7×10-5 mol L-1-1.5×10-3 mol L-1之间时,量子点荧光恢复相对值和小牛胸腺DNA浓度成良好的线性关系。本章建立了一种基于CdTe-Ru（bpy）32+光诱导电子转移体系检测小牛胸腺DNA的新方法,该方法检测下限达到5.7×10-6mol L-1。2.利用纳米金的变色原理,建立了一种肉眼可见的转基因序列根癌农杆菌终止子的检测方法。在目标序列达到一定浓度时,该方法能够直观的观察到体系颜色变化。该方法检测限达到1.0×10-8mol/L,且操作简单、快速、廉价,具有较好的应用前景。3.纳米金在DNA单链的盐溶液中能够稳定存在,但是探针序列和目标序列杂交之后,纳米金出现团聚,水合粒径发生变化。本实验利用动态光散射技术测定纳米金的水合粒径变化,建立了一种简单、灵敏、非标记的转基因序列根癌农杆菌终止子检测方法。该方法具有很高的灵敏度,在最优条件下,纳米金的水合粒径和目标序列的浓度在1.0×10-13 mol L-1-5.0×10-9 mol L-1之间成线性关系,检测限为3.0×10-14molL-1（S/N=3）。在目标序列浓度为1.0×10-9mol L-1时,平行测定11次,相对标准偏差为4.8%。该方法在转基因产品的检测中具有潜在的应用价值。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 简略词表
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 纳米金在DNA检测中的应用
• 1.3 量子点在DNA检测中的应用
• 1.4 课题的设计思想及意义
• 3²⁺体系检测小牛胸腺DNA'>第二章 基于CdTe-Ru（bpy）₃²⁺体系检测小牛胸腺DNA
• 1. 前言
• 2. 材料与仪器
• 2.1 材料
• 2.2 仪器
• 3. 实验方法
• 3.1 GSH-CdTe量子点的合成
• 3²⁺体系测定小牛胸腺DNA'>3.2 构建GSH-CdTe QDs-Ru（bpy）₃²⁺体系测定小牛胸腺DNA
• 4. 结果与讨论
• 4.1 GSH-CdTe量子点的表征
• 4.2 pH对体系的影响
• 4.3 反应时间的影响
• 3²⁺对GSH-CdTe量子点荧光强度的影响'>4.4 不同浓度的Ru（bpy）₃²⁺对GSH-CdTe量子点荧光强度的影响
• 3²⁺体系检测小牛胸腺DNA'>4.5 GSH-CdTe-Ru（bpy）₃²⁺体系检测小牛胸腺DNA
• 4.6 机理探讨
• 4.7 干扰实验
• 4.8 实际样品的检测
• 5. 结论
• 第三章 转基因序列根癌农杆菌终止子快速可视化检测方法
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 仪器
• 3. 实验方法
• 3.1 纳米金的合成
• 3.2 探针序列最低浓度的确定
• 3.3 探针与目标序列杂交
• 3.4 目标序列检测
• 4. 结果讨论
• 4.1 纳米金的制备及其表征
• 4.2 探针序列最低浓度的确定
• 4.3 目标序列检测
• 4.4 干扰实验
• 4.5 检测原理
• 5. 结论
• 第四章 动态光散射法超灵敏检测根癌农杆菌终止子
• 1. 前言
• 2. 材料与仪器
• 2.1 材料
• 2.2 仪器
• 3. 实验方法
• 3.1 纳米金的合成
• 3.2 动态光散射检测纳米金的聚集
• 4. 结果与讨论
• 4.1 检测原理
• 4.2 纳米金的表征
• 4.3 反应时间对纳米金聚集的影响
• 4.4 目标序列的检测
• 4.5 干扰实验
• 5. 结论
• 全文总结
• 参考文献
• 致谢
• 附录 硕士期间发表的学术论文