芽孢杆菌PAS38制剂和β-甘露聚糖制剂对家兔小肠内分泌免疫的影响研究

论文摘要

本研究为探讨芽孢杆菌制剂和β-甘露聚糖对家兔小肠内分泌免疫的影响进行了研究。将48只40日龄加利福尼亚兔（雄性）预饲5天后随机分为对照组、芽孢杆菌PAS38组、β-甘露聚糖组、芽孢杆菌PAS38+β-甘露聚糖组4组。对照组饲喂基础日粮,芽孢杆菌PAS38组、β-甘露聚糖组和芽孢杆菌PAS38+β-甘露聚糖组分别在基础日粮中添加0.1%芽孢杆菌PAS38,0.15%β-甘露聚糖和0.1%PAS38+0.15%β-甘露聚糖,分别于饲喂15天、30天、45天各取4只家兔称量体重后宰杀,测定其生产性能,采取十二指肠和空肠测量了小肠粘膜厚度和绒毛长度,并计算了上皮内淋巴细胞（IEL）的数量,研究了小肠粘膜中生长抑素（SS）阳性细胞、IgA阳性细胞、5-HT阳性细胞及肥大细胞的分布及其数量的变化。1.分别于饲喂第15天、30天、45天称量家兔体重,对每天的饲料进行回收称重,计算家兔每天的平均体增重、采食量和料重比。结果表明:芽孢杆菌和甘露聚糖可提高家兔的平均日增重和饲料报酬,从而提高了家兔的生产性能;当两者联合使用之后并表现出良好的协同效应。2.采用H.E染色方法测量了小肠粘膜厚度和绒毛长度。结果显示,芽孢杆菌制剂和甘露聚糖可显著增加小肠粘膜厚度和绒毛长度,饲喂前期,甘露聚糖的作用效果比芽孢杆菌稍好,但在饲喂的中后期,芽孢杆菌则发挥出更大的优势,两者联合使用后作用效果要优于其中任何一种单独使用,表现出了一定的协同效应。3.采用H.E染色计算了IEL的数量。在饲喂的整个过程中,各组家兔肠道内IEL的数量均有不同程度的升高。饲喂15天后,混合组十二指肠中IEL细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）;饲喂30天后,与对照组相比,芽孢杆菌组和甘露聚糖组十二指肠中IEL细胞数量显著增加（P＜0.05）,混合组极显著增加（P＜0.01）;芽孢杆菌组和混合组空肠中IEL细胞比对照组显著增加（P＜0.05）;饲喂45天后,芽孢杆菌组和混合组十二指肠中IEL细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）。表明芽孢杆菌制剂和甘露聚糖可显著增加家兔小肠中IEL细胞的数量,以混合组的效果为最好。4.采用免疫组化技术（SABC法）研究了家兔小肠中IgA阳性细胞的数量变化。饲喂15天后,混合组家兔空肠中IgA阳性细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）;饲喂30天后,芽孢杆菌组和甘露聚糖组家兔十二指肠中IgA细胞数量显著增加（P＜0.05）,混合组极显著增加（P＜0.01）;各实验组家兔空肠中IgA阳性细胞数量与对照组相比均显著增加（P＜0.05）;饲喂45天后,混合组十二指肠中IgA细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）。结果表明,芽孢杆菌制剂和甘露聚糖可显著增加家兔小肠中IgA阳性细胞的数量,提示芽孢杆菌和甘露聚糖对肠粘膜免疫功能有一定的促进作用,以联合使用的情况为最佳。5.采用免疫组化技术（SABC法）研究了家兔小肠中5-HT阳性细胞的数量变化。饲喂15天后,芽孢杆菌组和甘露聚糖组十二指肠中5-HT阳性细胞数量显著增加（P＜0.05）,混合组极显著增加（P＜0.01）;芽孢杆菌组空肠中5-HT阳性细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）,混合组比对照组极显著增加（P＜0.01）;饲喂30天后,芽孢杆菌组和混合组十二指肠的5-HT数量比对照组极显著增加（P＜0.01）;与对照组相比,芽孢杆菌和甘露聚糖组空肠中的5-HT显著增加（P＜0.05）,混合组极显著增加（P＜0.01）:饲喂45天后,混合组十二指肠中5-HT阳性细胞显著增加（P＜0.05）。结果表明,芽孢杆菌制剂、甘露聚糖尤其是联合使用之后可显著降低家兔小肠中5-HT阳性细胞的平均灰度值,从而增强了家兔小肠的内分泌免疫功能。6.应用甲苯胺蓝染色技术研究了家兔小肠中肥大细胞数量的变化。结果显示:饲喂15天后,混合组家兔十二指肠中肥大细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）;芽孢杆菌组和混合组家兔空肠中肥大细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）;饲喂30天后,芽孢杆菌组和甘露聚糖组十二指肠中肥大细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）,混合组极显著增加（P＜0.01）;甘露聚糖组十二指肠中肥大细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）,芽孢杆菌组和混合组比对照组极显著增加（P＜0.01）;饲喂45天后,混合组十二指肠中肥大细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）;芽孢杆菌组空肠中肥大细胞数量比对照组显著增加（P＜0.05）,混合组极显著增加（P＜0.01）。