论文摘要
结肠癌是常见的恶性肿瘤，传统治疗的效果尚不令人满意，研究表明生长抑素及其类似物对正常组织有抗增生作用，同时还具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用。使用外源性生长激素是否会促进恶性肿瘤的生长、增殖，恶性肿瘤患者能否使用外源性生长激素，使用外源性生长抑素是否会对免疫功能和代谢水平产生影响是目前困扰临床的问题。目的：为了明确外源性生长激素和生长抑素对免疫功能、代谢水平以及肿瘤细胞增殖、肿瘤生长的影响。课题分为四部分：（1）探讨外源性生长激素和生长抑素对KM小鼠CD3、CD4、CD8阳性T淋巴细胞比例及CD4/CD8水平的影响；（2）探讨外源性生长激素和生长抑素对SD大鼠GH-IGF-1轴及血清蛋白水平的影响；（3）探讨生长激素和生长抑素对体外培养的人结肠癌细胞株HT-29细胞抑制率、细胞周期分布、增殖指数（PI）、凋亡率以及bcl-2、bax基因mRNA水平的影响；（4）探讨外源性生长激素和生长抑素对人结肠癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长、肿瘤细胞增殖及荷瘤裸鼠血清蛋白水平的影响。方法：（1）选KM小鼠随机分成生长激素组（GH组）、生长抑素组（SS组）、生长激素+生长抑素组（GH+SS组）和对照组，流式细胞仪测定各组小鼠CD3、CD4、CD8阳性T淋巴细胞比例及CD4/CD8水平；（2）选SD大鼠随机分成生长激素组（GH组）、生长抑素组（SS组）、生长激素+生长抑素组（GH+SS组）和对照组，放免分析法测定各组SD大鼠GH、IGF-1水平，生化分析法测定血清蛋白水平；（3）MTT法测定测定生长激素、生长抑素对体外培养的人结肠癌细胞株HT-29抑制率影响；流式细胞仪测定生长激素、生长抑素对体外培养的人结肠癌细胞株HT-29细胞细胞周期分布、增殖指数（PI）、凋亡率的影响，RT-PCR法测定bcl-2、bax基因mRNA水平的变化；（4）选BALB/c裸鼠接种结肠癌细胞株HT-29建立移植瘤模型，随机分成单纯移植瘤组、生长激素组（GH组）、生长抑素组（SS组）、生长抑素加生长激素组（SS+GH组）和正常对照组。测定移植瘤大小，流式细胞仪测定移植瘤增殖指数、细胞淍亡率，RT-PCR法测定bcl-2、bax基因mRNA水平，生化分析方法测定荷瘤裸鼠血清蛋白水平。结果：（1）外源性生长激素能够显著提高KM小鼠CD3阳性T淋巴细胞、CD4阳性T淋巴细胞比例及CD4/CD8水平，而外源性生长抑素则显示相反的作用，生长激素与生长抑素联合应用组CD4/CD8水平与对照组比较无显著差异。（2）外源性生长激素能够显著提高SD大鼠血清GH及IGF-1水平，外源性生长抑素则显示相反的作用，生长激素联合生长抑素亦能够显著提高SD大鼠血GH及IGF-1水平。（3）外源性生长激素能够提高SD大鼠血糖水平，提高血清前白蛋白水平，外源性生长抑素则显示相反的作用，生长激素联合生长抑素对于SD大鼠血糖以及血清蛋白水平无显著影响。（4）生长抑素对于结肠癌细胞株HT-29有明显的抑制作用，随着浓度的提高抑制率亦随之提高。但生长激素对于结肠癌细胞株HT-29抑制率无显著影响。生长抑素组S期细胞比例、G2/M期细胞比例及PI显著低于对照组，各生长抑素组随着生长抑素浓度的增加PI有下降趋势。各生长抑素组细胞凋亡率明显高于对照组。生长激素组与对照组比较细胞周期分布和凋亡率无显著差别。（5）生长抑素能够降低结肠癌细胞株HT-29 bcl-2 mRNA表达，提高bax mRNA表达，而生长激素对结肠癌细胞株HT-29 bcl-2、bax mRNA表达无显著影响。（6）生长抑素组移植瘤体积显著小于单纯移植瘤组，而生长激素组移植瘤体积大于单纯移植瘤组，生长激素与生长抑素联合应用对于移植瘤体积则无显著影响。（7）移植肿瘤导致受体处于低蛋白水平状态。生长激素能够在一定程度改善受体低蛋白水平状态，而生长抑素则加重受体低蛋白状态。（8）生长抑素能明显提高移植瘤的细胞凋亡率，降低增殖指数。生长激素能够抑制移植瘤的细胞凋亡。（9）外源性生长激素和生长抑素能够改变移植瘤细胞bax和bcl-2 mRNA的表达。结论：综合上述结果可以认为外源性生长激素能够提高机体的细胞免疫功能，提高机体GH—IGF-1轴水平，改善移植瘤所致的机体低蛋白血症。它对体外培养的人结肠癌细胞株HT-29无直接影响，但具有潜在的促进活体肿瘤生长的作用。外源性生长抑素具有抑制机体细胞免疫功能、降低正常机体以及荷瘤机体蛋白水平的不利作用，它无论对于体外培养的人结肠癌细胞株还是结肠癌裸鼠移植瘤均具有显著的抑制作用。生长激素与生长抑素联合应用不但可以避免生长激素的促进肿瘤生长作用和生长抑素的负性蛋白作用，反而表现出正性蛋白作用。从营养和免疫功能的角度考虑生长激素和生长抑素联合应用于恶性肿瘤机体是可行的。
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