论文摘要
乳腺干细胞应为成体干细胞的一种,其具有无限自我更新能力并能产生子代细胞的能力,本实验体外分离、培养并鉴定乳腺干细胞,观察其生长特征并进行药物干预研究。第一部分实验通过免疫磁株技术,对静止期乳腺的乳腺癌患者癌旁正常组织进行体外培养,并分离出乳腺上皮细胞:导管上皮细胞和肌上皮细胞。其中导管上皮细胞的一个亚群可以向肌上皮细胞转化,通过三维培养可以形成类似的乳腺终末导管结构。并通过免疫组化染色对分离的细胞亚群进行鉴定染色。通过脂质体转染的方法向乳腺上皮细胞内转入SV40质粒,并观察到可使乳腺上皮细胞体外多次传代而不死,获得永生化。并通过免疫磁株技术分离得到的导管上皮细胞亚群具有干细胞特性,而细胞形态无明显改变。第二部分实验对分离培养后的乳腺干细胞加入不同浓度的化疗药物氟尿嘧啶和紫杉醇,以及中药黄芪注射液和Rg3单体,观察其对乳腺干细胞生长的影响。本实验初步分离出具有成体干细胞特性的乳腺导管上皮细胞亚群,并对其细胞表面标记物进行免疫组化染色鉴定。对分离的乳腺干细胞加入药物,并筛选出对乳腺干细胞生长有抑制作用的化疗药物和对其生长有促进作用的中药。
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