陕西省苹果轮纹病菌的致病性分化及其对果实的侵染过程研究

论文摘要

由Botryosphaeria dothidea （Moug. ） Ces. et De Not.引起的苹果轮纹病是一种可同时危害苹果树枝干和果实的病害,近年来在我国各大苹果产区均有发生,导致苹果的产量和质量下降,造成了严重的经济损失。同时由于其病菌的潜伏侵染特性,使其成为果实贮运期的重要病害之一。目前对轮纹病菌的具体侵染过程不明,且缺乏快速稳定的病菌致病力评价体系,使菌株的致病性分化研究、抗性材料的筛选、防治药剂筛选和药效评价等在一定程度上受到制约,进而影响病害的防治研究和实践。本研究建立了一个快速稳定、操作简便的菌株致病力评价体系,并应用该体系对来自陕西省不同地区的500株轮纹病菌的致病力进行测定,另外,初步明确了病菌分生孢子在果实上的侵染过程。主要研究结果如下:1.建立了苹果轮纹病菌的室内致病力评价体系,为病菌致病性分化、品种抗病性评价和药剂筛选的研究奠定了基础。以离体两年生枝条、当年生嫩梢、叶片和成熟果实为材料,用病菌菌饼对不同伤口类型的材料接种,通过比较病斑大小可以发现:枝条烫伤接种发病最迟且病斑最小;嫩梢针刺1针接种较叶痕接种发病严重;叶片上正面1针刺伤接种发病最快;果实去除果皮接种病斑扩展最迅速。进一步用4个致病力不同的菌株验证了评价方法的稳定性,且结果与田间无伤接种当年生新梢一致。研究表明四种材料均可用于室内快速评价病菌的致病力,同时推荐采用离体叶片正面针刺1针作为接种方法的首选。2.明确了陕西省轮纹病菌的致病性分化情况。将500株轮纹病菌分离株田间无伤接种当年生新梢,发现全部供试菌株以及同一地区、同一地块的菌株均存在明显的致病力分化现象,且中致病力类群所占比例最大,尚未发现这种分化现象与菌株地理来源存在显著的相关性。此外,将其中的200株分离株室内针刺接种离体叶片,也发现了类似的规律,菌株间存在普遍的致病力分化现象且中致病力类群占明显优势,尚未发现这种分化现象与地理来源存在显著的相关性。3.初步明确了病菌在苹果果实上的侵染过程。用孢悬液人工接种果实,通过扫描电镜的观察发现:大部分分生孢子在接种后6 h开始萌发,接种后9 h芽管直接穿透皮孔细胞或从皮孔细胞间隙侵入;接种后30 d,果实表面可见明显的病斑,对接种后35 d的果实组织的半薄切片进行观察发现:病健交界处的病部、未见病斑的果皮及果肉组织中均有菌丝的存在,病菌菌丝主要分布于细胞间隙及细胞内;对接种后45 d的果实组织的半薄切片进行观察发现:子实体埋生于表皮下,果肉组织出现不同程度的消解现象,病菌菌丝大量存在于病部果皮、果肉组织的细胞间隙及细胞内,且可以扩展至果核周围,菌丝在输导组织附近分布较为密集。4.通过对苹果轮纹病标本的采集、分离,从陕西、山西等地共得到菌株265株,同时对陕西省9个县枝干轮纹病的调查发现:各地均有轮纹病的发生,且发病情况各不相同,病株率从30-90%不等。通过对轮纹病致病性分化及侵染过程方面的研究,可以为病菌的致病性鉴定、抗性材料的筛选等提供科学有效的方法,为进一步明确病害的发病规律奠定基础,同时为防治策略的制定提供理论依据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 苹果轮纹病的发生与危害
• 1.2 病原菌
• 1.3 生物学特性
• 1.4 侵染过程及发病诱因
• 1.5 接种方法及致病性分化的研究
• 1.6 电镜技术的发展及优越性
• 1.7 本研究的目的及意义
• 第二章 标本的采集、分离及病害的田间调查
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 标本的采集
• 2.1.2 病原菌的分离
• 2.1.3 产孢体的诱导形成
• 2.1.4 病害的田间调查
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 标本的采集、分离
• 2.2.2 不同分离株在PDA 培养基上的培养性状观察
• 2.2.3 产孢体的诱导形成
• 2.2.4 病害的田间调查
• 2.3 结论
• 2.4 讨论
• 第三章 苹果轮纹病菌室内致病性评价方法的研究
• 3.1 前言
• 3.2 菌株、接种材料的准备
• 3.2.1 接种体的制备
• 3.2.2 接种材料
• 3.3 试验方法
• 3.3.1 室内接种不同离体材料
• 3.3.2 接种方法的验证
• 3.3.3 田间接种当年生新梢
• 3.3.4 结果统计及分析方法
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 室内接种不同离体材料
• 3.4.2 室内致病力评价方法的验证
• 3.4.3 田间接种当年生新梢
• 3.5 结论
• 3.6 讨论
• 第四章 陕西省苹果轮纹病菌致病力分化研究
• 4.1 前言
• 4.2 菌株、接种材料的准备
• 4.2.1 繁殖、保存及接种体的准备
• 4.2.2 接种材料
• 4.3 试验方法
• 4.3.1 病菌的田间致病力评价方法
• 4.3.2 病菌的室内致病力评价方法
• 4.3.3 数据分析方法
• 4.4 结果与分析
• 4.4.1 供试菌株致病性分化情况
• 4.4.2 不同地区来源菌株的致病性分析
• 4.4.3 同一地区不同地块来源的菌株致病力差异分析
• 4.5 结论
• 4.6 讨论
• 第五章 苹果轮纹病菌在果实上的侵染过程研究
• 5.1 前言
• 5.2 材料和方法
• 5.2.1 供试材料
• 5.2.2 分生孢子在水琼脂上的萌发观察
• 5.2.3 分生孢子接种果实的方法
• 5.2.4 取样与电镜样品制备
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 分生孢子在水琼脂上的萌发观察
• 5.3.2 分生孢子接种果实发病结果
• 5.3.3 分生孢子在果实上的萌发和侵入
• 5.3.4 病菌菌丝在寄主体内的分布及扩展情况
• 5.4 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介