论文摘要
淀粉是小麦籽粒和面粉的主要成分，小麦食品的烘烤蒸煮品质除与面筋数量和质量有关外，在很大程度上受淀粉性质的影响。颗粒结合淀粉合成酶（granule-bound starch synthase，GBSS）在植物细胞中紧密结合于淀粉颗粒上，使合成的直链淀粉保持未分支状态，是与发育中的淀粉粒结合的唯一有活力的蛋白，通过控制直链淀粉合成而影响小麦籽粒和面粉的品质和特性。多年来，人们一直想利用普通遗传学和分子生物学手段降低GBSS的生物学活性从而改良小麦品质。蛋白质的结构决定其生物学功能，因此，研究GBSS与淀粉结合的方式，GBSS的一级、二级和高级结构，能够为控制直链淀粉的合成开拓思路，具有重要的理论和实践意义。 本试验选用中国春等5个品种小麦，通过SDS-PAGE及GBSS浓度的测定，发现小麦GBSS与淀粉颗粒结合的紧密程度受若干因素影响。研究结果如下： 1．对结合有GBSS的淀粉颗粒进行了不同温度的热处理，结果表明，55℃以下水浴30min，GBSS浓度仍小于4.5μg／mL；但当温度超过60℃后，其浓度会高于8μg／mL；当温度达到80℃时，GBSS的解离量最大，达到11.361μg／mL，此后随温度的升高GBSS浓度反而出现小幅下降，95℃时降至10.452μg/mL。100℃沸水浴时，随着时间的增加GBSS的解离量迅速增加，在15min时达到最大值13.221μg/mL，此后其量逐渐降低，60min时GBSS的浓度仅为8.272μg／mL。其他三个种植地理分布（一个国外品种）和品质性状差别较大的小麦品种进行类似的处理，也得到类似的结果。从整体的趋势看，在低强度的热处理下（如低于55℃的水浴），GBSS的解离量很小，CBB R250染色只勉强能见；随着热处理强度的增加，GBSS与淀粉颗粒的结合力减弱，GBSS的解离量增加。这说明温度能加速GBSS与淀粉颗粒的解离。
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摘要ABSTRACT英文缩写符号及中英文对照表1 引言1.1 淀粉的主要构成及其与小麦品质的关系1.1.1 淀粉的主要构成1.1.2 淀粉与小麦品质的关系1.1.2.1 小麦品质的概念1.1.2.2 淀粉对小麦品质的影响1.2 淀粉的生物合成及其关键酶1.3 GBSS的研究现状1.3.1 GBSS的分类1.3.2 Wx基因缺失与小麦直链淀粉含量的关系1.3.3 Wx基因缺失型小麦的筛选和育种1.3.4 Wx基因的起源和地域分布1.3.5 Wx基因结构和序列特征1.4 蛋白质结构预测1.4.1 蛋白质结构研究的基本思路1.4.2 蛋白质结构预测的基础1.4.3 蛋白质结构预测现状1.5 本研究的目的和意义2 材料与方法2.1 供试材料2.2 试验方法2.2.1 SDS-PAGE2.2.1.1 试剂配制2.2.1.2 制板2.2.1.3 制备分离胶2.2.1.3 制备浓缩胶2.2.1.4 加样2.2.1.5 电泳2.2.2 考马斯亮兰R-250染色法2.2.2.1 溶液配制2.2.2.2 染色2.2.2.3 脱色2.2.3 银染法2.2.3.1 溶液配制2.2.3.2 步骤2.2.4 小麦淀粉颗粒制备2.2.4.1 试剂配制2.2.4.2 操作步骤2.2.5 GBSS浓度的测定2.2.5.1 溶液配制2.2.5.2 BSA标准曲线2.2.5.3 GBSS吸光值测定2.3 主要仪器2.3.1 离心机2.3.2 分光光度计2.3.3 PAGE电泳装置2.3.4 凝胶成像系统2.3.5 其它仪器3 结果与分析3.1 小麦GBSS与淀粉颗粒结合特性研究3.1.1 热处理对GBSS与淀粉粒结合紧密度的影响3.1.1.1 温度变化对GBSS解离的影响3.1.1.2 热处理时间长短对GBSS解离的影响2+浓度对GBSS与淀粉结合紧密度的影响'>3.1.2 Mg2+浓度对GBSS与淀粉结合紧密度的影响3.1.3 SDS对GBSS解离的影响3.1.4 2-ME对GBSS解离的影响3.2 GBSS构象模拟分析3.2.1 Wx-A1蛋白3.2.2 Wx-B1蛋白3.2.3 Wx-D1蛋白4 讨论4.1 具有生物活性的GBSS立体构象4.2 GBSS最佳抽提条件的确定4.3 GBSS的SDS-PAGE5 结论5.1 GBSS与淀粉结合的力量5.2 Wx-A1、Wx-B1和Wx-D1蛋白的立体构型预测参考文献致谢攻读硕士学位期间发表论文情况
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标签：小麦论文; 颗粒结合淀粉合成酶论文; 构象论文; 非共价键论文; 结合特性论文;
小麦颗粒结合淀粉合成酶（GBSS）结合特性与模拟构象研究
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