陈悦
（郑州颐和医院中药部河南郑州450000）
【摘要】目的：探讨寒饮射肺证模型大鼠采用单叶细辛治疗对TGF-β1、PC-Ⅲ含量的影响情况。方法：选取SPF级Wistar大鼠80只，随机按单叶细辛组，辽细辛组、模型对照组、正常对照组划分，前3组复制寒饮射肺动物模型；实施造模次日，模型对照组、正常对照组分别取生理盐水灌胃，另两组取中药水提取液灌胃，共28d，对血清、肺泡灌洗液中TGF-β1、PC-Ⅲ测定并对比。结果：相较正常对照组，模型对照组大鼠血清、肺泡灌洗液PC-Ⅲ、TGF-β1含量明显升高（P<0.05），提示造模成功。相较模型对照组，两细辛组药组血清、肺泡灌洗液PC-Ⅲ、TGF-β1均下降（P<0.05），对药物的有效性予以了证实。两细辛给药组上述指标无统计学差异（P>0.05）。结论：单叶细辛对PC-Ⅲ、TGF-β1表达具调节作用，可使肺部炎症减轻，发挥保护寒饮射肺模型大鼠肺组织的作用，有广泛的研究应用价值。
【关键词】单叶细辛；寒饮射肺证；模型大鼠；TGF-β1；PC-Ⅲ；实验
【中图分类号】R44【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）17-0113-02
寒饮射肺证多由寒邪引动痰饮、宿罹痰饮所致，表现为水肿、哮喘、咳嗽等，为临床慢性呼吸系统常见病证，病程进展缓慢，常有肺动脉高压、慢性支气管炎并发，病情严重者可诱导肺源性心脏病[1]。有研究示，寒饮射肺证模型大鼠采用单叶细辛治疗，对磷脂、内皮素等改善效果显著，但对Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）、转化生长因子-β1（TGF-β1）含量的影响研究尚少，本次实验就此展开探讨，现回顾结果如下。
1.材料与方法
1.1一般材料
取80只7～8周龄SPF级Wistar大鼠模型，体质量平均（200±19）g，包括雌雄。在SPF条件下，普通喂养1周后，随机按单叶细辛组、辽细辛组、模型对照组、正常对照组各20只划分。
1.2方法药品，试剂
由甘肃中医学院附属医院对辽细辛、单叶细辛提供，用水提法对临床用药剂型模拟，制备成1g/ml质量分数的溶液备用。除正常对照组外，对其他各组大鼠均行造模处理：腹腔注射质量分数为250g/L乌拉坦（4μL/g）完成麻醉步骤，将实验对象仰卧位固定，常规消毒；于颈部正中将皮肤切开，气管、左侧颈总动脉钝性分离暴露，于环状软骨下将气管前壁横向切开，向头端作一纵向切口，插入Y型气管插管，完成固定操作后，将血液吸除干净。右侧管经张力换能器连接生物信号监测系统，对左侧颈总动脉分离并备用，置管并完成结扎固定操作，以为抽取血液检测进行准备。呼吸平稳后，在软塑料内套管插左侧管，向肺内灌注冷生理盐水，保留30min，将其抽出，待5min后，再安排1次灌注，共5次。制作模型成功。次日，模型对照组、正常对照组取9g/LNaCl溶液1μl/g灌胃，两细辛给药组取同等量中药水提取液1μl/g灌胃，每日1次，共28d。
1.3指标观察
取9g/L氯化钠注射液经气管插管注入支气管行支气管肺泡灌洗，灌入量每次为2ml，安排保留时间为30s，行3次抽洗，至总灌洗液量达约4ml，总灌注量每只6ml，对肺泡灌洗液留取，完成离心操作，将上清取出，留待进一步检测。于左侧颈总动脉取8ml动脉血待测，采用酶联免疫法检测TGF-β1，放免分析法检测PC-Ⅲ，各操作严格依据说明书实施。
1.4统计学分析
文中涉及数据均在SPSS13.0输入，组间计量数据采用（x-±s）表示，计量资料行t检验，P<0.05差异有统计学意义。
