论文摘要
目的:硬皮病是一种以皮肤及内脏多系统间质纤维化为特征的结缔组织疾病。微血管病变是硬皮病大部分临床表现及并发症的病理基础。鉴于微血管病变在硬皮病发病机理中的作用,设计针对改善微循环的治疗方法,应是逆转组织纤维化等病理改变的理想措施。血管内皮生长因子(VEGF)是一种特异地作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,能直接或间接影响血管生成的全过程,所以我们设想将VEGF基因导入硬皮病模型皮肤组织中,以期望诱导血管新生,改善皮肤微循环,达到治疗硬皮病的目的。方法:局部皮下注射博莱霉素建立小鼠硬皮病动物模型;应用电穿孔技术将PhVEGF165真核表达质粒导入硬化的小鼠皮肤组织;用原位杂交、免疫组化等方法观察VEGF在小鼠皮肤内的表达、新生血管形成、真皮胶原合成情况及皮肤组织病理变化等。结果:①电穿孔技术可成功的将外源VEGF165基因硬皮病导入硬皮病鼠皮肤组织,并能在真皮及毛囊组织内高效表达。小鼠真皮层及皮下血管较正常鼠及硬皮病鼠明显增多,真皮厚度明显增加,皮肤萎缩得以改善。②免疫组化、原位杂交等方法检测VEGF165在转基因鼠的表达较之对照组和未转基因硬皮病鼠明显增多,VEGF能促进硬皮病鼠皮肤毛囊再生及毛发生长。③随着VEGF165mRNA表达增加,Ⅰ型前胶原mRNA表达上调,但免疫组化检测Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白表达尚无明显改变。结论:外源性PhVEGF165基因导入可通过刺激硬皮病小鼠真皮组织增生、改善真皮萎缩,但并不能减轻组织的纤维化,反而促进真皮内胶原的合成。