论文摘要
目的：（1）阐明昆明地区汉族人群中的21号染色体上3个STR位点D21S11、D21S1435、D21S1437，18号染色体上2个STR位点D18S1002、D18S499的结构特征和群体遗传学数据。（2）探讨运用STR位点进行快速产前诊断的可行性，建立快速产前诊断唐氏综合征和18三体综合征的DNA分析技术。方法：（1）用PCR方法对160名昆明地区无血缘关系汉族正常个体及40例母血、羊水的基因组DNA进行扩增，聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色分型，结合图像分析系统测定等位基因片段大小进行等位基因的分型。运用Hardy-Weinberg平衡对数据进行检验。（2）运用上述5个STR位点联合D21S1411、D21S2039、D18S386、D18S858对11例唐氏综合征（Down’s syndrome，DS）确诊者、2个DS家系、1例18三体综合征（Edward syndrome，ES）确诊者进行21号、18号染色体的STR多态性分析，并判断额外染色体双亲来源及染色体不分离发生时期。对50个有产前诊断指征的家系进行STR位点分析，并与羊水细胞培养结果进行比对。同时比对单一位点与多位点的诊断准确率。结果：（1）通过对5个STR基因座的扩增，得出5个STR位点的等位基因数、基因频率、基因型频率、杂合度、多态信息含量等群体遗传学数据。证实这5个位点杂合度、多态信息量高，可作为常用STR位点。40例母血、羊水STR位点同步电泳分析显示无母血污染，其遗传方式符合孟德尔遗传定律，1例羊水样本出现D21S11位点突变。（2）运用STR-PCR技术对14例DS、ES确诊者进行分析，结果与染色体核型分析一致。2个DS家系分析显患儿额外21号染色体为母亲来源，染色体不分离期发生于MI期。50例产前诊断家系分析显示：48例未提示胎儿为DS或ES；1例提示胎儿为ES，基因诊断结果与羊水培养染色体核型分析完全一致；1例为血性羊水出现母血污染无法提诊断信息。结论：（1）D21S11、D21S1435、D21S1437，D18S1002、D18S499 5个STR位点在昆明人群中的分布符合Hardy-Weinberg平衡，且杂合度、多态性信息含量高，是理想的遗传标记，可作为中国人群第18、21号染色体倍性分析的首选常用位点。本研究为唐氏综合征的基因诊断和产前基因诊断提供理论依据，也为这些遗传标记在我国人群中进行亲子鉴定和个体识别提供概率计算依据。（2）选取上述5个位点联合D21S2039、D21S1411、D18S535、D18S386可对DS、ES作出快速、准确的产前诊断，较只运用单一位点准确率更高。并可判断额外染色体来源及染色体不分离发生时期。但可能出现母血污染而无法提供诊断信息。