陕西5个新品系绞股蓝［Gynostemma pentaphyllum （Thunb.）Makino］总皂甙含量的动态分析

论文摘要

绞股蓝（Gynostemma pentaphyllum（Thunb.）Makino）为葫芦科绞股蓝属的多年生草质藤本植物。又名五叶参、七叶胆、遍地生根,是我国传统的中草药之一。绞股蓝以全草入药,具有清热解毒,止咳祛痰、增强体质、活化细胞、镇静止痛、降压降脂、提高免疫力等功效。目前已广泛应用于医药、食品、饮料和化妆品等工业,具有广阔的市场应用前景。我国是绞股蓝植物分布和分化中心,其资源丰富。但近几十年来,随着人们对其野生资源的不断的掠夺式的开发,使其目前的资源现状令人担忧。目前,尽管绞股蓝的规范化栽培基地（GAP）已经建立,并且制定了绞股蓝规范化生产标准操作规程（SOP）,有几个新品种也已经问世,但这些品种存在区域适应性的问题,使其仍然不能满足生产的需要。本研究主要以课题组经过多年潜心研究所选育的5个栽培新品系,即301、40201、403、404和405,为主要研究对象,以当地栽培最广泛的七叶胆为对照,系统的研究了各品系从5月份至11月份不同采收期及各采收期地下根茎、茎、叶三个不同部位的绞股蓝总皂甙的含量变化,旨在确定各品系的最佳采收期,并为绞股蓝新品种的审定及生产实践提供理论依据。同时,还对其总黄酮含量以及抗氧化活性做了较深入研究。总结结论如下:1、绞股蓝总皂甙提取方法试验表明:75%的乙醇回流提取法是提取绞股蓝总皂甙的高效、简便、节能的提取方法。2、不同采收期的各品系及对照种中绞股蓝总皂甙的含量变化实验表明,不同的品系,不同的采收期,不同的部位其绞股蓝总皂甙的含量均有所差别。总体上说,地下根茎和叶的总皂甙含量要高于茎中的总皂甙含量。但由于绞股蓝的地下根茎是其进行无性繁殖的主要器官,且地下根茎的生物量小,过度开采不利于绞股蓝资源的再生等原因,所以一般建议采收绞股蓝时不以地下根茎作为主要原材料。而绞股蓝茎中总皂甙含量低且常年变化小,故一般以绞股蓝叶中的总皂甙含量作为重要指标来确定其最佳采收期,得如下结论:（1）5、6月份各品系叶中总皂甙的含量均在相应时期达到了9.00%以上,所以在这两个月可以适量采摘其幼嫩茎叶和龙须来生产绞股蓝茶等产品。（2）品系301在8月份至10月份叶中总皂甙的含量均在8.80%以上,其中8月份最高总皂甙含量达到12.23%,所以可以在这几个月对其进行适当采收,以制备绞股蓝茶等产品。（3）品系40201叶的总皂甙含量从7月至11月均达到10.00%以上,所以品系40201在这几个月均可进行采收。其高皂甙含量的持续时间很长,而且高皂甙含量持续时间正好与生物产量形成高峰期吻合,是生产绞股蓝茶的优良品系。（4）品系403叶中总皂甙含量在8月份达到其最高大值9.88%,其全年总皂甙含量平均值为8.35%,与对照相比较没有明显优势,从此角度,建议淘汰此品系。（5）品系404在8月份其叶中总皂甙含量达到最大值12.95%,而其后几个月的总皂甙含量也均在9.24%以上,所以这几个月均适宜采收。且品系404与品系301相比较更有优势,所以品系404可以作为生产绞股蓝茶的优良品系进行推广。（6）品系405叶中全年总皂甙含量平均值达到了9.79%,特别是11月份,其总皂甙含量达到其最大值,为14.56%,而此时的生物量积累也最大,其最佳采收期。所以品系405可以作为提取绞股蓝总皂甙的最佳品系进行推广栽培。（7）对照七叶胆叶中全年总皂甙平均含量为8.45%,且全年变化不大。根据以上结论,从绞股蓝最主要的有效成分总皂甙的方面考虑,建议对品系40201和404进行品种审定,以作为制作绞股蓝茶的重要品种推广种植,而品系405可以作为提供绞股蓝总皂甙的药源植物进行品种审定。3、黄酮含量测定结果为:品系301、40201、403、404、405和对照种甲醇提取物中总黄酮的含量分别为4.77%、3.20%、4.51%、4.24%、5.94%、5.03%;乙醇提取物中总黄酮的含量分别为7.89%、5.74%、4.77%、6.52%、9.78%、8.09%。各品系及对照绞股蓝乙醇提取物中的总黄酮含量均高于甲醇提取物中的总黄酮含量。其中品系405的甲醇和乙醇提取物中的总黄酮的含量均相应最高。4、利用DPPH法对各系种及对照种提取液的抗氧化测定结果表明:各品系及对照的甲醇提取物和乙醇提取物都有显著的清除自由基的能力,且提取液的浓度与其对自由基的清除能力呈正相关,是一种值得进一步开发利用的天然抗氧化剂。用IC50来表征抗氧化能力,品种301、40201、403、404、405及对照七叶胆甲醇提取液的IC50分别为:0.0261、0.0112、0.0756、0.0908、0.0521、0.0557mg/mL。品种301、40201、403、404、405及对照种乙醇提取液的Ic50分别为:0.0732、0.1104、0.0793、0.0793、0.0436、0.0910mg/mL。各品系及对照种的甲醇和乙醇提取物中的黄酮提取率和其抗氧化活性并没有明显的相关性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 文献综述
• 1.1 绞股蓝的本草考证
• 1.2 绞股蓝的形态特征
• 1.2.1 根
• 1.2.2 地下茎
• 1.2.3 茎
• 1.2.4 叶
• 1.2.5 花
• 1.2.6 果实与种子
• 1.3 绞股蓝的生育期
• 1.3.1 出苗期
• 1.3.2 放蔓、开始分枝期
• 1.3.3 旺盛生长期
• 1.3.4 开花结果期
• 1.3.5 缓慢生长期
• 1.3.6 受冻枯萎期
• 1.4 绞股蓝的种质资源、分类与育种
• 1.4.1 绞股蓝的种质资源
• 1.4.2 绞股蓝属植物的分类
• 1.4.3 绞股蓝的育种.
