利用SSR标记鉴定杂交玉米及其亲本种子真实性和纯度的研究

论文摘要

玉米是我国的主要粮食作物之一,玉米种子质量问题是农业生产中的一大突出问题。种子真实性和纯度检验是种子质量检验的重要指标,是控制种子质量、杜绝伪劣种子流入市场的重要手段。本论文研究目的是以DNA分子标记(SSR标记)为技术手段,通过对SSR分子标记的标准检测体系的优化,筛选并确立核心引物,同时确立谱带判读标准,最终建立起玉米杂交种子和其亲本自交系真实性及其纯度检测的技术体系。主要研究结果如下:(1)从玉米基因组DNA提取、PCR扩增、电泳检测等各个环节进行优化实验,建立了适合于玉米的SSR分子标记的分析方法。(2)根据国内外相关文献和网上所公布的资料(http://www.maizegdb.org),初步选择了127对SSR引物,用这些引物对生产上常用的16个玉米杂交组合和32个骨干自交系进行SSR分析,从中筛选出扩增稳定、PIC值高、带型分布合理的40对核心引物(包括20对一级核心引物和20对二级核心引物)。(3)在上述研究的基础上,对杂交玉米和其亲本种子的真实性和纯度的检测进行了系统研究。并初步确立了对检测结果进行判读的标准,通过对人工构建的混合群体(3个杂交组合群体,3个自交系群体)的验证试验,证明了该检测体系的有效性和可行性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 文献综述
• 1.1 研究目的和意义
• 1.2 品种鉴定和纯度分析的主要方法
• 1.2.1 形态鉴定法
• 1.2.2 生化鉴定法
• 1.2.3 DNA分子标记技术鉴定
• 1.3 DNA分子标记在玉米品种纯度和真实性鉴定中的应用及研究进展
• 1.3.1 RFLP的应用
• 1.3.2 RAPD的应用
• 1.3.3 SSR的应用
• 1.3.4 AFLP的应用
• 1.3.5 SNP的应用
• 1.4 论文立题依据
• 2 检测体系的优化和建立
• 2.1 DNA提取方法的比较
• 2.1.1 材料与方法
• 2.1.2 结果与分析
• 2.2 SSR扩增反应体系的优化
• 2.2.1 材料与方法
• 2.2.2 结果与分析
• 2.2.3 讨论
• 3 引物的筛选与核心引物的确定
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 仪器及耗材
• 3.1.3 主要试剂和溶液配制
• 3.1.4 试验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.3 讨论
• 4 玉米真实性和纯度检测体系的建立及验证
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试验材料
• 4.1.2 仪器及耗材
• 4.1.3 主要试剂和溶液配制
• 4.1.4 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 杂交种真实性鉴定结果
• 4.2.2 杂交种纯度鉴定结果
• 4.2.3 自交系真实性鉴定结果
• 4.2.4 自交系纯度鉴定结果
• 4.3 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 附录A:供试的SSR引物
• 附录B:相关统计参数及计算
• 致谢
• 个人简介
• 攻读学位期间发表的学术论文