乳腺癌中TP、VEGF-D、VEGFR-3表达及与淋巴管生成关系研究

论文摘要

乳腺癌是女性乳房最常见的肿瘤，在我国占各种全身恶性肿瘤的7％-10％，仅次于宫颈癌，严重威胁女性的健康和生命。乳腺癌容易发生淋巴结转移，淋巴管生成可以促进乳腺癌转移。肿瘤淋巴管生成是近年的研究热点。肿瘤诱导的淋巴管生成是肿瘤淋巴道转移的重要步骤。肿瘤淋巴管生成造成淋巴管密度增加，使肿瘤细胞有更多机会进入区域淋巴结，形成淋巴道转移。胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase，TP）是一个含大约389个氨基酸残基，分子量为48.3-49.0×103的同源二聚体，定位于细胞核或细胞浆中。TP不能直接刺激内皮细胞（EC）分裂增殖，但对EC有化学趋化性，能刺激培养EC迁移，在体内具有酶的活性。TP特异性地作用于胸苷，使其发生可逆性的磷酸化，其产物2一脱氧-D-核糖（2-deoxy-D-ribose，2-dDR）可诱导明显的血管新生。TP通过血管生成作用促进癌细胞的生长和转移。TP除促进肿瘤生成外，也具有促进肿瘤淋巴管生成作用。血管内皮生长因子-D（vascular endothelial growth factor-D，VEGF-D）是调节肿瘤间质淋巴管新生的重要因素，定位于上皮细胞胞浆和肿瘤间质细胞组织内，与其受体血管内皮生长因子受体-3（vascular endothelial growth factor receptor-3，VEGFR-3，又称FLt-4）结合，使RAFTK酪氨酸酶磷酸化，活化细胞骨架蛋白Paxillin，促进了淋巴管内皮细胞迁移，同时还可激活Ras／MAPK信号传导通路或JNK通路，诱导淋巴管内皮细胞肌动蛋白重组，刺激其增殖。其受体VEGFR-3在胚胎发生的初级阶段存在于所有内皮细胞，随后定位于小静脉和淋巴管，是成熟淋巴管内皮特异性标记物。在淋巴管生成过程中，肿瘤细胞和淋巴管内皮相互作用，肿瘤细胞可分泌一些因子，促进淋巴管内皮的激活，促进肿瘤细胞进入淋巴管。VEGF-D表达增高导致淋巴管密度的增加与淋巴结转移密切相关，是促进肿瘤发生淋巴结转移的重要原因。在人类肿瘤组织中可见肿瘤周边新生淋巴管、扩张淋巴管、有癌栓的淋巴管和有肿瘤转移的淋巴结内淋巴管内皮细胞VEGFR-3呈高表达，肿瘤内新生血管内皮细胞VEGFR-3重新表达，提示VEGF-D／VEGFR-3调控系统可调节肿瘤间质血管网的形成和淋巴管的生成，为肿瘤经淋巴道转移提供更加便利的条件。淋巴管生成对肿瘤转移和预防、预测具有重要意义。本实验采用免疫组化SP法，分别观察了37例乳腺癌组织、30例正常乳腺组织中TP、VEGF-D和VEGFR-3的表达情况及淋巴管密度（LVD）。主要探讨TP、VEGF-D、VEGFR-3在乳腺癌中的表达及淋巴管生成，分析淋巴管生成与乳腺癌临床生物学行为及预后的关系。方法：1．采用免疫组化SP法分别对37例乳腺癌组织、30例正常乳腺组织中TP、VEGF-D、VEGFR-3的表达及淋巴管密度进行检测。2．统计学处理：所有数据均经SPSS10.0软件进行统计分析。阳性率之间比较采用X2检验（chi-square），两样本均数比较采用t检验。显著性水准a=0.05。结果：1．正常乳腺组织中TP蛋白阳性表达率为46.67％；乳腺癌组织中TP阳性表达率为75.67％，两者对比，差异有统计学意义（p＜0.05）。乳腺癌组织中，TP阳性表达在年龄和肿瘤大小方面无显著差异；在淋巴结转移、组织学分级Ⅲ级明显高于无淋巴结转移、组织学分级Ⅱ级及Ⅰ级病例（p＜0.01、p＜0.05）。