元胡生物碱的提取分离工艺研究

论文摘要

元胡是罂栗科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎,具有活血化瘀、理气止痛的功效。目前,人工种植的元胡药材普遍存在活性成分-生物碱含量低的问题,这不仅影响了以元胡为主药的药品的药效,也限制了元胡这味传统中药的现代化应用。对元胡生物碱成分的提取、分离工艺进行深入研究,提高其药效成分的含量具有重大的现实意义。本文以浙江苍南产的元胡药材为研究对象,对元胡中总生物碱的提取、分离纯化工艺进行了研究,并对示波极谱法用于元胡生物碱的层析过程检测进行探索,主要研究内容及结果如下:（1）以元胡总生物碱的纯度及总生物碱得率为指标,通过单因素试验、响应面法对乙醇提取过程的敏感因素进行优化,确定出较优提取方案为:提取温度49℃,提取时间116min,乙醇浓度80%,乙醇用量为10倍原料量,此条件下提取三次,得到的生物碱得率为O.598%,生物碱纯度为17.38%。此工艺稳定、可靠。（2）考察了三种大孔树脂AB-8、D101、NKA-2对元胡生物碱的吸附和解吸能力,其中AB-8具有相对较好的吸附和解析能力,更适合用于元胡生物碱的分离。确定吸附树脂后,本研究在单因素试验的基础上,选用Plackett-Burman实验对各因素的显著性进行了考察,并采用响应面法对显著因素进行优化,得到的优化条件为:上样溶液pH值为7.0;样液浓度为10.8mg/mL;径高比为1:10;上样量为1.2 mg/（mL树脂）;洗脱流速为3mL/min;洗脱次序为先以2BV的水冲洗,除去多糖等水溶性成分;之后以1BV的10%L醇冲洗;最后采用80%乙醇洗脱,洗脱至1BV时,生物碱流出,此时开始收集洗脱液,洗脱体积为5BV。此条件下得到的元胡生物碱纯度为58.2%,生物碱转移率为85.4%。采用HPLC检测洗脱液中的主要活性成分延胡索乙素含量,其含量较高（均大于6%）,且比较稳定。（3）尝试将示波极谱法用于元胡生物碱的层析过程检测,试验结果表明该法可用于元胡生物碱层析的定性在线检测。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 文献综述
• 1.1 元胡的本草考证
• 1.2 元胡的现代研究
• 1.2.1 形态特征
• 1.2.2 药材性状
• 1.2.3 化学成分研究
• 1.2.4 提取方法研究
• 1.2.5 分离纯化方法研究
• 1.2.6 生物碱含量的测定
• 1.2.7 元胡生物碱的药理作用研究
• 1.2.8 元胡生物碱的临床应用研究
• 1.2.9 结束语
• 1.3 本课题的立题背景及意义
• 1.4 本课题的研究内容
• 第2章 元胡生物碱的乙醇提取工艺研究
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料及试剂
• 2.2.2 实验设备
• 2.2.3 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 乙醇提取延胡索生物碱工艺的单因素实验
• 2.3.2 乙醇提取延胡索生物碱工艺的响应面优化
• 2.4 本章小结
• 第3章 大孔吸附树脂分离纯化元胡生物碱的工艺研究
• 3.1 前言
• 3.2 实验材料和方法
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 实验设备
• 3.2.3 实验方法
• 3.3 实验结果与讨论
• 3.3.1 吸附树脂的筛选
• 3.3.2 洗脱溶剂的选择
• 3.3.3 洗脱体积的选择
• 3.3.4 柱层析单因素试验
• 3.3.5 柱层析的响应面法优化
• 3.4 本章小结
• 第4章 示波极谱法在元胡生物碱柱层析过程的应用
• 4.1 前言
• 4.2 实验材料与方法
• 4.2.1 材料及试剂
• 4.2.2 实验设备
• 4.2.3 实验方法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 玻碳电极与滴汞电极的比较
• 4.3.2 缓冲溶液的选择
• 4.3.3 磷酸氢二钠—柠檬酸缓冲溶液与80%乙醇不同比例混合的影响
• 4.3.4 不同扫描速率的影响
• 4.3.5 不同洗脱液浓度对峰电流的影响
• 4.3.6 示波极谱仪对整个柱层析过程的检测
• 4.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 发表论文和参加的科研课题情况