人类心脏发育候选基因ZNF569的研究

论文摘要

心血管系统疾病已经成为威胁人类健康的最大的两个敌人之一。在心血管系统疾病的研究中已发现,某些基因在时空上的表达紊乱可导致先天性心脏病,而对部分心血管系统病症高发人群的研究也证明部分后天形成的心脏病与遗传因素有关。我们研究室进行的大规模筛选克隆人类心脏发育的相关基因工作为理解心脏发育的机理、探索心脏发育中的分子调控机制打下了坚实的基础。 ZNF569就是本文作者在利用生物信息学方法筛选人类心脏发育候选基因的过程中发现的一个人类新基因。ZNF569 cDNA全长4071个碱基,ORF全长2061个碱基,编码一个长686个氨基酸残基的蛋白质。该蛋白包含一个KRAB结构域和18个锌指结构域,在包括小鼠、大鼠、果蝇在内的多个物种中均发现了它的同源蛋白,并且它们之间具有极高的相似度,说明此蛋白所在的亚家族可能具有相当重要的功能。Northern结果显示ZNF569在成人的肝、心脏和胎盘中有高表达,在胰腺和骨骼肌中表达较弱,在胚胎心脏、骨骼肌和肝也有表达,提示该基因可能与心脏发育有关。转录活性分析表明在COS-7细胞中过表达ZNF569蛋白可以使MAPK信号途径的两个下游转录因子AP-1和SRE的转录抑制活性显著下降。ZNF569在核质内的亚细胞定位分析进一步证明了其作为转录因子的作用。对ZNF569的分段report assays分析表明,ZNF569可能通过KRAB框和C2H2锌指结构域行使其抑制转录的作用。综合目前的研究结果来看,ZNF569可以通过MAPK信号途径参与了对细胞生命活动的调控过程。 本文作者还对一个Rho family GTPases交换因子hGEFT进行了

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 中英文缩写词简表
• 1.引言和文献综述
• 1.1 心脏发育的基因调控
• 1.2 锌指转录因子与心脏发育
• 1.3 MAPK信号途径与心脏发育
• 1.4 本文的研究意义
• 2.材料与方法
• 2.1 生物信息学软件
• 2.2 材料与方法
• 2.3 ZNF569全长序列的克隆
• 2.4 Northern blot杂交分析
• 2.5 ZNF569基因在亚细胞结构中的定位分析
• 2.6 ZNF569基因的报告基因分析
• 2.7 酵母双杂交实验
• 3.结果及其分析
• 3.1 ZNF569全长cDNA、编码区及其预期编码蛋白分析
• 3.2 ZNF569的蛋白质序列结构、功能及其家族蛋白同源性的生物信息学分析
• 3.3 ZNF569的表达分析
• 3.4 ZNF569的亚细胞定位
• 3.5 ZNF569蛋白的转录活性分析
• 3.6 ZNF569 KRAB结构域和锌指结构域的转录活性分析
• 3.7 酵母双杂交
• 4.其他方面的工作
• 4.1 hGEFT的酵母双杂交工作
• 4.2 LEMD2的ORF扩增及转录活性分析
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 附录1 攻读学位期间发表的学术论文和综述(除论文[2]外均为第一作者
• 附录2后记
• 附录3原创性声明