椎旁注射阿霉素对大鼠感觉和运动功能影响的实验研究

论文摘要

阿霉素（adriamycin，ADM）原是一种抗癌药，广泛应用于恶性肿瘤的治疗。但由于它明显的细胞毒性和神经毒性，可以引起周围神经变性，所以在动物实验中也将它作为经典的神经毒物，临床上应用它来损毁背根神经节（dorsal root ganglion，DRG）细胞作疼痛治疗，也就是选择性痛觉神经节化学切除术以治疗难治性疼痛脊髓DRG是感觉及伤害信息传入的重要门户，是痛觉传入的第一级神经元，伤害性刺激在此处进行换能，转变成电信号，经脊髓、脑干和丘脑的传递和调制，最后在大脑皮层产生痛觉。DRG拥有多种感觉细胞，根据细胞大小不同而功能各异，小细胞（直径18～30μm）感受伤害性神经冲动，大细胞（直径＞45μm）接受本体感觉和触压觉。国内临床上已经开展了0.33％阿霉素做胸椎及颈椎旁神经阻滞来治疗难治性带状疱疹后遗痛（PHN）和癌性疼痛，临床上已经取得了较为满意的治疗效果，但是还需要进一步研究它对运动神经损害情况。目的：在大鼠椎旁注射0.33％、0.5％、1％的阿霉素后，观察药物对同侧背根神经节细胞及坐骨神经的电生理和病理方面的影响，以及药物对大鼠的肌力和运动状态方面的影响，探讨阿霉素能否选择性切断痛觉传导通路而不出现大鼠的运动障碍。方法：健康雄性Wister大鼠80只，体重250～300g，随机分为4组：0.33％阿霉素组（N1=20）；0.5％阿霉素组（N2=20）；1％阿霉素组（N3=20）；生理盐水对照组（N4=20）。大鼠腹腔注射3％戊巴比妥钠（40mg／kg）麻醉，无菌条件下暴露大鼠右侧L4、L5椎间孔外缘，然后在组1、组2、组3分别注射0.33％、0.5％、1％阿霉素溶液10μl。在给药后的1、2、4、8周每组随机选取5只大鼠，分别用BL-420E生物机能实验系统和TF-2光热测痛仪测量大鼠注药侧的脊髓运动诱发电位、脑皮层感觉诱发电位、坐骨神经运动和感觉传导速度以及大鼠对应侧的足底热痛和电击痛潜伏期，并对大鼠的行为状态和肌力按照改良的Tarlove’s分级法进行评定。在测量完毕后，分别在2、4周随机取大鼠右侧的L4、L5背根神经节及坐骨神经做成标本制成石蜡切片，进行HE染色，在光学显微镜下观察阿霉素椎旁注射后，相对应的背根神经节及坐骨神经的组织学变化。N4组同样在大鼠的右侧L4、L5椎间孔注射生理盐水10μl作为对照组。结果1．大鼠行为状态和肌力的改变所有的动物在测量前均无运动障碍和痛敏表现，术后伤口愈合良好，无感染征象。1％浓度组1～8周，大鼠出现右后肢不同程度的运动功能障碍，根据改良的Tarlove’s分级法进行后肢肌力评分均明显低于对照组。0.5％浓度组有11％（2／19）的大鼠出现明显的后肢运动障碍，0.33％浓度组在8w时有5％（1／20）的大鼠出现后肢运动障碍，且这两个浓度组在1～8w各个时间点评分与对照组无统计学意义。2．热痛和电击痛阈的测定结果1％浓度组在1～8周可观察到大鼠热痛以及电击痛阈值明显增高与对照组有显著性差异（P＜0.05）。1周时，0.5％、0.33％两个浓度组的大鼠出现注药侧的热痛和电击痛阈不同程度的降低，2～8周时阈值则明显升高，与对照组有明显差异（P＜0.05）。3．坐骨神经运动和感觉传导速度的改变1％浓度组大鼠的坐骨神经的运动和感觉传导速度在1～8周明显降低，组间比较有明显差异（P＜0.05）。0.5％和0.33％浓度组的运动和感觉传导速度，跟对照组无明显差异（P＞0.05）。4．脊髓运动诱发电位的改变1％浓度组在1～8周，大鼠的MEP潜伏期明显延长，波幅降低，组间比较有显著性差异（P＜0.05）。而0.5％、0.33％浓度组在1～8周，与生理盐水对照组的MEP潜伏期和波幅无明显组间差别（P＞0.05）。5．大鼠皮层感觉诱发电位的改变1％浓度组的大鼠1～8周时，SEP出现潜伏期明显延长，波幅降低，组间比较有显著性差异（P＜0.05）。0.5％、0.33％浓度组1周时SEP波幅有明显增加，组间比较有差异（P＜0.05），而潜伏期则无明显改变与对照组组间无差异（P＞0.05），2～8周SEP的波幅和潜伏期组间比较都无差别（P＞0.05）。6．组织病理变化1％浓度组的大鼠DRG第2、4周均可见神经节细胞坏死，4周时坏死更加明显，且有明显胶质细胞及结缔组织明显增生取代坏死的DRG细胞。生理盐水对照组无明显病理变化。0.5％浓度组的大鼠DRG在第2、4周可见大量神经细胞变性改变，且在4周时有明显的坏死改变。0.33％浓度组2周时，可见背根神经节细胞肿胀、尼氏小体减少或消失；4周时，可见神经细胞核固缩胞浆均质化和细胞坏死。1％浓度组2、4周可见到坐骨神经髓鞘大部分崩解，遗留坏死轮廓，轴突肿胀或者消失，神经内膜、神经束膜和神经外膜不连续或者消失。0.33％、0.5％浓度组的大鼠2、4周跟生理盐水对照组无明显病理变化：神经纤维大中基本一致，轴突位于中央，较小，呈星状。结论：大鼠椎旁注射1％ADM组不但可明显损毁大鼠痛觉，而且能够损伤脊髓运动运动神经元，由于这个浓度可以导致大鼠后肢的自主运动丧失或减少，坐骨神经的传导速度减慢，诱发电位的明显抑制以及背根神经节的变性、坏死和坐骨神经纤维的变性。而0.5％和0.33％浓度组除了痛阈明显降低和DRG明显坏死的变化跟对照组有差别外，其余电生理指标均显示：这两个浓度对脊髓运动神经元不产生明显的损害。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 本研究创新点
• 综述一
• 综述二
• 参考文献
• 英文缩略语表
• 致谢