导读:本文包含了山荷叶素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:山荷叶素糖苷,V-ATP酶,乳腺癌细胞,迁移
山荷叶素论文文献综述
王英[1]（2016）在《山荷叶素糖苷类化合物抑制人乳腺癌细胞侵袭及迁移的作用和机制》一文中研究指出目的研究山荷叶素糖苷类化合物对V-ATPase活力的影响,探讨其对人乳腺癌细胞侵袭及迁移的作用及机制。方法1)化合物活性筛选:Wound healing实验(划痕实验)观察山荷叶素糖苷类化合物对人乳腺癌细胞MCF-7迁移的影响;V-ATPase试剂盒检测山荷叶素糖苷类化合物对MCF-7细胞V-ATPase活力的影响。2)目标化合物(mj-9e)的细胞毒性研究及对乳腺癌细胞V-ATPase的影响:MTT法检测肿瘤细胞及正常细胞的活力;台盼蓝染色法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;V-ATPase试剂盒检测V-ATPase的活力;溶酶体荧光探针LysoTracker染色检测细胞溶酶体内pH;荧光探针BCECF-AM检测细胞胞质pH。3)mj-9e对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响:Wound healing实验观察细胞的迁移;Transwell实验反映细胞的侵袭;Western blot检测MMPs的表达;明胶酶谱法检测MMP-2及MMP-9的活化。4)mj-9e对乳腺癌细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响:Western blot检测β-catenin的表达;免疫荧光观察mj-9e对β-catenin胞内分布及表达的影响;RT-PCR(逆转录PCR)检测β-catenin及下游靶基因Cyclin D1、MMP-2、c-myc的转录水平;分别采用蛋白酶抑制剂MG132及蛋白合成抑制剂CHX处理细胞后观察β-catenin蛋白的表达。5)GSK3β在mj-9e抑制β-catenin通路中的作用:Western blot检测p-GSK3β的表达;采用GSK3β抑制剂LiCl处理细胞后,研究mj-9e对Wnt/β-catenin信号通路的影响,包括Western blot检测β-catenin表达变化,免疫荧光检测β-catenin胞内分布及表达的影响,Wound healing实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,Western blot检测MMP-2蛋白的表达变化。结果1)在合成的8种山荷叶素天然糖苷类化合物中,mj-9e对乳腺癌细胞的迁移能力及V-ATPase活力抑制作用最强,因此选取mj-9e作为目标化合物,探讨其抑制乳腺癌细胞侵袭和转移的作用与机制。2)mj-9e(0.1~1μM)作用24 h后对MCF-7细胞的增殖有明显的抑制作用,但不会诱导细胞凋亡,同时对正常人胚胎肝细胞WRL68活力无明显影响。mj-9e可以抑制乳腺癌细胞V-ATPase活力且具有浓度依赖性,与同浓度的Baf A1抑制作用相当;mj-9e能够降低MCF-7细胞胞质内pH,增加溶酶体内的pH。3)mj-9e对低侵袭性乳腺癌细胞(MCF-7)及高侵袭性乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的侵袭及迁移能力均有抑制作用且具有浓度依赖性,与同浓度的Baf A1抑制作用相当;mj-9e可以抑制乳腺癌细胞MMP-2及MMP-9的表达与活化。4)mj-9e可以抑制MDA-MB-231细胞β-catenin蛋白的表达以及核转位;显着抑制其下游靶基因Cyclin D1及MMP-2的转录;mj-9e可能促进MDA-MB-231细胞β-catenin的泛素化降解。5)mj-9e可以降低MDA-MB-231细胞p-GSK3β的表达。GSK3β活性抑制剂LiCl单独处理24 h后,p-GSK3β表达显著升高;当LiCl与mj-9e共同作用时p-GSK3β及β-catenin表达上调,β-catenin发生核转位,提示通过LiCl抑制GSK3β激酶活性可逆转mj-9e对β-catenin的抑制作用;通过Wound healing实验、Transwell实验、Western blot进一步证明mj-9e是通过降低GSK3β激酶活性抑制β-catenin通路,从而实现对人乳腺癌细胞的侵袭及迁移的抑制作用。结论山荷叶素天然糖苷类化合物mj-9e可以较强地抑制乳腺癌细胞的V-ATPase活力,通过GSK3β抑制β-catenin通路从而实现对乳腺癌细胞的侵袭及迁移的抑制作用。(本文来源于《南通大学》期刊2016-04-10）
