论文题目: 真菌产生的低分子活性物质研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 微生物学
作者: 杨炜华
导师: 高培基
关键词: 低分子活性物质,纤维素降解,抑菌,分离纯化,结构解析
文献来源: 山东大学
发表年度: 2005
论文摘要: 通过生理生化及生物信息学研究得到如下具有一定创新性的结果: ⅰ.真菌产生低分子多肽为一普适特性,此类多肽在天然纤维素降解中起重要作用。 ⅱ.由青霉菌Penicillium sp. MO3中筛选到两种具有抗菌活性的低分子物质,有望开发为抗耐药菌的新型抗生素。 1.真菌产生低分子多肽为一普适特性,它在天然纤维素降解中与纤维素酶有协同作用。 本实验室前期工作表明真菌产生的低分子多肽形成的羟基自由基（HO·）对纤维素具有氧化降解的作用,有多篇报道,为对纤维素生物降解机理的新发展。但已有的结论均是以纯纤维素材料为底物进行研究得到的,此类多肽在真菌中是否普遍存在以及在天然纤维材料降解中是否也起同样作用,是利用微生物转化可再生性木质纤维素实现生物量全利用,解决资源、环境可持续协调发展问题的关键。本文对分属于白腐菌、褐腐菌和软腐菌3大类34个属共57株真菌（见表1）进行研究,证明纤维分解真菌产生分子量低于5KD并具有形成羟基自由基能力的低分子多肽为一普适特性。同时证实低分子多肽与纤维素酶协同作用能显著促进秸秆、木屑等天然纤维材料的降解。研究结果已刊出（Biotechnology Letters,2004,26:1799;自然科学进展,2004,14:1230）。 对多株纤维素降解真菌进行研究,发现具有络和Fe3+及还原Fe3+为Fe2+能力的低分子多肽在真菌中普遍存在,且与纤维素降解能力相关。典型的纤维素降解菌能强烈络和Fe3+,并能将其还原为Fe2+。Fenton反应需要Fe2+的参与,络和Fe3+
论文目录:
摘要
Abstract
缩写词表
第一部分 真菌产生的低分子多肽在纤维素降解中的作用
第一章 研究背景
1．1 纤维素的生物降解
1．2 木素降解
1．3 羟基自由基的杀菌活性
1．4 论文的立题依据、可行性分析、研究内容及预期结果
第二章 低分子多肽在真菌中存在的普遍性
2．1 材料与方法
2．2 结果与分析
2．2．1 低分子多肽与 Fe~(3+)作用
2．2．2 真菌中HO·产生的普遍性
2．2．3 低分子多肽对 CMC-Na粘度的影响
2．2．4 H_2O_2和硫脲对低分子多肽产生羟基自由基的影响
2．3 小结
第三章 低分子多肽在天然纤维素降解中的作用
3．1 材料与方法
3．2 结果与分析
3．2．1 低分子多肽与纤维素酶的协同作用
3．2．2 硫脲及氧气对纤维素氧化降解的影响
3．3 小结
第四章 低分子多肽产生的羟基自由基的抗菌作用
4．1 材料与方法
4．2 结果与分析
4．2．1 Fe~(3+)对细菌的影响
4．2．2 羟基自由基对大肠杆菌的抑制
4．2．3 羟基自由基对λ噬菌体的抑制
4．3 小结
第二部分 真菌产生的低分子抗菌物质研究
第一章 研究背景
1．1 抗生素的研究历史
1．2 微生物药物的筛选及研究方法
1．3 病原菌耐药性的产生及应对策略
1．4 低分子多肽类抗生素研究
1．5 立题依据、研究内容及可行性分析
第二章 菌株筛选与基本性质测定
2．1 材料与方法
2．2 结果与分析
2．2．1 供试菌株产抗菌物质情况
2．2．2 抗菌物质的基本性质
2．2．3 菌种鉴定
2．3 小结
第三章 抑菌特性
3．1 材料与方法
3．2 结果与分析
3．2．1 AF对金黄色葡萄球菌野生菌株的MIC和 MBC
3．2．2 AF的抗菌谱
3．2．3 AF对多抗金黄色葡萄球菌的作用
3．2．4 AF抗性菌的产生检测
3．2．5 AF对金黄色葡萄球菌的影响
3．2．6 AF对植物病害的预防作用
3．3 小结
第四章 发酵条件优化
4．1 材料与方法
4．2 结果与分析
4．2．1 培养基对Penicillium sp．M03产生 AF的影响
4．2．2 氮源对Penicillium sp．M03产生 AF的影响
4．2．3 碳源对Penicillium sp．M03产生 AF的影响
4．2．4 培养时间对 AF产量的影响
4．2．5 AF发挥抑菌活性的最适温度和 PH值
4．3 小结
第五章 分离纯化
5．1 材料与方法
5．2 结果与分析
5．2．1 Sephadex LH-20分子筛柱层析
5．2．2 HPLC分离
5．2．3 AF1、AF2的 UV-VIS光谱
5．2．4 AF的含糖量及糖组成分析
5．3 小结
第六章 结构解析
6．1 材料与方法
6．2 结果与分析
6．2．1 氨基酸分析
6．2．2 红外光谱测定
6．2．3 AF1、AF2的核磁共振~1H和~(13)C
6．2．4 MALDI-TOF/MS测定
6．3 小结
参考文献
致谢
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学位论文评阅及答辩情况表
发布时间: 2005-10-17
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