论文摘要
目的探讨香烟烟雾提取物（CSE）对血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响,腺病毒介导GPX基因转染血管内皮细胞后,能否抑制香烟提取物致血管内皮细胞的氧化应激和凋亡。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株（ECV304）,取指数生长期细胞用于实验。将ECV304分四组:分别予0%CSE（空白组）、10%CSE（CSE组）、LacZ+10%CSE（LacZ组）、GPX转染+10%CSE（GPX转染组）。收集各组干预24h后细胞爬片,TUNEL法检测细胞凋亡率（AI）,H2DCFDA染色法,经激光共聚焦显微镜检测细胞内ROS。结果1.70MOI的腺病毒介导的LacZ转染率高达（93.3±2.9）%。2.10%CSE干预ECV304 24h后,其AI高于0%及5%CSE干预组,差异有统计学意义（p均＜0.05）。10%CSE干预ECV304 24h后,其AI高于0h、6h和12h组,差异有统计学意义（p均＜0.05）。3.10%CSE干预ECV304 24h后,与空白组比较,其细胞内ROS增加,差异有统计学意义（p均＜0.05）。4.腺病毒介导的GPX基因转染后的ECV304,经10%CSE干预24h后,与CSE组及LacZ组比较,其细胞内ROS降低,AI降低,差异有统计学意义（p均＜0.05）。5.四组ECV304细胞内ROS水平与AI呈正相关（n=5,r=0.775,p＜0.01）。结论1.CSE能导致内皮细胞氧化应激和凋亡,其致凋亡作用呈时间和浓度依赖性。2.腺病毒介导GPX基因转染可以部分抑制CSE致内皮细胞氧化应激和凋亡。3.CSE致内皮细胞凋亡可能与氧化应激有相关。
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