2.结果
相较正常对照组，模型对照组大鼠血清、肺泡灌洗液PC-Ⅲ、TGF-β1含量明显升高（P<0.05），提示造模成功。相较模型对照组，两细辛组药组血清、肺泡灌洗液PC-Ⅲ、TGF-β1均下降（P<0.05），对药物的有效性予以了证实。两细辛给药组上述指标无统计学差异（P>0.05）。见表1。
表1各组PC-Ⅲ、TGF-β1含量比较（x-±s）
*
注：*与正常对照组比较P<0.05；#与模型组比较P<0.05。
3.讨论
TGF-β1在众多细胞因子中，可对细胞的调亡、分泌、黏附及细胞外基质的分泌调控，由中性粒细胞、成纤维细胞、巨噬细胞等参与合成和分泌，可对Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原和透明质酸的合成与分泌加以促进，最终促使细胞外基质积聚在肺内，诱导肺泡壁呈增厚显示，引发呼吸功能障碍和肺纤维化[2]。TGF-β1还可促纤维粘连蛋白和胶原mRNA表达水平上调，促纤维细胞在损伤区域大量增殖，对其他纤维化细胞因子产生影响，对炎症的发展起促进作用。慢性肺疾病通常因脂质过氧化损伤血管内皮细胞、炎性细胞、肺泡上皮细胞等细胞膜所致，肺基质中有较多胶原沉积[3]。PC-Ⅲ是细胞外基质一种主要成分，主要在呼吸系统肺间质分布，是细胞外基质降解和合成的一项重要调节因子，而在慢性肺疾病发病过程中，细胞外基质沉积和降解失衡是主要诱导原因，PC-Ⅲ高或低表达对肺纤维化的严重程度具代表作用[4]。
单叶细辛归心、肺、肾经，属草本植物，全草具温肺化饮、止痛通窍、散寒祛风之效，民间有悠久的应用历史。结合本次研究示，单叶细辛可使PC-Ⅲ、TGF-β1表达下调，对肺部炎症反应抑制，进而使组织病理改变减轻，发挥理想的治疗作用，本次研究中，相较正常对照组，模型对照组大鼠血清、肺泡灌洗液PC-Ⅲ、TGF-β1含量明显升高（P<0.05），提示造模成功。相较模型对照组，两细辛组药组血清、肺泡灌洗液PC-Ⅲ、TGF-β1均下降（P<0.05），对药物的有效性予以了证实。两细辛给药组上述指标无统计学差异（P>0.05）。可证实药物成效，且单叶细辛药物效果接近于辽细辛。程孟春等研究证实，针对单叶细辛药理、化学成分近年展开了多项研究，挥发油组成上类似于辽细辛，挥发油具显著的抗惊厥、镇痛、降温、解热、抗炎作用。通过对PC-Ⅲ、TGF-β1合成与分泌抑制，可促各种炎性介质释放改善，发挥治疗作用，是较好的辽细辛代用物，为临床相关疾病的治疗开辟了新的途径。
综上，单叶细辛对PC-Ⅲ、TGF-β1表达具调节作用，可使肺部炎症减轻，发挥保护寒饮射肺模型大鼠肺组织的作用，有广泛的研究应用价值。
【参考文献】
[1]李杨,明海霞,耿广琴.单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠TNF-α及IL-8表达的影响[J].中医研究,2015,03:65-67.
[2]李杨,明海霞.单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠HYP、IL-17及IL-6动态表达的实验研究[J].中医研究,2015,06:58-60.
[3]刘晓东.通腑汤对急性肺损伤大鼠肺、肠组织TGF-β1的影响[D].黑龙江中医药大学,2010.
[4]李杨,明海霞.单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠氧自由基代谢及肺组织病理变化的实验研究[J].中医药学报,2015,05:35-37.