结果表明,肥大细胞数量的增加表明小肠粘膜水平的提高。7.采用免疫组化技术（SABC法）研究了家兔小肠中生长抑素（SS）阳性细胞的数量变化。饲喂15天后,芽孢杆菌组十二指肠中SS阳性细胞数量比对照组显著减少（P＜0.05）;各实验组空肠中SS阳性细胞数量比对照组显著减少（P＜0.05）;饲喂30天后,芽孢杆菌组和甘露聚糖组十二指肠中SS比对照组显著减少（P＜0.05）,而混合组比对照组极显著减少（P＜0.01）;甘露聚糖组空肠中SS阳性细胞数量显著减少（P＜0.05）,芽孢杆菌组和混合组极显著减少（P＜0.01）;饲喂45天后,混合组空肠中SS阳性细胞数量比对照组显著减少（P＜0.05）,十二指肠中各实验组与对照相比无明显差异。结果表明,芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔生产性能、肠道内分泌免疫具有明显的增强作用,以联合使用的情况为最好。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 文献综述
• 1 益生菌的研究进展
• 1.1 益生菌的概况
• 1.2 益生菌的分类
• 1.3 益生菌的作用机理
• 2 寡糖的研究进展
• 2.1 寡糖概况
• 2.2 寡糖对动物生理机能的影响
• 3 肠道内神经内分泌免疫细胞
• 3.1 生长抑素（Somatostatin,SS）细胞
• 3.2 5-羟色胺（5-hydroxytryptamine）细胞
• 3.3 其他内分泌细胞
• 4 益生菌和寡糖与动物肠道粘膜免疫
• 4.1 肠道粘膜免疫系统
• 4.2 益生菌对动物肠道粘膜免疫的影响
• 4.3 寡糖对动物肠道粘膜免疫的影响
• 5 益生菌和寡糖与动物内分泌免疫
• 5.1 益生菌与动物内分泌免疫
• 5.2 寡糖与动物内分泌免疫
• 本课题的研究目的及意义
• 研究内容
• 1 材料
• 1.1 实验动物及基础日粮
• 1.2 实验菌种和寡糖
• 1.3 实验器材
• 1.4 试剂与药品
• 2 实验方法
• 2.1 动物分组和饲养管理
• 2.2 生产性能测定
• 2.3 动物取材及标本制备
• 2.4 小肠形态学观察
• 2.5 检测IgA、5-HT、和SS阳性细胞在小肠中的表达
• 2.6 甲苯胺蓝显示肥大细胞
• 3 实验结果
• 3.1 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔生产性能的影响
• 3.2 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠粘膜结构的影响
• 3.3 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠IEL细胞的影响
• 3.4 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠IgA阳性细胞的影响
• 3.5 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠5-HT阳性细胞的影响
• 3.6 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠肥大细胞的影响
• 3.7 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠SS阳性细胞的影响
• 4 讨论
• 4.1 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔生产性能的影响
• 4.2 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠粘膜结构的影响
• 4.3 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠IEL的影响
• 4.4 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠IgA的影响
• 4.5 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠5-HT的影响
• 4.6 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠肥大细胞的影响
• 4.7 芽孢杆菌制剂和甘露聚糖对家兔小肠SS的影响
• 结论
• 参考文献:
• 致谢
• 附图
• 攻读硕士学位期间发表论文目录