当归药渣有效成分的提取纯化及综合利用研究

论文摘要

本文对当归药渣中多糖及阿魏酸的提取、纯化工艺及药理作用进行研究和优化,为其二次开发利用提供技术方案和实验数据。1.通过对当归药渣中多糖的提取纯化工艺的探索,确定水提和醇沉的最佳工艺路线。采用单因素试验和正交实验优化多糖提取工艺,获得最佳提取工艺为按料液比1:8在100℃下提取3次,每次2h;最佳醇沉工艺为按浓缩比1:1,用95 %乙醇沉淀多糖,使醇浓度最终为80 %,低温放置6h后,离心,得粗多糖沉淀物。2.在多糖纯化过程中,对脱蛋白次数及脱色进行研究,选取Sevag法脱蛋白共3次,0.1 %活性炭脱色即可。采用分级沉淀法得到当归精制多糖Ⅰ（ASPⅠ）和当归精制多糖Ⅱ（ASPⅡ）。采用苯酚-硫酸法测定3种多糖的含量和得率,当归粗多糖含量50.84 %,得率10.73 %;当归精制多糖Ⅰ含量62.84 %,得率7.84 %;当归精制多糖Ⅱ含量69.16 %,得率3.33 %。采用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,三种多糖中蛋白质含量分别为19.49 %,17.11 %和15.86 %。3.通过正交设计实验考察了乙醇浓度,提取温度,液料比和提取时间对当归药渣中阿魏酸提取效果的影响,确定醇提最佳工艺为按料液比1:16,在85℃下用80 %乙醇回流提取3次,每次2.5 h。以上条件下得到的阿魏酸的含量为0.04247 mg/g。4.当归药渣中提取的3种多糖对二甲苯引起小鼠耳肿胀及吲哚美辛引起的血管通透性有明显的抑制作用,表明当归多糖具有一定的抗炎效果,其中当归精制多糖Ⅰ的量效关系更为显著。5.选取当归精制多糖Ⅰ进行免疫功能实验,试验结果表明它对环磷酰胺所致的小鼠吞噬细胞活性,脾指数及胸指数均表现为增强作用,并能增加小鼠血清溶血素值。说明当归精制多糖Ⅰ具有一定的免疫作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1 中药药渣的研究概况
• 1.1 中药药渣中化学成分的提取与分离
• 1.2 中药药渣综合利用的途径
• 2 当归的研究及开发现状
• 2.1 当归多糖的研究进展
• 2.2 当归多糖的生物活性研究
• 2.3 当归阿魏酸的研究进展
• 3 本课题研究的意义及主要内容
• 第二章 当归药渣中多糖的提取工艺与纯化
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 材料
• 2 实验方法
• 2.1 实验指标选择与测定方法
• 2.2 药材吸水量的测定
• 2.3 单因素考察
• 2.4 水提条件的优化与验证
• 2.5 醇沉工艺的优化
• 2.6 脱蛋白工艺的优选
• 2.7 色素及小分子杂质的去除
• 2.8 当归粗多糖分级沉淀
• 3 实验结果与分析
• 3.1 当归药渣吸水量测定结果
• 3.2 单因素实验
• 3.3 水提正交实验结果
• 3.4 水提工艺验证实验结果
• 3.5 醇沉正交实验结果
• 3.6 醇沉工艺验证实验结果
• 3.7 脱蛋白次数对多糖和蛋白质含量的影响
• 3.8 当归多糖的分级沉淀
• 3.9 基本理化性质的测定结果
• 4 讨论
• 4.1 当归多糖的提取与醇沉
• 4.2 当归多糖的纯化
• 4.3 当归多糖的分级沉淀
• 第三章 当归药渣中阿魏酸的提取工艺
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 材料
• 2 实验方法
• 2.1 实验指标测定方法
• 2.2 药材吸水量的测定
• 2.3 单因素考察
• 2.4 醇提条件的优化与验证
• 3 实验结果与分析
• 3.1 单因素实验
• 3.2 醇提正交实验结果
• 3.3 醇提工艺验证实验结果
• 4 讨论
• 4.1 提取溶剂的选择
• 4.2 提取方法的选择
• 第四章 实验指标的测定
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 材料
• 2 实验方法
• 2.1 当归多糖含量测定
• 2.2 蛋白质含量测定
• 2.3 阿魏酸含量测定
• 3 实验结果与分析
• 3.1 多糖的含量测定结果
• 3.2 蛋白质的含量测定结果
• 3.3 阿魏酸的含量测定结果
• 4 讨论
• 4.1 多糖的含量测定
• 4.2 蛋白质的含量测定
• 4.3 阿魏酸的含量测定
• 第五章 当归药渣中多糖的抗炎实验
• 1 仪器与材料
• 1.1 样品
• 1.2 药品与试剂
• 1.3 仪器
• 1.4 实验动物
• 2 实验方法
• 2.1 小鼠耳廓肿胀度测定
• 2.2 小鼠腹腔毛细血管通透性测定
• 2.3 统计方法
• 3 实验结果与分析
• 3.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
• 3.2 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
• 4 讨论
• 第六章 当归药渣中多糖的免疫实验
• 1 仪器与材料
• 1.1 样品
• 1.2 药品与试剂
• 1.3 仪器
• 1.4 实验动物
• 2 实验方法
• 2.1 单核巨噬细胞吞噬能力的测定
• 2.2 血清血溶素 IGg 的测定
• 2.3 统计方法
• 3 结果与分析
• 3.1 对环磷酰胺致小鼠吞噬细胞活性的影响
• 3.2 对小鼠免疫器官的影响
• 3.3 对小鼠血清溶血素 IGg 的影响
• 4 讨论
• 第七章 结论与建议
• 1 结论
• 2 建议
• 参考文献
• 致谢
• 导师个人简介
• 作者简介