论文摘要
第一部分:维持性血透患者血清体外诱导血管新生目的探讨维持性血液透析患者血清在体外诱导血管新生及其机制。方法用维持性血透患者血清（实验组）及健康人血清（对照组）分别培养人脐静脉内皮细胞,倒置显微镜下观察血管样结构形成,MTT法检测细胞增殖,Transwell小室测定细胞迁移能力,比色法检测细胞内活性氧产生,细胞免疫化学和Western-blot法检测内皮细胞p38蛋白表达。结果实验组内皮细胞培养30h后有血管样结构形成,细胞增殖能力和细胞迁移能力均高于对照组,差异有显著性（P<0.05）;与对照组比较,培养10h内皮细胞p-p38表达及培养30h细胞内活性氧产生均增加,差异有显著性（P<0.05）,且分别与细胞增生和细胞迁移具有相关性（P<0.05）。结论维持性血透患者血清能够在体外诱导血管新生,其机制可能与内皮细胞内p-p38表达增加及ROS产生增多有关。第二部分:维持性血液透析患者血清体外诱导新生血管的内皮细胞凋亡目的进一步探讨维持性血液透析患者血清在体外诱导血管新生同时,也促进了新生血管的内皮细胞凋亡及其机制。方法用维持性血透患者血清（实验组）及健康人血清（对照组）分别培养人脐静脉内皮细胞,倒置显微镜下观察血管样结构形成,MTT法检测细胞增殖,用Transwell细胞小室测定细胞迁移能力,TUNEL法检测细胞凋亡,比色法检测细胞内活性氧产生,细胞免疫化学和Western-blot法检测细胞内p38和caspase-3表达。结果内皮细胞在血清培养基培养30h后,实验组有血管样结构形成,TUNEL法染色显示,血清刺激40h后形成血管样结构区域的内皮细胞出现凋亡,与对照组比较差异有显著性（P<0.05）;实验组内皮细胞内p-p38、caspase-3表达增多,而细胞内ROS产生持续增加,与对照组比较差异有显著性（P<0.05）,并且ROS与内皮细胞凋亡具有正相关性（P<0.05）。结论血液透析患者血清既可诱导血管新生,又可促进其所形成血管的内皮细胞凋亡,其机制可能与内皮细胞内p-p38、caspase-3表达增加以及ROS产生增多有关。第三部分:短期维持性血透患者与长期维持性血透患者血清体外诱导血管新生及内皮细胞调亡的比较目的比较短期血液透析患者血清与长期血液透析患者血清对体外诱导的血管新生以及内皮细胞凋亡的影响。方法用长期透析患者血清（长期透析组）和短期透析患者血清（短期透析组）分别培养人脐静脉血管内皮细胞,倒置显微镜下观察血管样结构形成,MTT法检测细胞增殖,用Transwell小室测定细胞迁移能力,TUNEL法检测细胞凋亡,比色法检测细胞内活性氧产生,细胞免疫化学和Western-blot法检测内皮细胞p38和caspase-3表达。结果长期透析组内皮细胞培养30h后,有血管样结构形成,培养40h出现新生血管的内皮细胞凋亡,而短期透析组内皮细胞无明显血管新生及细胞凋亡;长期透析组内皮细胞迁移及增殖能力强于短期透析组,差异有显著性（P<0.05）;长期透析组内皮细胞活性氧产生与细胞内p-p38、caspase-3表达强于短期透析组（P<0.05）;并且内皮细胞产生的ROS与细胞的凋亡与迁移以及内皮细胞表达的p-p38与内皮细胞增生具有相关性（P<0.05）。结论与短期透析患者血清比较,长期维持性血液透析患者血清在体外诱导脐静脉内皮细胞血管样结构形成能力更强,其所形成血管的内皮细胞也易凋亡,其机制可能与长期血透患者血清培养的内皮细胞的活性氧产生增多及细胞内p-p38、caspase-3表达增强有关。