黑角珊瑚(海柳)挥发性成分提取及生物活性研究

黑角珊瑚(海柳)挥发性成分提取及生物活性研究

论文摘要

潮汕地区,位于我国东南部,濒临南海,地理位置独特,海洋资源丰富。很多海洋生物不仅可食用,因其本身的功效还可作为药用。我国自古就有食用海产、应用海洋药材的历史。潮汕民间亦有不少特色有效的海洋物种。海柳(BC):别名角珊瑚,其外表虽与陆地上的柳树相似,但实则属于腔肠动物门、珊瑚纲(六放珊瑚亚纲)、角珊瑚目、黑角珊瑚科、黑角珊瑚属、日本黑角珊瑚Antipathes japonica Brook,多小枝黑角珊瑚Antipathes virgata Esper的群体分枝。在潮汕地区,海柳Antipathes japonica Brook作为特有的海洋生物材料,广泛用于烟嘴烟斗的加工制作中,且别有功效。历代本草都有关于海柳药用价值的记载,而目前对于其所含成分及生物活性的报道很少。本论文的目的是提取海柳挥发性成分(BCE),研究其生物活性,为BC进一步研发打下药理学基础。方法:1.采用二氧化碳超临界萃取(CO2-SFE)海柳烟嘴中挥发性成分。2.运用气质联用(GC-MS)结合保留指数计算对提取的挥发性物质进行初步鉴定。3.通过电感耦合等离子体发射光谱(ICPS)同时测定海柳中所含多种无机元素。4. DPPH法、邻菲罗啉法体外测定BCE的抗氧化活性。5. Kirby–Bauer (KB)纸片扩散法测试BCE抗菌敏感性;微量肉汤稀释法最小抑菌浓度(MIC)测定。6.小鼠雾化吸入BCE(0.3mg/ml、1.5mg/ml、3mg/ml)后暴露于香烟烟雾中,复制急性肺损伤的动物模型。阳性药组雾化吸入Vc(3mg/ml),对照组和吸烟组(CS)雾化吸入生理盐水(NS)。实验结束后取肺组织,观察肺组织病理形态学变化,剩余组织匀浆后检测超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)的活力及丙二醛(MDA)的含量。结果:1. BCE通过GC-MS分析,共鉴定出15种化学成分包括:磷酸三乙酯、丁羟甲苯、雪松醇、棕榈酸、角鲨烯、胆甾醇等。2. ICPS测出海柳中所含P, Ca, Mg, S, B, Si, Fe, Cu, Zn, Ba等13种无机元素。3.体外抗氧化实验中BCE有清除自由基DPPH和羟自由基作用。4. BCE可以抑制革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌S. aureus和表皮葡萄球菌S. epidermidis,对革兰氏阴性菌没有明显作用。测定BCE对该两种细菌的最小抑菌浓度MIC分别是:S. aureus 73μg/μl;S. epidermidis 37μg/μl。5.肺组织病理学显示:急性肺损伤组小鼠肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变.BCE雾化吸入能够明显减轻肺损伤程度。给药组各剂量与模型组相比均能降低MPO和MDA水平,提高SOD的活性(P<0.05或P<0.01),且三个剂量呈量效关系。结论:首次提取了BCE,并研究了BCE的生物活性。通过体内、体外实验证明BCE所具有抗氧化活性、抗炎作用和抑菌能力。BCE对吸烟所致的急性呼吸道损伤具有一定保护作用。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 缩略词表
  • 第一章 前言
  • 附图:黑角珊瑚及海柳烟嘴
  • 第二章 实验设计
  • 2.1 实验材料
  • 2.1.1 样品收集
  • 2.1.2 主要试剂
  • 2.1.3 实验仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2-SFE'>2.2.1 二氧化碳超临界萃取 CO2-SFE
  • 2-SFE 挥发性成分GC-MS 分析'>2.2.2 CO2-SFE 挥发性成分GC-MS 分析
  • 2.2.3 无机元素分析
  • 2-SFE 挥发性成分抗氧化活性评价'>2.2.4 CO2-SFE 挥发性成分抗氧化活性评价
  • 2-SFE 挥发性成分抗菌活性评价'>2.2.6 海柳 CO2-SFE 挥发性成分抗菌活性评价
  • 2.2.7 海柳挥发性成分体内活性实验
  • 2.2.8 统计方法
  • 第三章 海柳化学物质成分鉴定
  • 3.1 海柳化学成分鉴定
  • 3.1.1 BCE GC-MS 分析及鉴定结果
  • 3.1.2 BC 无机元素分析
  • 3.2 分析讨论
  • 第四章 海柳挥发性成分体内、体外抗氧化活性研究
  • 4.1 海柳挥发性成分体外抗氧化活性评价
  • 4.1.1 BCE 清除自由基 DPPH 的作用
  • 4.1.2 邻菲罗啉法测定BCE 清除羟自由基作用
  • 4.2 海柳挥发性成分体内抗氧化活性评价
  • 4.3 分析讨论
  • 第五章 海柳挥发性成分体内抗炎作用和体外抗菌作用
  • 5.1 BCE 体内抗炎作用
  • 5.1.1 吸烟对小鼠支气管和肺组织形态学的影响
  • 5.1.2 BCE 对小鼠急性肺损伤 MPO 的影响
  • 5.2 BCE 体外抗菌活性
  • 5.2.1 抗菌敏感性测试
  • 5.2.2 MIC 测定
  • 5.3 分析讨论
  • 第六章 实验结论
  • 参考文献
  • 综述 我国药用珊瑚研究概述及黑角珊瑚简介
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历
  • 攻读硕士学位期间发表的论文
  • 相关论文文献

    • [1].南海二叉黑角珊瑚化学成分研究[J]. 中药材 2010(09)
    • [2].黑角珊瑚的化学成分研究[J]. 中草药 2008(11)

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