野生型p53基因转染对人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡诱导、生长抑制及基因表达谱调控的研究

论文题目: 野生型p53基因转染对人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡诱导、生长抑制及基因表达谱调控的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学

作者: 乌新林

导师: 王占民

关键词: 胆囊肿瘤,细胞生长,致瘤性,微阵列,细胞凋亡,细胞,基因,点突变

文献来源: 山东大学

发表年度: 2005

论文摘要: 第一部分: 人胆囊癌细胞系GBC-SD p53基因突变的研究目的对体外培养的人胆囊癌GBC-SD细胞,应用免疫细胞化学SP法和PCR产物直接测序技术,分别从蛋白质和分子水平检测其p53基因状况,为深入研究GBC-SD细胞系生物学行为奠定基础。方法应用细胞培养技术,体外培养人胆囊癌GBC-SD细胞。通过免疫细胞化学SP法定性了解其P53蛋白的表达情况;以GBC-SD细胞基因组DNA为模板,PCR技术扩增p53基因4,5,6,7,8,9外显子,对所得产物经2%琼脂糖凝胶电泳鉴定后,进行正、反向直接测序分析。将测序结果通过NCBI网站应用Blast软件,与基因库中人类p53基因序列进行同源性对比分析。结果体外培养的GBC-SD细胞在含10%灭活新生牛血清的RPMI-1640培养液中生长状态良好。细胞经爬片生长并固定后,免疫细胞化学SP法染色显示P53蛋白过表达;PCR技术成功扩增p53基因4,5,6,7,8,9外显子,对PCR纯化产物进行正、反向测序检测,所得结果经Blast软件分析后证实,GBC-SD细胞p53基因第5外显子126位密码子存在TAC→AAC的碱基颠换,因而使其编码的氨基酸从酪氨酸→天冬酰胺,产生错义突变。结论人胆囊癌GBC-SD细胞系表达突变型P53蛋白,126位密码子的点突

论文目录:

中文摘要

英文摘要

符号说明

第一部分人胆囊癌细胞系GBC-SD p53基因突变的研究

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

附图表

参考文献

第二部分野生型p53基因诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡的实验研究

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

附图表

参考文献

第三部分野生型p53基因转染对人胆囊癌细胞生长抑制和基因表达谱调控的研究

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

附图表

参考文献

致谢

攻读博士学位期间发表的学术论文

发布时间: 2005-10-17

参考文献

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野生型p53基因转染对人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡诱导、生长抑制及基因表达谱调控的研究

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