野生樱桃种质资源的遗传分析及其栽培品种的DNA指纹鉴定

论文摘要

我国特别是云、贵、川、陕一带分布着丰富的野生樱桃种质资源,但对野生樱桃自然居群遗传结构和遗传多样性研究较少,影响了对珍贵樱桃资源的保护与利用。另外,由于栽培的不同樱桃无性系和突变种在形态上很相似,生产上存在同物异名和同名异物现象,品种混乱问题对樱桃生产造成很大的损失;在樱桃育种方面,优良杂交亲本优良性状的预选及鉴定周期过长,如何从DNA水平上进行遗传标记和快速鉴定尚无有效的方法。樱桃果实具有重要经济利用价值,因此,对于优良樱桃品种的果实品质如何进行评价也需要进行研究,以提出樱桃新品种的综合品质评价标准。根据以上存在的主要问题,本文开展了一些研究与探索,主要研究结果如下: 1.利用DNA扩增片段序列对樱桃种质资源的遗传分析 从130个任意寡核苷酸引物中筛选出48个,对8个樱桃种及2个种间杂交种的总DNA进行PCR扩增,产生的多态性用于遗传分析。利用两种距离法进行系统发育分析,并构建出种间及品种间亲缘关系的聚类图。结果表明,扩增位点总数为840个;23个甜樱桃品种及4个酸樱桃品种各自聚为一类,多态位点数分别为569和247个,多态位点百分率分别为67.74%和29.40%。毛樱桃、草原樱桃(变种)与欧李聚为单一组群;中国樱桃与寇尔特亲缘关系较近,聚为另一单一组;甜樱桃、酸樱桃等其他种在亲缘关系上分歧较大;樱桃种群间的遗传距离范围在0.0623—0.2719之间,并且从分子水平上可以鉴别。拓扑树聚类分析结果总体上与分类标准相一致。8个樱桃种及2个种间杂交种均扩增出了1个以上的特有RAPD标记,据此可以进行不同樱桃种间鉴定或杂种优良性状预选。 2.野生中国樱桃居群遗传结构和遗传多样性分析

