论文摘要
目的:研究凝血酶敏感蛋白-1（TSP1）作用于体外培养的人晶体上皮细胞和猴晶状体,通过观察人晶体上皮细胞和猴晶状体组织形态学的变化,检测TSP1是否可诱导前囊膜下白内障（ASC）的形成;研究方法:用大肠杆菌原核表达载体pGEX4T-1与TSP-1表达融合蛋白,通过亲和层析分离纯化后,将目的蛋白TSP-1作用于体外培养的猴晶状体;另外,通过腺病毒（Advenovirus）载体包装TSP-1作用于体外培养的人晶体上皮细胞,同时可购买TSP1蛋白直接作用于体外培养的猴晶状体,观察猴晶状体组织形态学变化。结果:用大肠杆菌原核表达pGEX4T-1-TSP1融合蛋白,通过亲和层析分离纯化,Western blot显示未得到预期154kD大小的条带,说明TSP1不适合于原核表达;腺病毒和腺病毒包装的TSP1作用于体外培养的人晶体上皮细胞,可使细胞形态发生纤维化及细胞间空隙增大,但腺病毒TSP1的致纤维化程度大些;与对照猴晶状体比较,TSP1作用的猴晶状体发生前囊膜下混浊。结论:推测TSP1有致人晶体上皮细胞纤维化的趋势,TSP1可诱导前囊膜下白内障的形成。
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