体外培养人胚胎生殖干细胞的超微结构及培养体系中细胞因子的表达

论文摘要

目的:检测细胞培养上清液中LIF、SCF和bFGF的水平,探索更完善的人胚胎生殖干细胞（EG细胞）体外培养体系;光镜观察人PGCs,透射电镜观察人EG细胞的超微结构,深入了解人PGCs和人EG细胞的形态学特征。 方法:采用组织块培养法体外培养人EG细胞,收集不同生长阶段（第3d和第9d）的细胞培养上清液,用双抗体夹心ABC-ELISA法定量测定其中人LIF、SCF、bFGF的水平;取胚胎两侧生殖腺嵴、中肾嵴常规HE染色,制备切片,在光镜下观察并拍摄照片;收集足量的人EG细胞和胚胎成纤维细胞制备超薄切片,在透射电镜下观察并拍摄照片。 结果:第9d培养液中LIF浓度（55.25±6.51pg/ml）,高于第3d（46.56±0.89pg/ml）,差别有统计意义（P<0.05）;第9d SCF浓度（90.39±3.98pg/ml）,显著高于第3d（78.47±2.03pg/ml）,差别有高度统计意义（P<0.01）;第9d bFGF浓度（26.06±1.73pg/ml）,显著高于第3d（22.13±1.08pg/ml）,差别有高度统计意义（P<0.01）。光镜下可见人PGCs呈索条状排列或零星散布于组织中,细胞大,呈圆形或椭圆形,轮廓清楚。核质比高,细胞核大,着色深,呈圆形或椭圆形,呈偏心位,核仁较明显。透射电镜下观察人EG细胞核质比高,细胞质少,细胞器不发达,

论文目录

• 引言
• 第一部分 人胚胎生殖干细胞培养体系中LIF、SCF和bFGF的表达
• 第二部分 人原始生殖细胞的光镜结构
• 第三部分 人胚胎生殖干细胞的超微结构
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 附录（缩略词表）
• 攻读学位期间发表的论文
• 致谢