TP阳性表达中淋巴管计数（16.52±3.82）个／HP显著高于TP阴性表达中淋巴管计数（9.12±3.41）个／HP，p＜0.01。2．正常乳腺组织中VEGF-D阳性表达率为13.33％，乳腺癌组织中VEGF-D阳性表达率为78.38％，二者有显著性差异（p＜0.01）。乳腺癌组织中VEGF-D阳性表达与年龄无关（p＞0.05）；在肿瘤直径大于20mm、淋巴结转移组、组织学分级Ⅲ级显著高于肿瘤直径小于20mm、无淋巴结转移组、组织学分级Ⅱ级及Ⅰ级病例（p＜0.01、p＜0.05、p＜0.05）。VEGF-D阳性表达中淋巴管计数（11.19±3.12）个／HP显著高于VEGF-D阴性表达中淋巴管计数（2.18±2.93）个／HP，p＜0.01。3．正常乳腺组织中VEGFR-3的阳性表达率为10.00％，乳腺癌组织中VEGFR-3的阳性表达率为56.75％，二者有显著性差异（p＜0.01）；乳腺癌组织中VEGFR-3阳性表达无明显年龄差异（p＞0.05），在肿瘤直径大于20mm、淋巴结转移组、组织学分级Ⅲ级显著高于肿瘤直径小于20mm、无淋巴结转移组、组织学分级Ⅱ级及Ⅰ级病例（p＜0.05、p＜0.01、p＜0.05）。VEGFR-3阳性表达中淋巴管计数（12.72±2.76）个／HP显著高于VEGFR-3阴性表达中淋巴管计数（2.21±2.91）个／HP，p＜0.01。4乳腺癌组织中淋巴管计数（14.68±4.82）个／HP显著高于正常乳腺组织（4.62±4.95）个／HP，p＜0.01。LVD在淋巴结转移组（13.62±2.41）个／HP显著高于无淋巴结转移组（7.61±3.22）个／HP，p＜0.01；LVD在组织学分级中Ⅰ级（7.82±3.24）个／HP与Ⅱ级（9.65±2.21）个／HP、Ⅱ级与Ⅲ级（16.28±3.65）个／HP之间存在明显差异（p＜0.01、p＜0.01）。5．乳腺癌组织中TP与VEGF-D、TP与VEGFR-3、VEGF-D与VEGFR-3表达的经统计学分析呈正相关（均p＜0.05）。结论：1乳腺癌组织中TP、VEGF-D、VEGFR-3阳性表达率高于正常乳腺组织，差异有显著性；乳腺癌组织中TP、VEGF-D、VEGFR-3阳性表达与年龄无关，在淋巴结转移、组织学分级Ⅲ级明显高于无淋巴结转移、组织学分级Ⅱ级及Ⅰ级病例。TP、VEGF-D、VEGFR-3阳性表达中淋巴管计数高于TP、VEGF-D、VEGFR-3阴性表达中淋巴管计数，差异有显著性。表明TP、VEGF-D、VEGFR-3具有促进乳腺癌淋巴管生成的作用，与乳腺癌发生、进展及转移等生物学行为密切相关。2．乳腺癌组织中淋巴管计数显著高于正常乳腺组织；LVD在淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组，并且随组织学分级增加LVD增高，差异有显著性。表明乳腺癌组织中有大量淋巴管生成，淋巴管数量与淋巴结转移密切相关。3．TP、VEGF-D、VEGFR-3在乳腺癌组织中的表达具有高度一直性，均呈正相关关系，表明三者在乳腺癌的淋巴管生成、淋巴结转移中起协同作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分
• 乳腺癌中 TP、VEGF-D、VEGFR-3 表达及与淋巴管生成关系的研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 小结
• 附图
• 参考文献
• 综述部分
• 乳腺癌中 TP、VEGF-D、VEGFR-3 表达及与淋巴管生成的意义
• 参考文献
• 英文缩写词索引
• 附录
• 致谢