张志涛[2]（2014）在《逆转肿瘤酸性微环境的山荷叶素糖苷类化合物的合成及活性研究》一文中研究指出目的完成两个抗肿瘤活性山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)的全合成,并对这两个天然糖苷进行结构修饰和构效关系研究。在此基础上研究山荷叶素糖苷的抗肿瘤机制。方法1)化学合成:以6-溴藜芦醛为原料,经过Adol、Diels-Alder等5步反应42.5%的总产率得到山荷叶素(diphyllin)。再以山荷叶素和D-木糖为原料,经过PTC糖苷化、Schmidt糖苷化等12步反应合成得到2个山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)和12个山荷叶素糖苷类似物。2)抗肿瘤活性初步研究:采用MTT比色法检测14个山荷叶素糖苷对A549(人非小细胞性肺癌细胞)、HCT116(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、RM(小鼠前列腺癌细胞)四种肿瘤细胞的增殖抑制活性。3)抗肿瘤机制的研究:采用V-ATP酶定量检测试剂盒检测所合成的山荷叶素糖苷对V-ATP酶的抑制活性;采用细胞荧光技术检测所合成的山荷叶素糖苷对HepG2细胞溶酶体酸性的抑制活性。结果1)完成了两个抗肿瘤活性山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)的全合成,并对这两个天然糖苷进行结构修饰得到了12个糖苷类似物。通过核磁共振氢谱、碳谱以及高分辨质谱等方法对其进行结构确证。2)MTT法检测得到了14个山荷叶素糖苷对四种细胞株的半数抑制浓度(IC50值)。14个山荷叶素糖苷均表现出较强的增殖抑制活性,对HCT116和Hep G2两种细胞株的作用更明显,IC50值为0.02-3.8μM。3)山荷叶素糖苷对V-ATP酶具有较强的抑制活性。类似物ZT-17和ZT-19在浓度为100 n M时使V-ATP酶的活性下降到20%以下。4)山荷叶素糖苷在浓度为100 n M时可完全逆转人肝癌细胞HepG2溶酶体中的酸性环境。结论成功合成了两个山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)和12个糖苷类似物;大多数山荷叶素糖苷具有较强的肿瘤细胞增殖抑制活性;山荷叶素糖苷通过抑制V-ATP酶逆转肿瘤细胞酸性微环境来发挥其抗肿瘤作用。(本文来源于《南通大学》期刊2014-04-10）
赵育,倪春燕,张虞婷,朱俐[3]（2013）在《山荷叶素异羟肟酸和硫醇衍生物的合成与抑制肿瘤细胞增殖活性》一文中研究指出通过药效团整合策略将天然抗肿瘤活性木脂素山荷叶素与组蛋白去乙酰化酶抑制剂的药效团长链异羟肟酸或长链硫醇进行拼合,得到了7个未见文献报道的山荷叶素衍生物,通过核磁共振氢谱、碳谱、高分辨质谱等方法进行了结构表征.并采用了噻唑蓝法(MTT)法对这些化合物的体外抑制肿瘤细胞增殖活性进行了测试,异羟肟酸类衍生物具有较强的活性.(本文来源于《有机化学》期刊2013年01期）
沈卫东[4]（2012）在《空泡型质子泵V-ATPases在胃癌增殖侵袭中的作用及山荷叶素干预机制研究》一文中研究指出研究背景胃癌是常见消化道恶性肿瘤之一,我国胃癌患者死亡率较高。胃癌的侵袭转移是治疗失败及复发的重要原因,临床尚缺乏有效的干预措施。近来研究发现,肿瘤的侵袭转移与空泡型质子泵(the vacuolar H+-adenosine triphosphatase, V-ATPases)密切相关。在肿瘤组织中V-ATPases高表达,并能够感知细胞内pH,以ATP为能量,将癌细胞产生的过多的H+泵出细胞外,导致胞外的酸性微环境。国内上海交通大学肿瘤研究所通过RNA干扰技术抑制V-ATPases的基因表达,有效抑制了肿瘤的侵袭转移。但V-ATPases在利用质子泵功能维持细胞内外特定的pH值同时,又作用于哪些信号通路影响肿瘤细胞的侵袭转移能力,尚未明确。本研究拟通过沉默胃癌细胞SGC7901中V-ATPases表达,研究V-ATPases与Wnt/β-catenin信号通路之间的关系。近年来,已经发现一些药物及分子能抑制V-ATPases,如巴弗洛霉素、NIK12192及FR202126等,但尚无相关药物进入临床。山荷叶素是传统中药山荷叶提取物的主要成分,属于木脂素类化合物,具有较好的抗肿瘤活性,而对正常细胞毒性很小。但山荷叶素抗肿瘤的确切机制尚未完全清楚。近来有研究表明,山荷叶素能抑制破骨细胞的V-ATPases的活性,且抑制活性与山荷叶素有剂量依赖关系。那么山荷叶素对胃癌细胞V-ATPases是否同样具有抑制作用,且效应如何?