Survivin在胃癌中的表达及以其为靶点的基因治疗

论文摘要

目的:研究 survivin 在胃癌中的表达及其在胃癌化疗耐药中的作用,并探讨 survivin 反义寡核苷酸治疗胃癌的可能性。 方法:采用原位杂交和免疫组化法检测 30 例胃癌组织和 20 例良性胃组织 survivin 的表达,免疫组化法检测其 caspase-3 和 cox-2 表达及胃癌细胞株 BGC-823 survivin 的表达,并用原位细胞凋亡检测技术（TUNEL）检测胃癌组织和胃癌细胞株 BGC-823 细胞凋亡情况;用不同浓度羟基喜树碱（OPT）处理 BGC-823 细胞,将不同浓度的 survivin反义寡核苷酸（ASODN）和正义寡核苷酸（SODN）转染入 BGC-823,用四唑盐比色法（MTT）检测细胞生长活性及其生长抑制率,用流式细胞仪检测凋亡细胞及细胞周期分布;电镜观察 OPT 和 ASODN 作用后细胞超微结构改变。OPT 和 ASODN 作用前后 survivin mRNA 的表达情况用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）进行检测。 结果:良性胃组织中无 survivin 的表达,而胃癌组织中 survivinmRNA 阳性表达率 36.67%（P <0.01）,蛋白阳性率 46.67%（P <0.01）,并且其表达在不同的 TNM 分期、有无淋巴结转移之间比较有显著差异（P <0.05）。Cox-2 在胃癌中的表达也明显高于良性胃组织,而caspase-3 则恰好相反（P <0.05）。OPT 和 ASODN 都能抑制 BGC-823细胞的生长增殖,都可以诱导 BGC-823 细胞凋亡增加,并呈剂量依赖性,且 OPT 可以使细胞周期阻滞于 G2/M 期;超微结构可见染色质边集,胞浆内空泡化等凋亡形态的改变;OPT 处理 BGC-823 细胞后,survivin 的表达明显高于对照组和 ASODN +OPT 组（P <0.05）。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文 Survivin 在胃癌中的表达及以其为靶点的基因治疗
• 前言
• 第一部分 Survivin 的表达及其参与胃癌发生发展的可能机制
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分 Survivin 与胃癌化疗耐药的关系及其反义寡核苷酸对化疗增敏的研究
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 文献综述 Survivin 与胃肠肿瘤研究进展
• 致谢
• 攻读学位期间发表文章情况