论文摘要
目的:探讨汽车尾气暴露对孕鼠胎盘结构和功能的毒性作用;汽车尾气暴露对仔鼠生长发育的影响及遗传毒性。为汽车尾气的生殖毒性提供动物实验依据,提高人们对汽车尾气毒性的重视,增强全社会的环境保护意识。方法:选取日龄为120天的wistar大鼠,雄性和雌性动物按2:1的比例合笼交配。每日晨检查雌鼠阴道脱栓情况,检查到阴栓的当天计为雌鼠妊娠的第0天。将wistar孕鼠70只按体重随机分为7组, 3个汽油汽车尾气组和3个柴油汽车尾气组,并设正常对照组。实验组汽车尾气均用新鲜空气混配成浓度分别为1:30、1:20、1:10的混合气体,于妊娠第3~19天连续染毒,每日一次,每次2小时。正常对照组给予吸入新鲜空气。末次染毒24小时后,将孕鼠麻醉妥后,剖腹取胎,立即称重、计数活胎数、死胎数、吸收胎数及胎盘早剥数;取胎盘固定, HE染色,显微镜下观察胎盘组织病理学改变;免疫组织化学法测定胎盘碱性磷酸酶的水平;用断头法处死仔鼠,放外周血,取出肝脏做微核试验,观察嗜多染红细胞微核率的改变。结果:(1)对照组及低浓度组孕鼠未发现异常;中浓度组孕鼠进食进水量无明显改变,部分孕鼠有阴道出血症状,孕鼠毛色无光泽,躁动不安;高浓度组孕鼠进食量明显减少,毛色晦暗无光,嗜睡,活动减少,对外界反应不敏感,阴道出血症状更明显。(2)对照组窝重(69.96±6.71)g,汽油尾气低、中、高浓度组窝重分别为(66.03±8.69)g、(58.68±11.52)g、(50.34±9.45)g,中浓度组较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),高浓度组与其他三组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);柴油尾气低、中、高浓度组窝重分别为(65.39±7.46)g、(55.87±10.03)g、(51.08±8.34)g,中浓度组窝重低于对照组,高浓度组窝重明显低于对照组和低浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。高浓度组孕鼠出现胎盘早剥均较其他三组增多,但各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。高浓度组的不良妊娠结局(吸收胎、死胎)均较其他三组增多、活胎数较其他三组减少。(3)对照组、低浓度组和中浓度组三组间仔鼠体重、身长比较,差异无统计学意义(P>0.05)。汽油高浓度组仔鼠的体重(3.96±0.45)g、身长(3.76±0.43)cm均显著降低,与其他三组比较差异有统计学意义(P<0.05)。柴油高浓度组仔鼠体重明显低于其他三组,身长明显低于对照组和低浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)汽油高浓度组胎盘直径(1.43±0.08)cm明显高于其他三组,差异有统计学意义(P<0.05),各组间胎盘重量比较差异无统计学意义,但高浓度组孕鼠胎盘重量高于其他三组。各组间胎盘系数比较差异无统计学意义。柴油中、高浓度组胎盘重量明显高于对照组和低浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);各组间胎盘直径比较差异无统计学意义;柴油高浓度组胎盘系数明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)胎盘组织形态学改变汽油组和柴油组大体相同。胎盘大体观察:对照组胎盘呈暗红色,胎儿面由透明羊膜覆盖,表面光滑;实验组的胎盘外观呈紫红色、无光泽。胎盘光镜观察,对照组绒毛无肿胀,滋养层细胞无明显增生,细胞排列整齐。低浓度组胎盘结构未见明显改变。中浓度组海绵带滋养叶细胞增大,正常细胞减少,空泡化细胞增多,迷路带血窦扩张淤血。高浓度组胎盘海绵带滋养叶巨细胞及空泡化细胞岛增多,迷路带滋养叶细胞呈退行性改变,绒毛肿胀增粗、间隙变窄,绒毛周围纤维蛋白沉积增多。组织结构紊乱,细胞核核形不规则,染色变深,核仁消失。(6)低浓度组孕鼠胎盘碱性磷酸酶水平较对照组无明显改变(P>0.05) ;高浓度组孕鼠胎盘碱性磷酸酶水平较对照组明显下降(P<0.05)。(7)低浓度组与对照组比较,微核细胞率无明显改变(P>0.05),中、高浓度组与对照组比较,微核细胞率明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:(1)汽车尾气具有胚胎毒性,使活胎数减少,死胎数、吸收胎数增加,使胎盘早剥率增加。(2)汽车尾气对胎盘有直接毒性作用,可以引起胎盘结构和功能的改变,使胎盘碱性磷酸酶的水平降低,妨碍母体和胎儿之间营养物质和氧气的交换,导致子代生长发育不良。(3)汽车尾气具有遗传毒性,可通过胎盘屏障,干扰细胞分裂,诱发染色体畸变、断裂及引起DNA的损伤。