国内外尚无相关报道。基于上述研究前提,本项目选择了山荷叶素作为胃癌细胞V-ATPases抑制剂,研究其阻断Wnt/β-catenin信号通路的作用及与胃癌细胞增殖侵袭的关系。本实验分为叁个部分：第一部分研究V-ATPases蛋白表达和胃癌临床病理特征和预后的相关性；第二部分研究沉默V-ATPases基因对胃癌细胞SGC7901增殖和侵袭能力的影响及机制：第叁部分为山荷叶素调控V-ATPases对胃癌细胞增殖侵袭影响的体内外研究。第一部分V-ATPases蛋白表达和胃癌临床病理特征及预后的相关性研究目的：研究V-ATPases蛋白在胃癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的相关性。方法：运用免疫组化技术检测50例胃癌组织、正常组织的V-ATPases蛋白农达水平,,并统计分析V-ATPases表达与临床病理指标和预后的关系。结果：胃癌组织中V-ATPases蛋白阳性表达率为76%,高于正常组织(30%)。胃癌组织中V-ATPases表达与肿瘤大小(P=0.017)、病理分级(P=0.038)、淋巴结转移(P=0.029)有相关性,与其它临床病理特征性别、年龄、浸润深度、脉管浸润及TNM分期无明显相关性；在运用Cox回归单因素模型进行单变量分析中，肿瘤大小、脉管浸润、淋巴结转移、浸润深度、TNM分期和V-ATPases是重要的预后影响因素,P值分别为0.000、0.009、0.003、0.000、0.000、0.000。采用Cox比例多因素模型进行多变量分析结果显示,V-ATPases表达和TNM分期可能是预后的独立影响因素,P值分别为0.010和0.001。结论：V-ATPases在胃癌组织中的蛋白表达水平明显高于正常组织,V-ATPases可能与胃癌发生、进展相关。V-ATPases蛋白表达与肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移有关,可能是影响胃癌预后的一个重要指标。第二部分沉默V-ATPases基因对胃癌细胞SGC7901增殖和侵袭能力的影响及机制目的：利用转染小干扰RNA沉默人胃癌细胞株SGC7901的V-ATPases,分析V-ATPases在对胃癌细胞增殖、转移的作用及机制。方法：对于未转染的细胞株、转染siRNA-GAPDH、转染siRNA-V-ATPases的SGC7901细胞株,采用MTT试剂盒测定其细胞的生存率,以及克隆形成试验计算增殖率；运用AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡；采用Transwell进行细胞侵袭试验,以确定V-ATPases在胃癌细胞侵袭中的作用；并测定干扰前后SGC7901细胞株中Wnt/β-catenin信号通路中LRP磷酸化及对其下游基因的表达。结果：SGC7901细胞株经转染siRNA-V-ATPases后,细胞的增殖、克隆形成能力显着降低,凋亡率显着上升,并表现出剂量依赖关系。Transwell实验结果提示,转染siRNA-V-ATPase后SGC7901细胞迁移能力下降。以上结果提示,V-ATPases在胃癌的增殖、侵袭中具有一定作用。进一步研究结果显示,干扰SGC7901细胞株V-ATPases表达后,LRP磷酸化受到抑制,Wnt/β-catenin信号通路中下游基因β-catenin、Cyclin-D1及C-Myc表达显着下降(P<0.05)。结论：V-ATPases在胃癌细胞株SGC7901增殖、侵袭中具有一定作用,靶向抑制V-ATPases后,胃癌细胞株SGC7901增殖、侵袭能力下降,同时能抑制Wnt/β-catenin信号通路中LRP磷酸化。V-ATPases有望成为治疗胃癌新的靶点。第叁部分山荷叶素调控V-ATPases对胃癌细胞增殖侵袭影响的体内外研究目的：研究山荷叶素(diphyllin)对胃癌细胞SGC7901增殖和侵袭的影响,并探讨与V-ATPases表达、Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法：将不同浓度的diphyllin作用于SGC7901细胞株不同时间,采用MTT试剂盒测定其细胞的生存率,以及克隆形成试验计算增殖率。采用Tran swell进行细胞侵袭试验,以确定山荷叶素在胃癌细胞侵袭中的作用；并测定山荷叶素作用前后SGC7901细胞株中Wnt/β-catenin信号通路中LRP磷酸化及其下游基因表达的差异。建立裸鼠皮下荷瘤模型,分析diphyllin在裸鼠体内对胃癌生长的影响。结果：不同浓度的diphyllin作用于SGC7901细胞后,细胞的增殖、克隆形成能力显着降低,凋亡率显着上升,并表现出剂量依赖关系,48小时IC50为7.8μM。