论文摘要
研究背景: 子宫内膜异位症(endometriosisEM,简称内异症)是指在子宫内膜以外的部位出现子宫内膜腺体和基质细胞。主要引起不孕、月经紊乱、痛经等,在育龄妇女中发病率为10%-15%,其发病机制尚不明确,缺少有效的治疗方法。整合素avβ3是细胞膜上的一种糖蛋白,具有使细胞一细胞外基质黏附、血小板聚集、免疫、组织修复、肿瘤侵润、血管生长等功能。肿瘤的血管新生及转移与具有功能活性的整合素avβ3有关。现普遍认为EM患者子宫内膜细胞具有黏附、侵袭和血管新生等类似恶性肿瘤的生物学行为,有效的阻断这一环节有可能成为治疗子宫内膜异位症的新途径。本文主要在细胞及动物水平探讨整合素avβ3单克隆抗体对子宫内膜异位症的治疗作用。 研究目的: 研究整合素avβ3单克隆抗体对EM患者在位内膜细胞黏附作用的影响。探讨整合素avβ3单克隆抗体对EM患者在位内膜组织对鸡胚尿囊膜促血管生成过程的抑制作用。建立SCID小鼠EM动物模型,观察整合素avβ3单克隆抗体对小鼠移植异位病灶生长的抑制作用。 材料和方法: 1、取3例EM患者在位内膜进行原代细胞培养。将浓度为1x104/ml细胞悬液置于用纤维结合蛋白(Fibronectin,FN)包被的96孔培养板,每孔100ul。抗体为整合素avβ3单克隆抗体Lm609和7E3,抗体浓度分别为80ug/ml、40ug/ml、20ug/ml,10ug/ml,空白对照加同体积PBS。每个浓度重复3个孔。37℃孵育1小时后。每孔加15ulMTT,继续孵育4小时。弃去液体,每孔加100ulDMSO,震荡20分钟。在492nm波长测每个孔的OD值。每例细胞重复3次实验。 2、1例EM患者在位内膜,剪成1mm3小块。选取60枚9日龄鸡胚,鸡胚分为3组,一组为空白对照,另两组将标本置于尿囊膜上。一组加PBS,一组加Lm609。2天后取出尿囊膜,观察血管生长情况。
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