云南五种花卉植物内生真菌多样性及其对植物生长的影响研究

论文摘要

内生真菌是指那些在其生活史的一定或全部阶段生活于健康植物组织内部,而不引起宿主植物组织表现出明显病害症状的真菌。一方面,内生真菌从宿主植物吸收碳水化合物进行生长繁殖,另一面,内生真菌通过产生种类繁多的生物活性物质,促进宿主植物的生长、增强其对各种生物胁迫和非生物胁迫的抗性,从而提高宿主植物的生存竞争力和生态适应性。云南作为花卉植物种植大省,鲜切花销量占到全国市场的50%左右,但到目前为止,有关云南花卉植物的内生真菌多样性及其促生长作用却鲜见报道。本研究以云南昆明斗南大棚种植花卉月季（Rosa hybrid）、康乃馨（Dianthus caryophyllus）和野外生长花卉玫瑰（Rosa rugosa）、山茶花（Camellia japomica）和凤凰木（Delonix regia）为研究对象,对其内生真菌多样性进行比较研究,试图筛选出能显著促进宿主植物生长、能用于花卉种植业的内生真菌菌株,研究结果如下：1.从5种花卉植物共1000个茎叶组织块中分离得到内生真菌357株,内生真菌的分离频率在0.095-0.795之间,平均分离频率为0.356。经鉴定,内生真菌分属于交链孢属（Alternaria）、拟茎点霉属（Phomopsis）、枝孢属（Cladosporium）和刺盘孢属（Colletotrichum）等24个分类单元,其中,交链孢属（Alternaria）、拟茎点霉属（Phomopsis）、枝孢属（Cladosporium）和刺盘孢属（Colletotrichum）分别占总菌数的21.57%、17.36%、5.04%和5.04%,是5种花卉植物中的优势菌属。5种花卉植物内生真菌的多样性指数在1.73-2.45之间,说明在花卉植物中内生真菌多样性丰富。2.野生花卉植物玫瑰、山茶花和凤凰木内生真菌在种类和数量上都多于大棚种植花卉月季和康乃馨,这可能是由于大棚种植花卉月季和康乃馨施用化肥、杀虫剂等、造成内生真菌种类较单一、数量较少。3.从茎点霉属（Phoma）、拟茎点霉属（Phomopsis）、交链孢属（Alternaria）、刺盘孢属（Colletotrichum）和无孢类群（Sterile mycelium）中选取的共24株内生真菌进行促烟草生长实验,同时以来自云南元江干热河谷的8株内生真菌菌株（4株交链孢和4株拟茎点霉）为对照。结果表明来自花卉的50%受测菌株和来自元江干热河谷的25%的受测菌株对烟草具有一定的促生长作用。4.进一步对促烟草生长作用明显的内生真菌菌株A38、A7、B50和H25进行温室盆栽接种试验,并定期测定株高、生物量、可溶性蛋白和叶绿素等理化指标,结果表明,来自山茶花的内生真菌菌株A38具有明显的促生长作用,接种该菌株的烟草,其株高、鲜重、干重和可溶性糖分别提高了25.15%、64.98%、67.50%和21.43%,通过进一步在花卉植物中的接种研究,将有望应用于大棚花卉种植。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略词
• 第一章 引言
• 1.1 植物内生真菌研究概况
• 1.1.1 植物内生真菌的概念
• 1.1.2 植物内生真菌多样性研究进展
• 1.2 内生真菌活性代谢研究
• 1.2.1 内生真菌抗肿瘤活性研究
• 1.2.2 内生真菌抗菌活性研究
• 1.2.3 内生真菌其它活性研究
• 1.3 内生真菌的生物学作用
• 1.3.1 内生真菌促植物生长作用
• 1.3.2 内生真菌增强植物抗逆性作用
• 1.4 花卉植物内生真菌研究
• 1.4.1 兰科植物内生真菌研究
• 1.4.2 杜鹃花科植物内生真菌研究
• 1.4.3 其他花卉植物内生真菌研究
• 1.5 本课题的研究内容、目的意义及技术路线
• 1.5.1 研究内容
• 1.5.2 研究目的、意义
• 1.5.3 技术路线
• 第二章 材料与方法
• 2.1 样地概况
• 2.2 材料
• 2.2.1 植物样品
• 2.2.2 化学药品和试剂
• 2.2.3 培养基
• 2.2.4 主要仪器
• 2.3 植物内生真菌的分离、纯化及鉴定
• 2.3.1 样品处理
• 2.3.2 内生真菌的分离纯化
• 2.3.3 内生真菌的形态学鉴定
• 2.3.4 部分菌株的分子鉴定
• 2.4 无菌烟草苗的培养
• 2.5 促植物生长内生真菌菌株的筛选
• 2.5.1 菌株来源
• 2.5.2 菌种初筛
• 2.6 内生真菌对植物生长的影响
• 2.6.1 供试培养基质
• 2.6.2 菌株A7、A38、H25和B50接种剂的准备
• 2.6.3 促烟草生长试验设计
• 2.6.4 温室盆栽试验
• 2.6.5 参数测定方法
• 2.7 数据统计与分析方法
• 第三章 结果与分析
• 3.1 内生真菌分离鉴定结果
• 3.1.1 内生真菌的分离频率
• 3.1.2 内生真菌的组成
• 3.2 内生真菌促植物生长研究
• 3.2.1 促生长菌株初筛结果与分析
• 3.2.2 四株花卉植物内生真菌促烟草生长研究
• 第四章 总结
• 致谢词
• 参考文献
• 附录 硕士期间发表论文