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一部分 前言
• 1.李属樱亚属主要种及其分布
• 1.1 欧洲甜樱桃（Prunus avium L.）
• 1.2 欧洲酸樱桃（Prunus cerasus L.）
• 1.3 中国樱桃（Prunus pseudocerasus Lindl.）
• 1.4 马哈利樱桃（Prunus mahaleb L.）
• 1.5 黑樱桃（Prunus maximowiczii Rupr.）
• 1.6 日本晚樱（Prunus serrulata var.lannesiana（carr.） Makino）
• 1.7 草原樱桃（Prunus fruticosa Pall.）
• 1.8 欧李（Prunus humilis Bge）
• 1.9 毛樱桃（Prunus tomentosa Thunb.）
• 2.李属樱亚属的研究历史回顾
• 2.1 李属樱亚属分类研究
• 2.2 李属樱亚属DNA标记研究
• 2.2.1 谱系分析和分类
• 2.2.2 遗传结构和遗传多样性
• 2.2.3 构建指纹图谱和品种鉴别
• 2.2.4 建立遗传连锁图谱
• 2.3 樱亚属同工酶研究
• 2.4 樱亚属形态学及组织结构研究
• 2.5 樱亚属新品种及其砧木选育研究
• 3.遗传多样性分析及本研究所涉及的主要分子标记技术及其特点
• 3.1 遗传多样性分析
• 3.2 主要植物分子标记技术及其特点
• 3.2.1 基于Southern杂交技术的主要分子标记
• 3.2.2 基于PCR（Polymerase Chain Reaction）的主要分子标记
• 3.2.3 以mRNA为基础的主要分子标记技术
• 4.本研究主要研究内容、目的及意义
• 4.1 樱桃研究方面存在的主要问题
• 4.2 主要研究内容
• 4.3 研究的目的和意义
• 第二部分 材料与方法
• 1.李属樱亚属植物野外生存现状调查
• 2.利用DNA扩增片段序列对樱桃种质资源的遗传分析
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 3.野生中国樱桃居群遗传结构和遗传多样性分析
• 3.1 野外取样
• 3.2 基因组DNA提取
• 3.3 DNA纯度检测
• 3.3.1 电泳检测
• 3.3.2 分光光度计检测
• 3.4 RAPD随机扩增引物筛选及PCR扩增
• 3.5 数据处理
• 4.欧洲甜樱桃品种及其砧木的选育和DNA指纹分析
• 4.1 甜樱桃品种及其砧木的DNA指纹分析
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 实验方法
• 4.2 樱桃新品种“秦樱1号”选育研究
• 4.2.1 “秦樱1号”DNA指纹标记研究
• 4.2.2 植物学特性与物候期
• 4.2.3 形态学及经济性状研究
• 4.3 樱桃新砧木“CDR-1”的选育研究
• 4.3.1 “CDR-1”DNA指纹标记研究
• 4.3.2 植物学特性与物候期
• 4.3.3 形态学及抗逆性研究
• 5.樱桃选育品种果实主要内含物测试与分析
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 实验材料
• 5.1.2 实验方法
• 第三部分 结果与分析
• 1.利用DNA扩增片段序列对樱桃种质资源的遗传分析
• 1.1 樱桃不同种、品种的DNA扩增结果
• 1.2 樱桃种及种内品种特有RAPD标记
• 1.3 樱桃种的遗传距离（GD）和遗传一致度（GI）分析
• 1.4 樱桃种及种内品种间的遗传距离聚类分析（UPGMA法）
• 2.野生中国樱桃居群遗传结构和遗传多样性分析
• 2.1 中国樱桃居群的RAPD分析多态位点比率（PPB）
• 2.2 野生中国樱桃居群遗传多样性及其分布
• 2.2.1 Shannon多样性指数和Nei基因多样性指数
• 2.2.2 AMOVA（Analysis of Molecular Variance）分析
• 2.3 野生中国樱桃居群间遗传距离（GD）和遗传一致度（GI）
• 2.4 野生中国樱桃居群遗传距离聚类分析（UPGMA法）
• 3.欧洲甜樱桃品种及其砧木的选育和DNA指纹分析
• 3.1 甜樱桃品种及其砧木的DNA指纹分析
• 3.1.1 不同樱桃品种的RAPD指纹图谱
• 3.1.2 樱桃品种间遗传距离和遗传一致度分析
• 3.1.3 樱桃品种特有RAPD指纹标记
• 3.2 樱桃新品种“秦樱1号”选育研究
• 3.2.1 “秦樱1号”DNA指纹标记研究
• 3.2.2 植物学特性与物候期
• 3.2.3 形态学及经济性状研究
• 3.3 樱桃新砧木“CDR-1”的选育研究
• 3.3.1 “CDR-1”DNA指纹标记研究
• 3.3.2 植物学特性与物候期
• 3.3.3 形态学及抗逆性研究
• 4.欧洲甜樱桃主要品种果实内含物测试与分析
• 4.1 欧洲甜樱桃品种果实蛋白质含量差异分析
• 4.2 不同甜樱桃品种果实维生素C（Vc）含量差异分析
• 4.3 不同甜樱桃品种果实总酸度差异分析
• 4.4 不同甜樱桃品种果实可溶性总糖含量差异分析
• 4.5 不同甜樱桃品种果实大小、糖酸比值、风味及品质差异分析
• 第四部分 讨论
• 1.利用DNA扩增片段序列对樱桃种质资源的遗传分析
• 1.1 樱桃品种间亲缘关系
• 1.2 樱属种间亲缘关系
• 2.野生中国樱桃居群遗传结构和遗传多样性分析
• 2.1 野生中国樱桃居群遗传结构和遗传分化
• 2.1.1 野生中国樱桃居群遗传结构
• 2.1.2 野生中国樱桃居群间的遗传分化
• 2.1.3 野生中国樱桃的扩散方式
• 2.1.4 野生中国樱桃地理隔离与Nei遗传距离相关性分析
• 2.2 野生中国樱桃遗传多样性和保护策略
• 3.甜樱桃品种及其砧木的DNA指纹分析
• 3.1 樱桃基因组DNA指纹图谱和遗传一致度
• 3.2 樱桃品种和砧木特有DNA指纹分析
• 3.3 “秦樱1号”和“CDR-1”樱桃新品种的DNA指纹标记
• 4.欧洲甜樱桃主要品种果实内含物测试与分析
• 第五部分 结论与后续研究及展望
• 1.主要结论
• 1.1 利用DNA扩增片段序列对樱桃种质资源的遗传分析
• 1.2 野生中国樱桃居群遗传结构和遗传多样性分析
• 1.3 欧洲甜樱桃品种及其砧木的选育和DNA指纹分析
• 1.4 欧洲甜樱桃主要品种果实内含物测试与分析
• 2.后续研究及展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录