论文摘要
目的 检测散发性大肠癌（SCC）患者错配修复基因（hMSH2与hMLH1）的突变情况,同时测定SCC患者突变型p53的表达情况,分析它们之间的相关性,并分析hMSH2、hMLH1及p53基因与大肠癌临床病理之间的关系,探讨hMSH2与hMLH1基因在散发性大肠癌发生、发展中的作用。 方法 以酚一氯仿提取法提取散发性大肠癌患者的肿瘤组织及正常组织DNA（n=45）,采用PCR方法扩增hMSH2基因第5、6、12外显子,hMLH1基因12、14、16外显子,p53基因5～6、7及8外显子。PCR反应组成:模板DNA5.0μl,10×buffer 5.0μl,上下游引物各1.0μl,dNTPs1.0μl,Taq酶2.0μl,25mmol/L Mgcl2 4.0μl,双蒸水31.0μl,反应总体系为50.0μl。循环条件:预热94℃ 2分钟,变性94℃ 60秒,退火52～58℃ 60秒,延伸72℃ 60秒,共35个循环,最后72℃延伸5分钟。通过单链构象多态性分析结合EB染色的方法找出染色异常条带,有异常条带的PCR产物回收后直接进行DNA序列测定,并通过重复实验证实。 结果 1.45例大肠癌标本中,错配修复基因（hMSH2与hMLH1）突变率为15.55%,其中,hMSH2基因突变1例,突变率为2.22%,hMLH1基因突变6例,突变率为13.33%。 2.右侧大肠癌hMSH2/hMLH1突变率为38.46%（5/13）,左侧大肠癌的突变率为6.25%（2/32）,两者之间差异有显著性（p<0.05）。28例男性患者hMSH2/hMLH1
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