番茄内生细菌及其对番茄青枯病的防治作用研究

番茄内生细菌及其对番茄青枯病的防治作用研究

论文题目: 番茄内生细菌及其对番茄青枯病的防治作用研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 植物病理学

作者: 黎起秦

导师: 罗宽

关键词: 番茄,内生细菌,番茄青枯病,种群,动态分析,拮抗物质,生物防治

文献来源: 湖南农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 植物内生细菌是一类能够在健康植物细胞间隙或细胞内定殖,并与寄主植物建立和谐联合关系的细菌。内生细菌是植物微生态系统中重要的生物类群,在植物体内可以促进寄主植物的生长,具有提高植物抗病性的功能和促进植物修复的作用。植物内生细菌的研究常以单一的对植物病原物的拮抗作用方面宋开展,而对内生细菌的种群和数量变化动态以及在环境和植物中的生存与防病关系方面的研究较少。 番茄青枯病是由番茄青枯病菌侵染引起的一类毁灭性的植物土传病害。目前,有效地防治该病仍然是一个难题。本研究在分析番茄内生细菌的种群及数量变化动态和在番茄微生态系统中各生物间的相互作用基础上,筛选出对番茄青枯病菌有拮抗作用和对番茄有促生作用的内生细菌菌株,测定这一菌株的生物学特性和在土壤以及植株体内生存的能力,并对番茄青枯病的防治进行初步的探讨,为利用内生细菌防治番茄青枯病奠定理论基础。本研究获得以下结果: 1 番茄内生细菌的种群和数量变化动态 1.1 番茄内生细菌的种群 用培养法分析广西部分县市的番茄内生细菌的种群,初步确定有芽孢杆菌(Bacillus spp.)、假单胞菌(Pseudomonas spp.)、黄单胞菌(Xanthomonas spp.)、棒杆菌(Corynebacterium spp.)、土壤杆菌(Agrobacterium spp.)、微杆菌(Micobacterium spp.)、肠杆菌(Enterobacter spp.)和欧文氏菌(Erwinia spp.)8类。 1.2 番茄内生细菌的种群变化 不同栽培品种其内生细菌的种群是有差异的,测试的两个品种中,在红宝石品种的植株中分离到Xanthomonas spp,但美星品种的植株中没有分离到这一种群。番茄内生细菌的种群在番茄品种间的差异可能与内生细菌对寄主的选择性有关。 内生细菌的种群也随地区而异。同是台湾圣女品种,在田阳种植的有Microbacterium spp.,而在玉林种植的没有Microbacterium spp.,但比田阳种植的多Xanthomonas spp.。根据番茄内生细菌的种群随地区而异的结果推测,内生细菌在番茄植株内受到环境气候因素、土壤结构和土壤微生物的影响。虽然不同的品种和不同的地区其内生细菌的种群有差异,但以Bacillus spp., Pseudomonas spp.和Agrobacterium spp.三类内生细菌为主要的种群,芽孢杆菌Bacillus spp为优势种群。 1.3 番茄内生细菌的种群数量变化

论文目录:

