论文摘要
目的①蒜氨酸制备工艺优选和验证实验;②拟定蒜氨酸原料药质量标准草案;③对蒜氨酸原料药稳定性的实验考察。方法①用重结晶的方法从蒜氨酸粗提取物中提取蒜氨酸单体原料药,对重结晶溶剂的选择,初始温度,终末温度,降温速度,洗涤方法,干燥条件等进行考察,对操作步骤细化;通过放大实验对成型工艺进行验证;②通过对性状描述和理化常数的测定,通过建立鉴别、检查、含量测定的方法,评价蒜氨酸原料药的质量;③通过高温,高湿,强光,加速实验考察蒜氨酸原料药的稳定性。结果①正交试验结果,蒜氨酸最佳的结晶条件是料液比1:5,溶剂乙醇浓度是75%,按每小时降温4℃降至25℃;溶解采用先水溶再加无水乙醇的方法比直接用75%的乙醇溶解,蒜氨酸损失会减小1.57%;洗涤采用70%乙醇量和湿结晶体积比3:4,洗3-4遍最佳;采用真空干燥箱,压力0.06Mpa,温度50℃,减压干燥至恒重;母液需浓缩至240mg·ml-1可在48h内结晶,母液60℃浓缩至原体积1/8-1/10,加1-2倍量无水乙醇;可再结晶。验证工艺的放大实验,得到五批一次结晶含量均在90%以上,得到的质控参数有:水溶解时波美度16-17,加无水乙醇后比重50-55。母液浓缩前波美18-23,浓缩后波美1-5;②蒜氨酸原料药质量标准的研究,蒜氨酸为白色结晶,无臭无味,性质稳定,在5℃贮藏三个月外观无变化,但80℃及80℃以上温度下遇热变黄,具引湿性,无分化挥发;在水中易溶解,在无机酸、碱中略溶,在无水乙醇、丙酮、乙醚,冰醋酸等有机溶剂中不溶;熔点157-163℃;比旋度+62.79°;吸收系数88.1-88.6;鉴别采用化学,HPLC,TLC,IR,MS等方法,对薄层鉴别法的展开剂,点样量,检测限,专属性,斑点稳定性进行考察,按药典方法检查一般杂质,规定杂质限量,建立有关物质限量检查法,拟定限量小于6.5%;含量测采用HPLC法,色谱条件,理论塔板数,分离度,拖尾因子符合要求,样品测定结果稳定,重现性好;③稳定性实验结果显示,蒜氨酸原料药在强光照射、高温条件下稳定,在室温条件下,对湿度敏感,加速实验表明蒜氨酸在现有包装条件下质量稳定。结论①用重结晶的方法对蒜氨酸粗提取物进行纯化,含量达到90%以上,符合原料药的要求,经过5批放大实验验证,工艺稳定,可用于中试生产蒜氨酸原料药;②质量标准草案内容全面,可操作性强,④蒜氨酸在强光、高温下较稳定,在高湿条件下不稳定。