衣原体呼吸道感染中Th17与Treg应答水平及相互调节作用的研究

论文摘要

目的：检测沙眼衣原体小鼠肺炎菌株（Cm）呼吸道感染小鼠中Th17与Treg细胞的应答水平；探讨Th17和Treg细胞在Cm呼吸道感染中的作用及Th17与Treg细胞间的相互调节。方法：取6-8周雌性C57BL/6小鼠,鼻腔吸入40ul含1×103IFU的Cm,建立Cm感染小鼠肺炎模型。通过观察Cm感染后小鼠体重变化、死亡率、肺组织Cm繁殖情况及肺病理学变化以确定小鼠感染Cm后的疾病状态；在感染后不同天数处死小鼠,制备脾细胞悬液,采用流式细胞术检测Th17和Treg百分率；分离肺组织,利用RT-PCR技术检测感染小鼠肺组织Th17和Treg的转录因子ROR-γt、FoxP3及相关细胞因子IL-17、TGF-βmRNA表达,探讨Cm感染小鼠Th17与Treg细胞的免疫应答水平。利用单克隆抗体体内中和技术分别中和Cm感染小鼠体内的IL-17与CD25,在感染后第7天处死小鼠,利用流式细胞术检测Treg及Th17细胞的应答,利用RT-PCR技术检测IL-17和CD25中和小鼠肺组织FoxP3、TGF-β及ROR-γt、IL-17mRNA的表达,以探讨Th17和Treg在Cm感染中的作用及两者间的相互调节。结果：小鼠鼻腔吸入Cm诱导现典型的衣原体肺炎：小鼠体重下降、肺组织衣原体繁殖及大量炎症细胞浸润。Cm呼吸道感染可诱导小鼠在感染肺组织及脾脏产生高水平的Th17和Treg应答,以脾脏Th17与Treg细胞显著扩增；肺组织ROR-γt、FOXp3及其相关细胞因子IL-17和TGF-βmRNA表达增高为特征。内源性IL-17中和,小鼠呈现严重的疾病状态；与给予PBS的对照组小鼠相比,内源性IL-17中和小鼠脾脏Treg百分率及肺组织FOXp3、TGF-βmRNA的表达均无明显变化。与给予PBS的对照组小鼠比较,内源性CD25中和小鼠亦显示严重的疾病状态,但脾脏Th17百分率及肺组织ROR-γt、IL-17 mRNA表达均无明显变化。结论：Cm呼吸道感染小鼠引起典型的衣原体肺炎。Cm呼吸道感染诱导小鼠产生高水平的Th17和Treg应答,Th17和Treg细胞在Cm呼吸道感染中均发挥免疫保护作用,但两者间的相互调节作用并不显著。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、Cm呼吸道感染小鼠Th17与Treg应答水平的研究
• 1.1 对象和方法
• 1.1.1 实验材料
• 1.1.2 实验方法
• 1.2 结果
• 1.2.1 衣原体感染小鼠模型的建立
• 1.2.2 Cm呼吸道感染Th17与Treg应答水平的检测
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 二、Cm呼吸道感染小鼠Th17与Treg的作用及两者间的相互调节
• 2.1 对象和方法
• 2.2 结果
• 2.2.1 Th17在Cm呼吸道感染中的保护作用及对Treg细胞应答的调节
• 2.2.2 Treg细胞在Cm呼吸道感染中的保护作用及对Th17应答的调节
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述 Th17与Treg在感染性疾病中的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