银杏叶提取物不同给药方式对大鼠局灶性脑缺血保护作用的研究

论文摘要

研究背景及目的: 脑血管疾病是严重威胁人类健康的三大致死病因之一,其中缺血性脑病占绝大多数,其发生发展与多种机制相关。银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,GBE）含有黄酮类和萜内酯类等成分,能通过多种机制改善脑组织血液循环,减轻脑缺血、缺氧损伤及脑水肿,在临床常用于治疗缺血性脑病。GBE给药时间与方式的不同对疗效有较大影响,本实验拟观察比较GBE急性和预处理两种给药方式所产生的神经保护效应,期望为急性脑缺血的临床预防和治疗提供一种更有效的方式。 实验材料与方法: 以健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠为研究对象。所有药物均经腹腔注射。将108只大鼠随机分成5组:（1）假手术组（n=12）;（2）局灶性脑缺血模型（MCAO）组（n=24）:线栓法制备大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血模型;（3）MK-801组（n=24）:制备脑缺血模型后立即腹腔注射MK-801 （1mg/kg）;（4）GBE急性给药组（n=24）:制备脑缺血模型后立即腹腔注射GBE （100mg/kg）;（5）GBE预处理组（n=24）: GBE腹腔注射进行预处理（100mg/kg/day）,连续七天后制备脑缺血模型。各组根据处死时间不同,再分为4个亚组:缺血0.5h及缺血再灌3h、1d和7d,假手术组每个亚组3只大鼠,后四组每个亚组6只大鼠。观察各组 大 鼠 行 为 学 变 化 并 对 其 进 行 评 分 , 红 四 氮 唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色测定脑梗死体积,并对大鼠脑组织尾壳核皮层及海马进行苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin, HE）染色观察组织学变化,神经元核蛋白（neuronal nuclear, NeuN）抗体、微管相关蛋白-2（microtubule-associated protein-2, MAP-2）抗体免疫组织化学染色（IHC）检测神经元变化。 结果: 1.行为学:Longa评分3小时GBE预处理组与MCAO模型组和GBE急性给药组均存在显著性差异（P<0.05）,后二组无显著差异。MK-801组大鼠出现四肢抖动,苏醒延迟,较其他各组约晚5-6小时。1 d后各组动物行为学评分无显著差异。 2.脑梗死体积测定:TTC染色缺血0.5h及缺血再灌3h各组大鼠脑组织未见明显梗死灶;缺血再灌1d及7d, MCAO模型组大鼠脑梗死体积最大,GBE预处理组和MK-801组大鼠脑梗死体积均较MCAO模型组显著减小（P<0.001）,GBE急性给药组大鼠脑梗死体积与MCAO模型组无显著差异。 3.病理形态学 （1） HE染色:缺血0.5h及缺血再灌3h各组大鼠脑组织缺血核心区未见明显细胞脱失,3h各组均有脑水肿出现。缺血再灌1d,MCAO模型组缺血核心区细胞大量脱失,GBE预处理组和MK-801组细胞脱失不明显,有部分锥体状或圆型细胞保留,GBE急性给药组与MCAO模型组改变相似。其改变在缺血再灌7d最为显著。 （2） NeuN IHC染色:缺血再灌3h,各手术组大鼠脑组织海马CA1及CA3区可见阳性细胞脱失。与MCAO模型组相比,GBE急性给药组无统计学差异,GBE预处理组和MK-801组脱失较轻,有明显保护作用（P<0.05）,后两组间无统计学差异。尾壳核皮层亦有神经元脱失,结果相似。缺血再灌1d及7d,MCAO模型组仅存留少量点状或圆形细胞,GBE急性给药组与MCAO模型组改变相似,GBE预处理组神经元脱失

论文目录

• 一、论文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料
• （五） 实验方法
• （六） 实验结果
• （七） 讨论
• （八） 结论
• （九） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 正文
• （二） 参考文献
• 三、致谢