摘要

ABSTRACT

缩写词表

第一章 前言

1 植物内生细菌的生态学作用

1.1 内生细菌的起源及其进入寄主植物的途径

1.2 内生细菌在植物体内的存在方式和定殖的部位

1.3 内生细菌的类群

1.4 植物内生细菌在寄主植物中的种群数量变化

1.5 内生细菌的分离培养

1.6 植物内生细菌的研究方法

1.7 植物内生细菌的生态学作用

1.8 内生细菌研究存在的问题及其展望

2 茄科植物青枯病的防治研究状况

2.1 传统的防治方法

2.2 抗病育种

2.3 生防菌的利用

2.4 微生物代谢物的利用

2.5 其它生防材料的利用

2.6 微生态防治

2.7 展望

3 本项目研究的目的意义

第二章 番茄内生细菌的种群和数量动态分析

1 材料与方法

1.1 内生细菌的分离

1.2 内生细菌的鉴定

1.3 分离菌的内生性测定

2 结果与分析

2.1 番茄内生细菌的种类

2.2 番茄内生细菌的种群和数量变化

2.2.1 内生细菌在番茄不同器官中的种群数量变化

2.2.2 内生细菌在番茄不同生育期中的种群数量变化

2.2.3 内生细菌在番茄不同栽培季节中的种群数量变化

2.2.4 内生细菌在不同番茄品种中的种群变化

2.2.5 内生细菌在不同地区栽培番茄中的种群变化

2.3 分离菌株的内生性测定结果

3 小结与讨论

3.1 广西番茄内生细菌的种类

3.2 番茄内生细菌的种群随品种和种植的地区而变化

3.3 番茄内生细菌的种群数量随品种、植株的器官和生育期而变化

3.4 分离菌的内生性

第三章 番茄微生态系统中生物间的相互作用分析

1 材料与方法

1.1 供试的内生细菌和番茄青枯病菌

1.2 培养基

1.3 内生细菌间的相互作用测定

1.4 内生细菌对番茄青枯病菌的抑制作用测定

1.5 拮抗内生细菌菌株对番茄植株生长的促进作用测定

1.6 拮抗内生细菌菌株与土壤微生物间的相互作用测定

2 结果与分析

2.1 内生细菌间的相互作用

2.2 内生细菌对番茄青枯病菌的拮抗作用

2.3 拮抗菌株对番茄植株生长的促进作用

2.4 拮抗内生细菌B47菌株与土壤微生物间的相互作用

3 小结和讨论

3.1 内生细菌间的相互作用

3.2 内生细菌对番茄青枯病菌的拮抗作用

3.3 拮抗内生细菌菌株对番茄生长的促进作用

3.4 拮抗内生细菌B47菌株与土壤微生物间的相互作用

第四章 番茄内生芽孢杆菌B47菌株的鉴定及生物学特性测定

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

1.2.1 供试菌的培养

1.2.2 B47菌株的鉴定

1.2.3 B47菌株的部分生物学特性测定

1.2.4 B47菌株入侵番茄植株的途径测定

1.2.5 B47菌株定殖部位的检测

1.2.6 B47菌株在不同番茄品种中的内生性测定

2 结果与分析

2.1 B47菌株的鉴定结果

2.1.1 培养性状及形态特征

2.1.2 生理生化特性

2.1.3 PCR扩增和16S rDNA序列的分析结果

2.2 B47菌株的生物学特性

2.2.1 生长曲线

2.2.2 温度对B47菌株生长的影响

2.2.3 pH值对B47菌株生长的影响

2.2.4 碳源的利用

2.2.5 氮源的利用

2.3 B47菌株入侵番茄植株的途径

2.4 B47菌株在植株内的定殖部位

2.5 B47菌株在不同番茄品种植株中的定殖情况

3 小结与讨论

3.1 内生细菌B47菌株的分类地位

3.2 内生细菌B47菌株的生物学特性

3.3 内生细菌B47菌株入侵植物的途径

3.4 内生细菌B47菌株在植株体内的定殖部位

3.5 内生细菌B47菌株在不同番茄品种中的定殖

第五章 内生芽孢杆菌B47菌株的生存能力及其对番茄青枯病的抑制作用分析

1 材料与方法

1.1 培养基

1.2 内生细菌、番茄青枯病菌、土壤类型和番茄品种

1.3 番茄植株接种B47菌株和番茄青枯病菌的方法

1.4 土壤接种B47菌株和番茄青枯病菌的方法

1.5 供试菌的回收方法

2 结果与分析

2.1 土壤营养的分析结果

2.2 芽孢杆菌B47菌株在不同类型土壤中的生存能力

2.3 B47菌株在土壤中的生存能力对番茄青枯病的抑制作用

2.4 B47菌株在番茄植株根系中的生存情况

2.5 B47菌株在番茄植株中的生存能力

2.6 芽孢杆菌B47菌株对番茄青枯病的抑制作用

3 小结与讨论

3.1 土壤的营养及其微生物对芽孢杆菌B47菌株在土壤中定殖的影响

3.2 植株的器官和生育期对芽孢杆菌B47菌株生存的影响

3.3 B47菌株在土壤和植株中的生存能力与防治番茄青枯病的关系

第六章 芽孢杆菌B47菌株产生的拮抗物质的纯化及其特性测定

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试的菌种

1.1.2 供试的培养基

1.1.3 供试的试剂及药品

1.2 方法

1.2.1 供试菌的培养

1.2.2 拮抗物质抑菌活性的测定

1.2.3 拮抗物质的沉淀

1.2.4 拮抗物质的萃取

1.2.5 甲醇提取液的透析、浓缩

1.2.6 拮抗物质的纯化

1.2.7 拮抗物质粗提取物的稳定性检测

1.2.8 拮抗物质粗提物的抑菌谱检测

2 结果与分析

2.1 拮抗物质的提取

2.2 拮抗物质甲醇提取物的稳定性

2.3 拮抗物质甲醇提取物的抑菌效价

2.4 拮抗物质的纯化

2.5 拮抗物质粗提取物的抑菌谱

3 小结与讨论

3.1 B47菌株产生的拮抗物质的特性和抑菌谱

3.2 B47菌株产生的拮抗物质的纯化

3.3 B47菌株产生的拮抗物质的类别

第七章 芽孢杆菌B47菌株对番茄青枯病的防治作用

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试的菌种

1.1.2 供试的番茄品种

1.1.3 供试的培养基

1.2 方法

1.2.1 供试菌的培养

1.2.2 B47菌株和番茄青枯病菌在植株体内扩展和繁殖能力的测定

1.2.3 室内防治试验

1.2.4 田间防治试验

2 结果与分析

2.1 B47菌株和番茄青枯病菌在植株体内的扩展和繁殖能力

2.2 室内防治试验的结果

2.3 田间防治试验的结果

3 小结与讨论

3.1 B47菌株和番茄青枯病菌在番茄植株中的扩展和繁殖能力

3.2 B47菌株在寄主内的数量对番茄青枯病防治作用的影响

3.3 番茄青枯病菌的量与B47菌株对番茄青枯病的防治作用

3.4 混合生防菌对番茄青枯病的防效

3.5 内生细菌对番茄青枯病防治的后期效果

第八章 结论

1 主要研究结果

2 主要创新点

3 今后的研究方向与目标

参考文献

附件1

版图及版图说明

致谢

作者简介

在读期间学术成果

发布时间: 2005-08-15

参考文献

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