不同年龄段人参总提取物对K562细胞的作用

论文摘要

人参（Panax ginseng C. A. Meyer）是著名的中药,其化学成分比较复杂,主要包括人参皂苷、多糖、氨基酸和多肽等。已有研究发现人参皂苷具有抗肿瘤、保护心脑血管系统和神经系统等药理作用；人参多糖具有免疫调节、降血糖及抗氧化等生物活性。人参的类型不同,所含的有效成分也不同。人参的生长年龄被认为是影响人参品质最重要的因素之一,但到目前为止,不同年龄人参的药理学比较研究尚不多见。K562细胞系是由一位白血病患者的慢性粒细胞性白血病细胞所建立的悬浮细胞系,目前广泛应用于体外的红细胞生成与凋亡相关实验。已有研究表明,人参总皂苷和人参多糖能有效地抑制K562细胞的增殖,并能诱导K562细胞凋亡。但是目前关于人参总提取物对K562细胞作用的研究尚无报道。本实验采用不同年龄段人参的总提取物作用于K562细胞,通过CCK-8、细胞周期检测和光镜观察实验研究不同年龄段人参总提取物对K562细胞的作用,结果发现：（1）不同年龄段人参提取物水溶液对K562细胞都有非常明显的增殖作用,48小时时所有药物组细胞数目都显著高于Control组,但不同人参提取物的作用方式存在明显的不同：JR1（5年）组和HR5（8年）组的增殖曲线极为相似,28小时内增殖迅速,28小时后增殖曲线趋于平稳,但是HR5组细胞数目48小时内一直略高于JR1组；HR6（12年）组、HR11（14年）组和HR8（16年）组在12小时时细胞数目都急剧下降,其中前两组甚至显著低于对照组,且这三组的增殖曲线都发生周期性波动,波动周期约为4小时,但波动幅度和持续时间不同；HR6组只在24小时内波动,28小时内细胞数目与对照组相比无显著差异,HR11组仅在16小时内有波动,HR8组增殖曲线的波动最为明显,在32小时内呈周期性波动,波动幅度较大,32小时之后其增殖曲线才趋于平稳,其中4小时时,其细胞数目显著高于对照组和其它药物组。（2）不同年龄段人参提取物对K562细胞周期的影响较小,但各年龄段人参影响作用不同。对照组细胞周期48小时内无明显变化,其G1期比例缓慢上升而S期比例缓慢下降；JR1组和HR11组与对照组相比,细胞周期无明显变化；HR5组细胞周期与对照组相比有明显差别,前16小时S期比例极高,24小时后G1比例急剧上升而S期比例大幅下降；HR6组和HR8组细胞周期与对照组相比24小时时变化显著,G1期比例显著上升而S期比例显著下降。（3）12小时时,对照组、HR6组、HR8组和HR11组的细胞并没有形态学上的明显改变,但是其细胞凋亡比例与对照组相比明显升高,证明其增殖曲线12小时的急剧下降是由细胞凋亡引起而非细胞分化。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 人参的形态特征与地理分布
• 1.2 人参的化学成分与药理学研究
• 1.2.1 人参的化学成分
• 1.2.2 人参化学成分的药理学研究
• 1.3 人参的分类
• 1.4 慢性粒细胞白血病细胞系的体外研究进展
• 第二章 实验材料与实验方法
• 2.1 实验材料与主要实验试剂及实验仪器
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 主要实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 人参次生代谢产物的提取
• 2.2.2 K562细胞复苏、培养和冻存
• 2.2.3 Cell Counting Kit-8检测细胞增殖状况
• 2.2.4 PI单染法检测细胞周期
• 2.2.5 细胞形态学观察
• 第三章 实验结果
• 3.1 人参次生代谢产物的含量
• 3.2 Cell Counting Kit-8检测细胞增殖状况
• 3.3 48小时细胞增殖曲线回归分析
• 3.4 PI单染法检测细胞周期
• 3.4.1 同一实验组在48小时内细胞周期的变化
• 3.4.2 同一时间点不同实验组细胞周期的变化
• 3.5 细胞形态学观察
• 第四章 讨论与展望
• 4.1 不同年龄段人参提取物对K562细胞增殖的影响
• 4.2 不同年龄段人参提取物对K562细胞周期的影响
• 参考文献
• 致谢