BBA对实验性帕金森病的治疗作用及其机制研究

论文摘要

目的:探讨植物提取物BBA对帕金森病（Parkinson’s disease,PD）大鼠的治疗作用及其机制。方法:用立体定位技术将神经毒素6-羟基多巴（6-OHDA）注射到左侧大鼠黑质（Substantia nigra,SN）制作PD大鼠模型。22天后,用左旋多巴（L-dopa）诱导大鼠向对侧旋转检测大鼠的行为改变;24天后,免疫组化法测定黑质和纹状体内酪氨酸羟化酶（TH）的表达;尼氏染色观察黑质的病理改变。在6-OHDA注射之后,使用NF-κB核转位抑制剂SN50,采用TUNEL和NF-κB p65荧光双标记法探索6-OHDA诱导的黑质细胞凋亡与NF-κB的关系。黑质受损12h后,免疫组化检测NF-κB p65、IκBα、iNOS、p53、Bcl-2、HSP60蛋白的表达,24h后检测p53蛋白的表达。分别取3h、6h、12h、24h和60h时间点,采用免疫组化法观察腹腔注射BBA对NF-κB p65、IκBα、Bcl-2和iNOS的影响。结果:BBA可明显减少L-dopa诱导的PD大鼠向对侧旋转圈数（P<0.01）;6-OHDA注射24天后,大鼠黑质TH阳性细胞大部分消失,但在腹腔注射BBA后,黑质TH阳性细胞存活明显增多,其中10 mg·kg-1·d-1的BBA的作用最强（P<0.01）;同时,BBA组大鼠同侧纹状体内TH的表达明显高于模型组（P<0.01）;尼氏染色发现模型组大鼠损伤侧的SN神经元大部分消失,并伴有大量的胶质细胞增生,但BBA组损伤侧SN残存的神经元较多,胶质细胞增生减少。黑质损伤48h时,NF-κB p65向核转位的细胞TUNEL染色阳性,而在使用SN50后,未发生核转位的神经元TUNEL染色明显减少。与模型组相比,BBA在黑质受损3h、6h和12h时均能增强NF-κB p65向核转位,而在24h和60h时其核转位较模型组减少,相应的其抑制蛋白IκBα在3h、6h、12h和24h表达降低,而在60h有所增加;黑质受损后12h,BBA可提高黑质神经元HSP60的表达;在黑质损伤24h时发现,BBA可降低促凋亡蛋白p53的表达;与模型组相比,在6-OHDA注射3h、6h、12h和24h后,BBA组大鼠黑质iNOS蛋白的表达降低,而Bcl-2的表达升高。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究背景
• 第一部分 BBA对实验性帕金森病人鼠的治疗作用
• 一 材料和方法
• 二 实验结果
• 三 小结
• 第二部分 BBA对帕金森病大鼠治疗作用的机制研究
• 一 BBA对6-OHDA损伤人鼠黑质NF- B通路激活的影响
• 二 BBA对6-OHDA损伤大鼠黑质促凋亡蛋白iNOS、p53表达的影响
• 三 BBA对6-OHDA损伤大鼠黑质抗凋亡蛋白Bcl-2、HSP60表达的影响
• 四 小结
• 讨论
• 机制示意图
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的论文
• 附录一 综述: BBA的神经保护作用的研究进展
• 附录二 论著:长期低剂量皮下注射鱼藤酮制作大鼠帕金森病模型
• 附录三 英文缩写表
• 致谢