5μM、10μM浓度山荷叶素作用后SGC7901细胞迁移能力下降。同时,diphyllin能抑制胃癌细胞中V-APTase基因及蛋白表达,并降低细胞内pH,逆转细胞内外pH梯度。进一步研究发现,山荷叶素能抑制磷酸化LRP表达,并下调其下游基因β-catenin、Cyclin-D1及C-Myc表达(P<0.05)。动物实验结果显示,裸鼠在给予diphyllin后,移植瘤体积显着减小,净体重较对照组升高,瘤体中V-APTases表达下降,外周血清中MMP-2、MMP-9表达显着下降(P<0.05)结论：diphyllin在体内外均可抑制胃癌细胞SGC7901的增殖、侵袭能力,并诱导凋亡,其机制可能与抑制V-APTases表达、抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。(本文来源于《南京中医药大学》期刊2012-06-01）
赵育,陆亚鹏,朱俐[5]（2008）在《山荷叶素醚类和苯甲酸酯类衍生物的合成》一文中研究指出合成了9种天然抗肿瘤活性萘基木质素山荷叶素的衍生物,通过威廉森醚化法合成了5种醚类衍生物,产率为76%~93%;通过DCC酯缩合法合成了4种苯甲酸酯类衍生物,产率为81%~85%,其结构分别采用1H NMR、13C NMR、HRMS及元素分析测试技术加以证实。(本文来源于《应用化学》期刊2008年11期）
山荷叶素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的完成两个抗肿瘤活性山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)的全合成,并对这两个天然糖苷进行结构修饰和构效关系研究。在此基础上研究山荷叶素糖苷的抗肿瘤机制。方法1)化学合成:以6-溴藜芦醛为原料,经过Adol、Diels-Alder等5步反应42.5%的总产率得到山荷叶素(diphyllin)。再以山荷叶素和D-木糖为原料,经过PTC糖苷化、Schmidt糖苷化等12步反应合成得到2个山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)和12个山荷叶素糖苷类似物。2)抗肿瘤活性初步研究:采用MTT比色法检测14个山荷叶素糖苷对A549(人非小细胞性肺癌细胞)、HCT116(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、RM(小鼠前列腺癌细胞)四种肿瘤细胞的增殖抑制活性。3)抗肿瘤机制的研究:采用V-ATP酶定量检测试剂盒检测所合成的山荷叶素糖苷对V-ATP酶的抑制活性;采用细胞荧光技术检测所合成的山荷叶素糖苷对HepG2细胞溶酶体酸性的抑制活性。结果1)完成了两个抗肿瘤活性山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)的全合成,并对这两个天然糖苷进行结构修饰得到了12个糖苷类似物。通过核磁共振氢谱、碳谱以及高分辨质谱等方法对其进行结构确证。2)MTT法检测得到了14个山荷叶素糖苷对四种细胞株的半数抑制浓度(IC50值)。14个山荷叶素糖苷均表现出较强的增殖抑制活性,对HCT116和Hep G2两种细胞株的作用更明显,IC50值为0.02-3.8μM。3)山荷叶素糖苷对V-ATP酶具有较强的抑制活性。类似物ZT-17和ZT-19在浓度为100 n M时使V-ATP酶的活性下降到20%以下。4)山荷叶素糖苷在浓度为100 n M时可完全逆转人肝癌细胞HepG2溶酶体中的酸性环境。结论成功合成了两个山荷叶素天然糖苷(Cleistanthin A和Cleistanthoside A)和12个糖苷类似物;大多数山荷叶素糖苷具有较强的肿瘤细胞增殖抑制活性;山荷叶素糖苷通过抑制V-ATP酶逆转肿瘤细胞酸性微环境来发挥其抗肿瘤作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
山荷叶素论文参考文献
[1].王英.山荷叶素糖苷类化合物抑制人乳腺癌细胞侵袭及迁移的作用和机制[D].南通大学.2016
[2].张志涛.逆转肿瘤酸性微环境的山荷叶素糖苷类化合物的合成及活性研究[D].南通大学.2014
[3].赵育,倪春燕,张虞婷,朱俐.山荷叶素异羟肟酸和硫醇衍生物的合成与抑制肿瘤细胞增殖活性[J].有机化学.2013
[4].沈卫东.空泡型质子泵V-ATPases在胃癌增殖侵袭中的作用及山荷叶素干预机制研究[D].南京中医药大学.2012
[5].赵育,陆亚鹏,朱俐.山荷叶素醚类和苯甲酸酯类衍生物的合成[J].应用化学.2008