人参皂苷Rd抑制大鼠溃疡性结肠炎急性阶段结肠组织内NF-κB信号转导系统激活

论文摘要

目的：研究人参皂苷Rd对三硝基苯磺酸（TNBS）/50%乙醇溶液诱导的大鼠溃疡性结肠炎急性阶段的治疗作用,并通过观察人参皂苷Rd对大鼠结肠组织中NF-κB信号转导系统的调节作用,以深入探讨其治疗作用机理。方法：用三硝基苯磺酸（TNBS）-50%乙醇溶液诱导法建立大鼠溃疡性结肠炎急性阶段模型。将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、柳氮磺吡啶（SASP）组和人参皂苷Rd低、中、高剂量组（10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg）,灌胃给药,每天1次,连续给药7天,第8天处死大鼠,取结肠标本评价炎症程度及指标检测。结肠炎症的评价包括大体形态损伤、组织学变化、组织与血清中髓过氧化物酶（MPO）活力；生化法检测结肠组织与血清中丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）活力；双抗体夹心ELISA法检测结肠组织中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-a）、核因子-κB（NF-κB）、磷酸化IκBα（pIκBα）、IκB激酶（IKK）及蛋白激酶C（PKC）的表达。蛋白质印迹法检测结肠组织中PKC、IKK和（?）pIκBα的表达结果：①给药一周后,与正常对照组比较,模型对照组大鼠结肠湿重指数明显增加；与模型对照组比较,Rd各剂量组大鼠结肠湿重指数明显降低。②大体观察显示,模型对照组大鼠结肠粘膜可见大面积溃疡、坏死,Rd各剂量组大鼠结肠粘膜溃疡面积缩小,肠壁内表面光滑,损伤评分降低；组织学检查结果显示,与模型对照组比较,Rd各剂量组大鼠结肠组织损伤明显减轻。③与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清与结肠组织中的MPO活力明显升高、MDA含量明显升高、GSH-PX及SOD的活力明显降低；与模型对照组比较,Rd各剂量组大鼠结肠和血清中MPO活力明显降低、MDA含量明显降低、GSH-PX及SOD的活力明显升高。④与正常对照组比较,模型对照组大鼠结肠组织中IL-1β、TNF-α的表达水平明显升高；与模型对照组相比较Rd各剂量组大鼠结肠组织IL-1β、TNF-α的表达水平明显下降。与正常对照组比较,模型对照组大鼠结肠组织中PKC、IKK、pIκBα和NF-κB含量显著升高；Rd各剂量组大鼠结肠组织中PKC、IKK、pIκBα和NF-κB含量与模型对照组比较明显降低。结论：人参皂苷Rd对溃疡性结肠炎急性阶段有明显的治疗作用,其作用机制可能与减轻组织损伤、抑制炎细胞浸润、减轻脂质过氧化损伤、抑制促炎细胞因子IL-1β和TNF-α生成有关。人参皂苷Rd能抑制PKC及IκB激酶（IKK）的活化,阻断IκB的磷酸化,抑制核因子-κB（NF-κB）的活化,从而抑制了致炎因子的生成,阻断了炎症过程。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 研究背景
• 1. 现代医学关于UC发病机理的研究
• 1.1 细胞因子
• 1.2 自身免疫
• 1.3 黏附因子
• 1.4 环氧合酶（COX-2）
• 1.5 活性氧（ROS）
• 1.6 核因子-κB
• 2. 溃疡性结肠炎（UC）治疗进展
• 3. 人参皂苷Rd研究进展
• 立论依据
• 1. 人参皂苷Rd的抗氧化作用
• 2. 人参皂苷Rd与钙离子通道及炎症的关系
• 3. 人参皂苷的药动学特征
• 4. 人参皂苷Rd抗大鼠UC的前期实验研究结果
• 5. NF-κB的活化途径及Rd的可能作用靶点
• 6. 本项目的科学意义
• 研究内容
• 1. 材料与方法
• 1.1 药物和动物
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器
• 2 方法
• 2.1 分组
• 2.2 急性溃疡性结肠炎模型的制备
• 2.3 药物配制及给药方案
• 2.4 结肠炎症的评价,标本的采集及处理
• 2.5 统计学处理
• 3. 结果
• 3.1 大鼠外观体征及结肠部位的一般观察
• 3.2 人参皂苷Rd对大鼠结肠湿重变化的影响
• 3.3 大体观察评分结果
• 3.4 病理组织学变化评分结果
• 3.5 人参皂苷Rd对大鼠生化指标与细胞因子含量的影响
• 3.6 人参皂苷Rd对NF-κB信号转导通路的影响
• 4. 讨论
• 4.1 Rd对中性粒细胞浸润程度的影响
• 4.2 Rd对UC大鼠结肠组织氧化损伤及抗氧化能力的影响
• 4.3 Rd对致炎细胞因子含量的影响
• 4.4 Rd对NF-κB信号转导通路的影响
• 结论与意义
• 参考文献
• 缩略词
• 致谢