论文摘要
背景膀胱癌是西方国家最为常见的肿瘤之一,而在膀胱癌中最主要的为上皮细胞来源。在美国,尿路上皮癌占到所有膀胱癌的90%。约80%的膀胱上皮癌患者在首次治疗后一到两年便复发。15%-20%的膀胱肿瘤存在肌层侵袭,尽管经历根治性膀胱切除术以及系统治疗,仍有50%患者死于肿瘤转移。很多膀胱癌患者首发临床表现为血尿。四分之三的患者为非肌层侵润型。对于人群有一个及时的筛查,尤其是有高危因素的患者,比如说吸烟或者因职业需求受到辐射者,能够及早的确定血尿情况下的肿瘤,减少肿瘤的侵润转移。如果早期发现,膀胱癌的五年生存率大概为94%,足以见得,及时诊断和治疗可以极大的改善膀胱癌的预后。目前膀胱肿瘤诊断和监控的金标准为膀胱镜检查和尿细胞学检测。膀胱镜检为损伤性检查,价格昂贵,尿细胞学检查虽然基本上是患者可以忍受的,但尿细胞学检查灵敏度不高且重复性差。采用尿液样本进行检测早期诊断膀胱癌具有无创性以及快速性的特点。目前对于恶性肿瘤或者癌前病变的生物学、形态学和临床改变的评估使我们更为准确的确定肿瘤的发生发展的过程,更有利于肿瘤的早期发现和早期治疗。近年来,与尿路上皮癌发生进展相关的分子标志物的研究取得了可观的进展。分子标志物的发现和应用为早期干预肿瘤带来了希望,也使对出现肿瘤临床症状的患者的治疗手段得到更新。目前FDA批准了几个应用于对膀胱癌的监测的分子标志物,而有关膀胱癌的分子标志物的研究仍在如火如荼的进行,期待这些研究能更好的促进膀胱癌分子标志物有效的应用于临床。Med-19为中介体中部的一个组成部分。其可以将转录激活因子和RNA Pol Ⅱ联系在一起。Med-19首次被发现是在核中,研究者推断Med-19可能是一种调节因子。后来的研究证实Med-19作为中介体复合物的一部分对于中介体结合和活化RNA Pol Ⅱ有着重要作用。在Med-19缺失的情况下,中介体对于RNA Pol Ⅱ的亲和力减少。Med-19作为调节基因表达的转录活化因子,提示其可能在肿瘤的发展中具有一定作用。一些研究证实Med-19与膀胱癌、肝细胞肿瘤、前列腺癌、胃癌、乳腺癌细胞和舌癌细胞的增生有关。本研究探寻了膀胱癌组织中Med-19基因mRNA和蛋白的表达,并且将Med-19蛋白的表达量与膀胱癌的直径、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移及初复发等生物学行为之间的相关性进行了研究。方法选取本院2010年1月～2012年6月行开放手术及经尿道切除的膀胱肿瘤标本64例,全部标本均经病理组织学确诊为膀胱尿路上皮癌。男32例、女32例；年龄28-78岁,平均年龄（54.3±2.5）岁。根据2004年WHO病理分级：低分级肿瘤38例、高分级肿瘤26例；临床分期依2002年国际抗癌协会TNM标准：非肌层浸润性肿瘤36例、肌层浸润性肿瘤28例；初发肿瘤38例、复发肿瘤26例；无淋巴结转移者39例、有淋巴结转移者25例。正常对照20例为前列腺手术时取出的正常膀胱黏膜组织。所有标本留取2份,液氮中速冻10min后置于-70℃保存备用。本研究得到本院伦理委员会批准,入选患者对该研究有知情同意权。采用RT-PCR方法研究分析膀胱癌组织、正常膀胱粘膜组织Med-19mRNA/GAPDH mRNA相对表达比。采用Western-blot方法检测膀胱癌组织、正常膀胱粘膜组织Med-19蛋白表达量。采用Spearman相关分析,分析Med-19mRNA和Med-19蛋白在膀胱癌中的表达的相关性、Med-19蛋白的表达量与膀胱癌的直径、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移及初复发等生物学行为之间的相关性。结果Western-blot结果显示在64例肿瘤标本中,52例检测到Med-19蛋白表达,其表达水平为0.628±0.135；在20例正常膀胱黏膜标本中2例检测到Med-19蛋白表达,其表达水平为0.086±0.028。两者比较差异有统计学意义（t=18.55,P=0.000）。RT-PCR结果显示在64例肿瘤标本中,56例检测到Med-19mRNA的表达,其表达水平为0.874±0.083；在20例正常黏膜标本中仅1例检测到Med-19mRNA的表达,其表达水平平均为0.104±0.041,二者比较差异有统计学意义（t=20.14,P=0.000）。在64例膀胱癌标本中,52例（81.3%）存在Med-19蛋白的表达,56例（87.5%）有Med-19mRNA的表达；Med-19mRNA表达阳性的膀胱癌组织中,Med-19蛋白的阳性表达率为85.7%（48/56）,Med-19蛋白表达阳性的膀胱癌组织中,Med-19mRNA的阳性表达率为92.3%（48/52）, Med-19mRNA和Med-19蛋白在膀胱癌中的表达有相关性（r=0.892,χ2=13.43,P<0.001）。膀胱癌不同组别情况下的Med-19蛋白表达水平不同。膀胱癌组织中Med-19蛋白表达水平与患者性别和年龄无关（P>0.05）；高分级组肿瘤、肌层浸润性肿瘤、淋巴结转移组肿瘤、复发组肿瘤及直径>3cm的肿瘤Med-19蛋白表达水平等均明显高于低分级组肿瘤、非肌层浸润性肿瘤、无淋巴结转移组肿瘤、初发组肿瘤及直径<3cm肿瘤,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1.膀胱癌组织相较于正常膀胱粘膜组织,Med-19基因mRNA的表达水平明显上调。膀胱癌组织相较于正常膀胱粘膜组织,Med-19蛋白的表达水平明显上调。且者之间具有相关性。Med-19可能参与了膀胱癌的发生发展。2.Med-19蛋白的表达量与膀胱癌的直径、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移及初复发等生物学行为之间存在相关性。Med-19可能可以作为膀胱癌早期诊断、临床分期的分子生物学指标。