糖胺聚糖产生菌的筛选及其发酵条件的优化

糖胺聚糖产生菌的筛选及其发酵条件的优化

论文摘要

本文利用糖胺聚糖可与氯化十六烷基吡啶(cetylpyridinium chloride,CPC)反应生成白色混浊的性质,从不同来源的500株菌种中筛选的到4株菌种,再通过琼脂糖凝胶电泳,筛选得到一株糖胺聚糖产生菌,编号为GS36。其发酵产物纯化后测得的红外光谱图与硫酸软骨素标准红外光谱图比较基本一致,可初步确定产物为硫酸软骨素。经形态观察和生理生化实验,初步鉴定该菌株为坚实芽孢杆菌(B.firmus)。 通过单因素实验和正交实验,进一步对该菌株的发酵条件进行了优化:以1.5%葡萄糖为碳源,0.3%牛肉膏为氮源,加入0.1%Na2SO4,0.1%K2HPO4,0.02%MgSO4,培养基起始pH=7,30℃下摇瓶培养24h,发酵液中产物浓度最高为0.133mg/ml。 经过质粒提取和琼脂糖凝胶电泳,检测到有质粒存在,经过质粒消除,该菌发酵液中的产物浓度大幅度降低,推测该菌株调节酶活的基因可能存在于质粒上。 菌株活化后接种至发酵培养基培养24h后,对胞内胞外产物

论文目录

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  • 研究论文:糖胺聚糖产生菌的筛选及其发酵条件的优化
  • 引言
  • 材料与方法
  • 1 实验材料
  • 2 实验方法
  • 结果与分析
  • 1 菌种筛选和鉴定
  • 2 产物的红外光谱鉴定
  • 3 标准曲线的制作
  • 4 发酵条件的研究
  • 5 菌株的质粒提取和琼脂糖凝胶电泳
  • 6 质粒消除的结果
  • 7 酶活调节基因位置的初步确定
  • 8 胞内胞外产物含量的比较
  • 讨论
  • 1 筛选方法的建立
  • 2 标准曲线的制作及产物含量的测定
  • 3 产物的提纯—乙醇沉淀法
  • 4 关于质粒的消除
  • 5 质粒消除子
  • 6 糖胺聚糖合成酶
  • 小结
  • 致谢
  • 论文发表与获奖情况
  • 声明
  • 参考文献
  • 文献综述:糖胺聚糖
  • 前言
  • 1 透明质酸
  • 2 肝素
  • 3 硫酸软骨素
  • 4 小结
  • 参考文献
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