miRNA在调控恶性肿瘤细胞的恶性进展中的作用研究

论文摘要

肝癌和乳腺癌都是常见的恶性肿瘤,其常发现有miRNA的失调。miRNA是一种种类众多的约22个碱基的非编码小RNA,其通过降解靶标基因的mRNA或抑制翻译来调控其标靶基因的表达。本文,我们发现miRNA与肝癌和乳腺癌的恶性进展密切相关。癌症迁移是肝癌患者因癌死亡的主要原因,而研究发现miRNA可以调控癌症的迁移。有研究表明miR-198在肝癌组织中下调,但是其在肝癌中的功能并不清楚。本文中,我们发现miR-198可以通过抑制原癌基因c-MET的3端非编码区的翻译活性。过表达miR-198可以抑制c-MET基因的表达,且会抑制HGF作用下的HGF/c-MET信号通路下游的p44/42 MAPK活性,从而抑制HGF诱导的肝癌细胞迁移与侵袭。综上所述,miR-198可通过抑制HGF/c-MET信号途径抑制肝癌细胞的的转移与侵袭。雌激素是一种固醇类激素,其以雌激素受体依赖的方式调节细胞的生存与增值,密切影响着女性乳腺癌患者的病情发展。本文中,我们通过TaqMan实时定量PCR实验发现雌激素以雌激素受体依赖的方式抑制miR-26的表达水平,恢复miR-26的表达后能明显抑制雌激素诱导的乳腺癌细胞生长。miR-26可以通过结合到GREB1基因3端非编码抑制其表达,这也是miR-26抑制雌激素诱导的乳腺癌细胞生长的重要原因。总之,miR-26表达水平的改变与雌激素诱导的乳腺癌细胞生长密切相关,也为理解抗雌激素治疗的耐药提供了新的思路。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 miRNA 相关生物学背
• 1.3 肿瘤相关miRNA 研究进展
• 1.4 论文的主要工作
• 第2章 miR-198 在肝癌中的功能及机制研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验结果
• 2.2.1 引言
• 2.2.2 miR-198 通过3’UTR 区抑制c-MET 的表达
• 2.2.4 miR-198 抑制HGF 诱导的肝癌细胞侵袭
• 2.2.5 miR-198 对肝癌细胞增殖的影响
• 2.3 材料与方法
• 2.3.1 细胞培养
• 2.3.2 主要试剂及材料
• 2.3.3 细胞转染
• 2.3.4 RNA 提取及检测
• 2.3.5 蛋白质提取及检测
• 2.3.6 细胞侵袭实验
• 2.3.7 荧光报告载体实验
• 2.3.8 MTT 检测
• 2.4 本章小结
• 第3章 miR-26 在雌激素诱导的乳腺癌细胞增殖中的作用研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验结果
• 3.2.1 雌激素可通过下调miR-26的表达诱导乳腺癌细胞增殖
• 3.2.2 验证 miR-26 的靶标基因
• 3.2.3 抑制 GREB1 的表达后可以抑制雌激素诱导的乳腺癌细胞增殖
• 3.2.4 miR-26 表达的下调促雌激素诱导的 GREB1 表达上调
• 3.2.5 重新表达 GREB1 蛋白可以逆转 miR-26 对增殖的抑制
• 3.3 材料与方法
• 3.3.1 细胞培养
• 3.3.2 主要试剂及材料
• 3.3.3 细胞转染
• 3.3.4 RNA 提取及检测
• 3.3.5 荧光报告载体实验
• 3.4 本章小结
• 第4章 总结和展望
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果