亚甲基蓝光化学法对全血中人免疫缺陷Ⅰ型病毒（HIV-1）的灭活研究

论文摘要

HIV 感染者中约5～10%源于输血或血制品的应用。根据现有检验技术的水平,血液病毒筛选尚不能完全解决血液及制品应用的HIV 感染问题。因此,迫切需求建立有效、可行的病毒灭活技术,对血液及制品进行预防性处理,并已经成为国内外的研究热点。本课题以噬菌体f2、日本脑炎病毒（JEV）和人免疫缺陷Ⅰ型病毒（HIV-1）为试验病毒,对短波紫外线（UVC）照射法、γ-射线照射法、核黄素（Riboflavin）光化学法、金丝桃素（Hypericin）光化学法和亚甲基蓝（Methylene blue ,MB）等五种光化学法的灭活血液中病毒效果进行评价;通过正交试验筛选最佳方法的最适作用条件,并充分验证其灭活病毒效果。为评价处理方法的毒性作用,分别以昆明种小鼠和日本大耳白兔为实验动物,对MB 产生的急性和慢性毒性进行观察,通过自动生化检测仪对实验动物的肝肾功能进行检测;采用微核试验测定兔淋巴细胞微核率以及多核细胞法测定兔淋巴细胞Hprt 基因位点突变频率,研究MB 的致突变作用。试验结果显示: 1. 在筛选试验的最大作用剂量下,UVC（1500μW/cm2）、核黄素（40μmol/L）+可见光（40000Lux）、金丝桃素（20μmol/L）+可见光（40000Lux）、MB（10μmol/l）+可见光（40000Lux）分别作用40min 以及γ射线作用400Gy 使血液中的f2 噬菌体分别下降1.46 log、1.10 log、2.25 log、4.27 log、5.37 log,同时血浆游离Hb 分别增加279.52 mg/l、8444.31 mg/l、2.72 mg/l、3.36 mg/l、3.05 mg/l。按照既能有效灭活血液中的病毒,又能保持血液的成份和功能没有明显变化的原则,初步筛选出的最佳消毒方法是MB 光化学法。2. 正交实验显示,MB 光化学效应对血液中病毒的灭活作用受MB 含量、可见光照射强度和照射时间等因素的影响。试验筛选的最佳处理条件（15 μmol/LMB+40000 Lux 照度的卤钨灯照射40 min）下可以使f2 噬菌体下降超过5 个对数级。MB 与可见光照射两因素的T/E 值大于1,具有显著协同增效作用。3. 在设计的光化学应用模型处理下,当MB 终浓度为15μmol/L、可见光照度为40 000Lux 时,全血中的日本脑炎病毒在照射20min 时被完全灭活,灭活滴度为7.0

论文目录

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• 论文正文 亚甲基蓝光化学法对全血中人免疫缺陷Ⅰ型病毒（HIV-1）的灭活研究
• 前言
• 第一部分 血液中病毒灭活方法的初步筛选
• 材料与方法
• 结果
• 第二部分 MB 光化学法对血液中HIV-1 的灭活研究
• 材料与方法
• 结果
• 第三部分 处理后血液的毒性效应分析
• 结果
• 全文讨论
• 全文结论
• 致谢
• 参考文献
• 文献综述 艾滋病治疗与预防研究进展
• 参考文献
• 研究生学习阶段发表的文章