论文摘要
东方百合是百合科百合属多年生球根类花卉,花大美丽,色彩丰富,香味浓郁,具有较高的观赏价值和经济价值,是世界四大切花之一。近年来,病毒病的发生导致东方百合品质严重下降,制约了东方百合生产的发展。当前东方百合脱毒技术普遍存在操作困难、脱毒率低等情况,因此建立简便易行、脱毒率高的脱毒体系是减少病毒对东方百合的危害、恢复种性的关键问题之一。本文系统研究了东方百合组织培养技术,同时对东方百合较高温度茎尖培养及脱毒技术研究,主要研究结果如下:①东方百合组织培养技术优化研究:研究结果表明a.以70%酒精浸泡30S,再用0.1%的升汞消毒10min为东方百合茎段和鳞片消毒的最佳方法;b.鳞茎下部为诱导分化小鳞茎效果最好的部位,诱导率和诱导小鳞茎数分别为100%和10.5;c.添加活性炭对东方百合小鳞茎的诱导有积极的作用;d.在东方百合小鳞茎诱导时生长素用NAA比用IBA好;e.MS培养基为东方百合小鳞茎诱导较适宜的培养基;f.MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.30.5mg/L+活性炭3g/L为东方百合小鳞茎诱导的最佳培养基;g.IBA对东方百合小鳞茎复壮的效果要优于NAA;h.0～0.5cm等级的小鳞茎最佳的复壮激素浓度和配比为6-BA0.1mg/L+IBA0.1mg/L,0.5～1.0cm、1.0～1.5cm、＞1.5cm三个等级的小鳞茎复壮最佳的激素浓度和配比为6-BA0.3mg/L+IBA0.3mg/L;i.在东方百合增值培养中激素以6-BA0.7mg/L+NAA0.3mg/L效果最佳;j.MS+IBA0.3mg/L+活性炭3g/L为东方百合生根培养较适宜的培养基。②东方百合较高温度茎尖培养技术研究:研究结果表明,32℃为东方百合茎尖能正常生长的最高温度;高盐浓度的MS培养基较适合东方百合茎尖的培养;IBA是较适合于32℃下百合茎尖培养的生长素;MS+6-BA0.1mg/L+IBA0.1mg/L+活性炭3g/L是百合茎尖培养较理想的培养基;暗培养对百合茎尖培养没有明显影响。③脱毒技术研究:研究结果表明,三种方法都能脱出部分试验植株中的黄瓜花叶病毒和百合无症病毒,其中化学药剂+茎尖培养脱出效果最差,两种病毒都脱出的比率仅为26.7%;热处理+茎尖培养中两种病毒都脱出的比率为41.7%;茎尖较高温度长期培养结合多次继代脱毒效果最好,脱毒率可达100%。一方面脱毒率较高,可达100%,另一方面,茎尖取材较大,操作较容易。在较高温度下茎尖培养结合多次继代脱毒研究中还发现,经过五次脱毒处理（1次茎尖培养+4次继代脱毒处理）后两种病毒的脱毒率都能够达到100%。本试验研究的茎尖较高温度培养结合多次脱毒处理的东方百合脱毒方案具有以下两大优点:1.茎尖取材的体积大大提高,超过了1mm,脱毒操作完全可以在肉眼下进行,同时茎尖成活率也有较大提高;2.脱毒率大大提高,经过五次脱毒处理的苗子脱毒率可达100%。在操作熟练的情况下,经过五次脱毒处理的苗子可以不经检测而直接进入生产,节省了昂贵的检测试剂,可以大大降低无毒苗生产的成本,所以,认为该方案对东方百合脱毒苗的研究和生产有重大的意义。