稻纵卷叶螟对Bt水稻抗性风险及其对策初步研究

论文摘要

本论文就稻纵卷叶螟对Bt水稻抗性风险及其对策进行了初步的研究与探讨，结果如下：1稻纵卷叶螟对CrylAb杀虫蛋白及其转基因水稻的的敏感性采用浸叶喂毒法测定了稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis（Guenée）不同地区种群对CrylAb的敏感性。CrylAb蛋白对稻纵卷叶螟不同地区种群的LC50范围从20.00ng／cm2（浙江杭州）到69.60ng／cm2（浙江宁波）。应用多剂量LD-p线获得了稻纵卷叶螟田间种群对CrylAb的诊断剂量，为620ng／cm2。采用单雌系分析法测定稻纵卷叶螟种群对CrylAb蛋白和Bt水稻的敏感性频率分布。2水稻螟虫对4种Bt杀虫蛋白的敏感性测定采用人工饲料喂毒法和浸叶喂毒法测定了二化螟Chilo suppressalis（Walker）、大螟Sesamia inferens（Walker）和稻纵卷叶螟初孵幼虫对4种Bt杀虫蛋白的敏感性。二化螟对CrylAb、CrylAc、CrylC和Cry2A的LC50值分别为1.739ng／mg、2.645ng／mg、2.794ng／mg和15.965ng／mg；大螟依次为2.455ng／mg、10.046ng／mg、11.803ng／mg和35.359ng／mg；稻纵卷叶螟依次为4.000μg／ml、1.611μg／ml、69.031μg／ml和12.708μ／ml。3基于cry基因的新型融合基因构建通过分子生物学技术，构建含Cry蛋白结构域Ⅱ序列和抗菌活性肽（AMPs）序列融合基因的质粒载体，其表达产物的杀虫活性还有待于进一步验证。这为筛选新型杀虫候选基因用于转基因抗虫作物培育提供了新思路。

论文目录

• 致谢
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1 抗虫作物的抗虫基因资源
• 1.1 蛋白酶抑制剂（Protease Inhibitors,PI）与GMO
• 1.2 Bt杀虫晶体蛋白（Insecticidal Crystal Proteins,ICPs）与GMO
• 1.3 Bt营养期杀虫蛋白（Vegetative Insecticidal Proteins,VIPs）与GMO
• 1.4 外源凝集素（Lectin）与GMO
• 1.5 淀粉酶抑制剂（α-Amylase Inhibitors,α AI）与GMO
• 1.6 动物来源的抗虫基因与GMO
• 2 转基因抗虫作物培育
• 3 抗性产生的研究进展
• 3.1 抗性产生的机理
• 3.2 抗性的监测
• 3.3 抗性的治理措施
• 第二章 稻纵卷叶螟对CrylAb蛋白及其转基因水稻的敏感性
• 1 材料与方法
• 1.1 供试虫源
• 1.2 供试水稻
• 1.3 浸叶生物测定法
• 1.4 稻纵卷叶螟对Bt杀虫蛋白敏感性测定
• 1.5 稻纵卷叶螟对Bt水稻敏感性测定
• 1.6 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 稻纵卷叶螟对CrylAb敏感性的诊断剂量
• 2.2 稻纵卷叶螟对CrylAb蛋白敏感性的种群结构分析
• 2.3 稻纵卷叶螟对Bt水稻敏感性的种群结构分析
• 2.4 稻纵卷叶螟不同地区种群对CrylAb蛋白的敏感性
• 3 讨论
• 第三章 水稻螟虫对4种Bt杀虫蛋白的敏感性测定
• 1 材料与方法
• 1.1 供试昆虫
• 1.2 生物测定
• 2 结果
• 3 讨论
• 第四章 基于cry基因的新型融基因构建
• 1 材料与方法
• 1.1 材料和试剂
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第五章 总讨论
• 1 稻纵卷叶螟对CrylAb蛋白及其转基因水稻的敏感性
• 2 水稻螟虫对4种Bt杀虫蛋白的敏感性测定
• 3 基于cry基因的新型融合基因构建
• 4 本研究的特色与创新点
• 5 今后研究的方向
• 参考文献