水体中溶藻细菌EG46的分离及其溶藻特性研究

论文摘要

本文是为获得水华的应急控制方法而开展的有关溶藻细菌的工作。主要结果如下:1.从发生水华的景观水体中分离到60株细菌,其中编号为EG46的菌株表现出较强的溶藻效果。经16S rDNA序列分析,EG46为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）。毒性检测试验表明EG46不产生毒素。2.试验发现,EG46对选用的土生席藻、水华鱼腥藻、弱细颤藻等蓝藻及小环藻均有很强的溶解作用。该菌通过分泌胞外物质溶藻,且从对数期开始分泌溶藻物质,到稳定期溶藻活性物质量达到最大;菌体浓度为5×107cfu/mL时,7d后对土生席藻去除率达到87.5%。3.光照、pH、盐度及硝酸钠和氯化钙浓度对细菌EG46溶藻效力有较大影响。在光周期（L:D=16 h:8 h）、中性（pH 7）、盐度（4‰NaCl）以及培养基中硝酸钠和氯化钙浓度加倍的环境条件下,EG46具有更强的溶藻效力。4.试验表明EG46对野生藻种具有一定的溶解作用,说明其可能独立应用于小水体来控制藻类水华。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 蓝藻水华的成因
• 1.2 蓝藻水华的危害
• 1.3 水华的主要防治措施
• 1.3.1 物理方法
• 1.3.2 化学方法
• 1.3.3 生物方法
• 1.3.3.1 蓝藻病毒防治水华
• 1.3.3.2 真菌防治水华
• 1.3.3.3 原生动物防治水华
• 1.3.3.4 高等水生生物防治水华
• 1.3.3.5 细菌防治水华
• 1.4 溶藻细菌的研究趋势
• 1.4.1 PCR技术和16Sr RNA序列分析相结合
• 1.4.2 在分子水平上研究细菌的溶藻机制
• 1.4.3 细菌溶藻能力与生态因素的关系
• 1.5 本课题的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 供试藻种
• 2.1.2 培养基
• 2.1.2.1 藻类培养基
• 2.1.2.2 细菌培养基
• 2.1.3 试剂
• 2.1.4 主要仪器设备
• 2.1.5 采样点
• 2.2 方法
• 2.2.1 藻的叶绿素a含量测定
• 2.2.2 溶藻细菌的分离和纯化
• 2.2.3 溶藻细菌的溶藻范围试验
• 46对土生席藻的溶藻特性'>2.2.4 溶藻细菌EG₄₆对土生席藻的溶藻特性
• 2.2.4.1 溶藻方式探讨
• 46的溶藻效果'>2.2.4.2 不同接菌量下EG₄₆的溶藻效果
• 46不同生长期上清液溶藻效果比较'>2.2.4.3 EG₄₆不同生长期上清液溶藻效果比较
• 46溶藻作用的影响'>2.2.4.4 光照条件对EG₄₆溶藻作用的影响
• 46的溶藻效应'>2.2.4.5 不同pH值下EG₄₆的溶藻效应
• 46溶藻作用的影响'>2.2.4.6 硝酸钠和氯化钙对EG₄₆溶藻作用的影响
• 46的溶藻效应'>2.2.4.7 不同盐度下EG₄₆的溶藻效应
• 46的16S rDNA序列分析'>2.2.5 EG₄₆的16S rDNA序列分析
• 2.2.5.1 菌株总DNA的抽提
• 2.2.5.2 PCR引物
• 2.2.5.3 PCR扩增目的基因片段
• 46毒性检测试验'>2.2.6 EG₄₆毒性检测试验
• 46对野生藻种的溶解试验'>2.2.7 EG₄₆对野生藻种的溶解试验
• 3 结果与分析
• 3.1 溶藻细菌的分离
• 3.2 溶藻细菌的溶藻范围
• 46对土生席藻的溶藻特性'>3.3 溶藻细菌EG₄₆对土生席藻的溶藻特性
• 3.3.1 溶藻方式探讨
• 46对土生席藻作用的显微镜观察'>3.3.2 EG₄₆对土生席藻作用的显微镜观察
• 46的溶藻效果'>3.3.3 不同接菌量下EG₄₆的溶藻效果
• 46不同生长期上清液溶藻效果比较'>3.3.4 EG₄₆不同生长期上清液溶藻效果比较
• 46溶藻作用的影响'>3.3.5 光照条件对EG₄₆溶藻作用的影响
• 46的溶藻效应'>3.3.6 不同pH值下EG₄₆的溶藻效应
• 46溶藻作用的影响'>3.3.7 硝酸钠和氯化钙对EG₄₆溶藻作用的影响
• 46的溶藻效应'>3.3.8 不同盐度下EG₄₆的溶藻效应
• 46的16S rDNA序列分析'>3.4 EG₄₆的16S rDNA序列分析
• 46毒性检测结果'>3.5 EG₄₆毒性检测结果
• 46对野生藻种的溶解效果'>3.6 EG₄₆对野生藻种的溶解效果
• 4 小结与讨论
• 4.1 溶藻细菌的分离
• 46溶藻的作用过程'>4.2 EG₄₆溶藻的作用过程
• 46的溶藻效力'>4.3 不同菌浓度下EG₄₆的溶藻效力
• 46溶藻效力的影响'>4.4 环境因子对EG₄₆溶藻效力的影响
• 46应用前景'>4.5 EG₄₆应用前景
• 参考文献
• 致谢