Ito细胞参与TPN诱发的肝功能障碍发病机制的实验研究

论文摘要

目的为探究肝脏Ito细胞在长期应用全肠道外营养（TPN）而诱发的肝脏功能障碍中形态和功能的变化，从而试图揭示Ito细胞在TPN相关的肝脏病变发病机制中的重要性。方法把16只幼猪随机分为实验组和对照组，每组各8只。实验组幼猪禁食禁水2周，经中心静脉给予持续的TPN点滴；对照组允许进食标准猪饲料和自由饮用自来水。两组每日摄人大致相同的热卡。每只猪分别于实验开始当天（0天）和实验结束当天（14天）获取血液标本和肝脏组织活检标本。血液标本用于检测肝生化功能指标的变化；肝脏活检标本除了应用普通显微镜评价肝脏组织学病理变化外；还分别用透射电子显微镜和免疫组织化学方法分析Ito细胞在这一病变中的相应变化。结果实验开始时（0天），两组血生化肝功能指标以及活检肝组织的形态学观察无明显异常；而且应用免疫组织化学分析Ito细胞的分布和数量也未见异常。然而，TPN应用14天后，实验组幼猪的肝脏血生化检查结果血清总胆红素水平和胆酸浓度明显异常（P＜0.05）；HE染色显示轻度的炎症细胞的浸润，重度的肝细胞脂肪变性，以及胆管部分增生。其HE评分结果与对照组相比明显异常（P＜0.05）。α-SMA免疫组织化学分析显示活化的Ito细胞数目明显增多，广泛分布于窦周间隙，其染色阳性率与对照组相比明显异常（P＜0.05）；透射电镜观察显示Ito细胞胞浆内粗面内质网明显增多，细胞肥大，胞浆突起更为明显；部分活化的Ito细胞伴随着维生素A脂肪滴消失；胞浆外窦周间隙内可观察到胶原纤维的形成。而且，窦状隙内皮细胞下可见基底膜样结构的沉积。由于增生肥大的Ito细胞的“挤压”作用以及窦状隙内皮细胞外基底膜样物质的形成，可以观察到窦状隙变形并趋于狭窄，而Disse间隙相应地变宽。激活的Ito细胞胞浆中粗面内质网明显增多。结论（1）TPN应用2周后，幼猪肝组织发生了以脂肪变性和小胆管增生为显著特点的病理变化。而肝脏生化酶学却表现出了相对“滞后”的现象。（2）长期持续应用TPN直接或间接激活了肝脏窦周间隙中的Ito细胞，使得该细胞由静态贮脂细胞活化并表现出肌纤维母细胞的形态和功能特征，大量增生，产生细胞外基质并合成胶原纤维。（3）活化的Ito细胞部分失去脂肪滴，表明脂肪滴的消失并非该细胞活化的必要条件，或者认为脂肪滴的脱落存在着“时空不同步性”。此外，伴随着Ito细胞中脂肪滴的部分脱落，相应地，肝细胞中同时出现了较大的脂肪滴。这种现象可以推测肝脏的脂肪变性也可能与活化的Ito细胞赋予的“脂肪滴转移”现象有关。（4）活化Ito细胞获得的收缩特性使得窦周间隙的张力明显增加；同时，增生肥大的Ito细胞的“推挤”式作用造成窦状隙趋于狭窄从而增加了肝脏的血流阻力，肝细胞血液供应减少而遭受缺血缺氧性损伤；同时镶嵌于肝细胞间的小胆管由于受到活化增生的Ito细胞的影响而发生失代偿性增生导致管腔狭窄影响胆汁的正常排泌，造成胆汁淤积，最终损害肝功能，并可能逐渐导致肝纤维化。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言（Preface）
• 对象与方法（Subjects and Methods）
• 结果（Results）
• 讨论（Discussion）
• 结论（Conclusions）
• 未来的研究展望（Future studies）
• 综述（Review）
• 参考文献（References）
• 发表论文及参与研究说明（Remarks）
• 致谢（Acknowledgments）