• 1.4.4 绞股蓝与易混淆植物的鉴别
• 1.5 绞股蓝化学成分的研究
• 1.5.1 绞股蓝皂甙
• 1.5.2 黄酮
• 1.5.3 氨基酸
• 1.5.4 多糖
• 1.5.5 磷脂
• 1.5.6 无机元素
• 1.5.7 维生素
• 1.6 绞股蓝的毒理、药理研究及应用
• 1.6.1 绞股蓝的毒理研究
• 1.6.2 绞股蓝的药理研究
• 1.7 绞股蓝的生态适应性
• 1.7.1 温度
• 1.7.2 光照
• 1.7.3 水分
• 1.7.4 土壤
• 1.7.5 微量元素
• 1.7.6 其它
• 1.8 绞股蓝栽培技术研究
• 1.8.1 选地、整地与施基肥
• 1.8.2 繁殖
• 1.8.3 定植
• 1.8.4 田间管理
• 1.8.5 收获
• 1.8.6 病虫害防治
• 1.8.7 试验区基本地理气候概况
• 1.8.8 试验区土壤基础肥力和理化性质
• 1.9 本文的研究目的及意义
• 第2章 绞股蓝总皂甙提取方法的比较研究
• 2.1 试验材料、仪器与试剂
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 试验仪器
• 2.1.3 药品与试剂
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 材料处理
• 2.2.2 提取试剂的选择
• 2.2.3 提取方法的选择
• 2.2.4 标准曲线的制备
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 提取试剂选择结果
• 2.3.2 提取方法的选择结果
• 2.3.3 精密度试验
• 2.3.4 稳定性试验
• 2.3.5 重复性试验
• 2.3.6 加样回收率试验
• 2.4 小结
• 第3章 绞股蓝总皂甙含量的动态研究
• 3.1 材料、仪器与试剂
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 总皂甙的提取
• 3.2.2 标准曲线的制备
• 3.2.3 含量测定
• 3.3 试验结果
• 3.3.1 各品系绞股蓝及对照种地下根茎中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.2 各品系绞股蓝及对照种茎中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.3 各品系绞股蓝及对照种叶中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.4 品系301地下根茎、茎和叶中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.5 品系40201地下根茎、茎和叶中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.6 品系403地下根茎、茎和叶中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.7 品系404地下根茎、茎和叶中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.8 品系405地下根茎、茎和叶中总皂甙含量的动态变化
• 3.3.9 对照地下根茎、茎和叶中总皂甙含量的动态变化
• 3.4 小结
• 第4章 绞股蓝提取物总黄酮的含量测定
• 4.1 材料、试剂与仪器
• 4.1.1 试验材料
• 4.1.2 试剂与仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 甲醇提取物的制备
• 4.2.2 乙醇提取物的制备
• 4.2.3 标准曲线的制备
• 4.2.4 黄酮含量的测定
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 甲醇提取物中总黄酮的含量
• 4.3.2 乙醇提取物中总黄酮的含量
• 4.4 小结
• 第5章 绞股蓝提取物抗氧化性研究
• 5.1 材料、试剂与仪器
• 5.2 各提取物对DPPH自由基清除能力
• 5.3 试验结果
• 5.3.1 品系301提取液清除DPPH自由基的效果
• 5.3.2 品系40201提取液清除DPPH自由基的效果
• 5.3.3 品系403提取液清除DPPH自由基的效果
• 5.3.4 品系404提取液清除DPPH自由基的效果
• 5.3.5 品系405提取液清除DPPH自由基的效果
• 5.3.6 对照七叶胆提取液清除DPPH自由基的效果
• 5.3.7 各品系及对照种甲醇提取物抗氧化测定结果
• 5.3.8 各品系及对照种乙醇提取物抗氧化测定结果
• 5.3.9 各品系及对照种黄酮提取率与抗氧化活性的比较
• 5.4 小结
• 第6章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间的研究成果