胰岛素控制下糖尿病大鼠快速上颌扩弓后的骨代谢变化

论文摘要

目的:随着人们生活水平的日益提高,糖尿病的患病率与日俱增,且患病年龄也有逐渐降低的趋势。糖尿病患者的正畸治疗已被口腔正畸学领域所关注。上颌骨快速扩弓已成为一项在临床上广泛使用的正畸技术,但糖尿病常易合并骨质疏松,而骨质疏松也会相应加速骨吸收,而这对快速扩弓又会产生不利的影响,因此通过快速扩弓的动物实验研究,为糖尿病患者正畸扩弓的临床应用提供大量的科学依据和统计数据就显得尤为必要。本课题旨在建立大鼠环圈式扩弓的模型,探讨糖尿病大鼠与正常大鼠、经胰岛素控制的糖尿病大鼠的扩弓效果及扩弓后的骨代谢的变化,为临床糖尿病患者的上颌快速扩弓治疗提供基础实验理论依据。方法:健康雄性5周龄SD大鼠72只,体重200-220克,随机分为3组,正常对照组（A组）24只,糖尿病组（B组）24只,糖尿病胰岛素治疗组（C组）24只。每组随机分为两组,即扩弓组8只、保持组16只。B、C组大鼠空腹一次性腹腔内注射60mg/kgSTZ溶液, A组给予同等剂量的缓冲液腹腔注射,72h后取尾静脉血进行血糖测定,将血糖>16.7mmol/L,尿糖>+++定为糖尿病动物模型。糖尿病模型成模后C组大鼠即开始用胰岛素控制血糖,范围为8-10mmol/L。A组、B组给予同等剂量的生理盐水注射。糖尿病模型成模21天后各组大鼠上装置,用0.45mmSS圆丝弯制两眼簧扩弓器,臂长约10mm,末端回折插入第一、二磨牙邻接点之下,臂扩展开5mm,可以产生200g的力值,每3d加力一次,力值保持200g不变。扩弓7天后全麻下颈动脉取血处死A、B、C组中的扩弓组,每只大鼠取血约10毫升,低温离心留取血清,取部分血清用全自动生化分析仪测定血清钙、磷、碱性磷酸酶的含量,部分血清用全自动放免仪测定血清降钙素的含量;每只大鼠取血后立即剥离腭骨组织,电子天平分别称重,然后按1ml/mg的比例在骨组织中加入生理盐水并于低温下快速捣成匀浆,低温离心后提取上清液,放免法测定组织中的降钙素含量。扩弓7天后A、B、C组中的保持组大鼠将扩弓装置两眼簧的圈用自凝塑料粘固作为保持器,保持21天。保持组分别在扩弓结束和保持结束前第4天、第3天全部大鼠给予四环素每天30mg/kg,分两次灌胃。保持21天后全麻下颈动脉取血处死各组大鼠,每只大鼠取血约10毫升,低温离心留取血清,取部分血清测定血清钙、磷、碱性磷酸酶的含量,部分血清测定血清降钙素的含量;各保持组分别取8只大鼠的腭骨组织,放免法测定组织中的降钙素含量。各保持组分别取8只大鼠的腭骨,在第一对磨牙水平连线处切片,制备20μm厚的四环素荧光标记不脱钙骨磨片及甲苯胺蓝染色切片。结果:1生化指标:扩弓组的血清钙含量,B组较A、C组高,有统计学差异（p<0.05）;保持组的血清钙含量,B组较A、C组高,有统计学差异（p<0.05）。扩弓组的血清磷含量,B组较A、C组低,但无统计学差异（p>0.05）;保持组的血清磷含量,B组较A、C组低,但无统计学差异（p>0.05）。扩弓组的血清碱性磷酸酶含量,B组较A组、C组高,有统计学差异（p<0.01）;保持组的血清碱性磷酸酶含量,B组较A组、C组高,有统计学差异（p<0.01）。A组血清钙、磷、碱性磷酸酶在扩弓组和保持组均无统计学差异（p>0.05）;B组血清钙、磷、碱性磷酸酶在扩弓组和保持组均无统计学差异（p>0.05）;C组血清钙、磷、碱性磷酸酶在扩弓组和保持组均无统计学差异（p>0.05）。2血清降钙素含量:放免法测定血清降钙素含量,扩弓组的血清降钙素含量,A组与C组无显著性差异（p>0.05）,B组降钙素含量低于A组、C组,但无统计学差异（p>0.05）。保持组的血清降钙素含量,C组低于A组,但无统计学差异（p>0.05）,B组降钙素含量较A组、C组低,有统计学差异（p<0.01）。A组的扩弓组和保持组间血清降钙素含量无显著性差异（p>0.05）,B组的扩弓组和保持组间血清降钙素含量有显著性差异（p<0.05）,C组的扩弓组和保持组间血清降钙素含量无显著性差异（p>0.05）。3组织降钙素含量:放免法测定腭骨组织降钙素含量,扩弓组的组织降钙素含量,C组稍低于A组,但无显著性差异（p>0.05）,B组降钙素含量低于A组、C组,有统计学差异（p<0.01）。保持组的组织降钙素含量,C组低于A组,但无统计学差异（p>0.05）,B组降钙素含量较A组、C组低,有统计学差异（p<0.01）。A组的组织降钙素含量,保持组高于扩弓组,但无显著性差异（p>0.05）;B组的组织降钙素含量,扩弓组和保持组无显著性差异（p>0.05）;C组的组织降钙素含量,保持组高于扩弓组,但无显著性差异（p>0.05）。4四环素荧光标记不脱钙骨磨片:不脱钙切片,在荧光显微镜下可见骨小梁表面有金黄色或黄绿色的四环素标记线,于近腭中缝附近,可见两条较为清晰的金黄色荧光带,两条荧光带间的距离即21天骨组织的总矿化量,经统计学分析,A组的矿化沉积速率与C组的矿化沉积速率无显著性差异（p>0.05）,B组的矿化沉积速率低于A组、C组,有统计学差异（p<0.05）。A组,在骨小梁边缘可见大量致密的黄色荧光,B组,骨小梁边缘可见分布不均一较致密的黄色荧光,C组,骨小梁边缘可见大量致密的黄色荧光。5不脱钙骨磨片甲苯胺蓝染色切片:矿化骨痂为浅蓝色至白色,成骨细胞为深蓝色,破骨细胞为淡蓝色,体积较大,多核。A组,骨染色均匀,腭骨组织骨纤维成束状排列,腭中缝区边缘可见大量排列整齐的成骨细胞,偶可见破骨细胞。B组,骨染色不均一,腭骨组织骨线紊乱,纤维不规则排列,破骨细胞较A组和C组多,成骨细胞较少且形态不规则。C组与A组无明显差别,骨线较为规整,大量骨纤维成束状排列,可见大量成骨细胞规则排列于腭中缝表面,可见少量破骨细胞。结论:1.糖尿病大鼠的骨质疏松导致扩弓后的矿化沉积速率降低,成骨缓慢,不利于扩弓效果的保持。2.胰岛素控制下,糖尿病大鼠的骨质疏松有所改善,快速上颌扩弓可以达到较好的效果。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 胰岛素控制下糖尿病大鼠快速上颌扩弓后的骨代谢变化
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 药物对牙齿移动的影响
• 致谢
• 个人简历