碱性成纤维细胞生长因子对大鼠椎间盘细胞凋亡及基质代谢的影响

论文摘要

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对体外培养大鼠椎间盘细胞及基质代谢的影响。方法建立大鼠椎间盘细胞培养体系,体外单层培养大鼠椎间盘细胞,取生长良好的第2代细胞实验,使用抗-Fas抗体诱导凋亡,加入不同浓度（10,100,1000μg/L）的碱性成纤维生长因子影响椎间盘细胞的凋亡及代谢过程,利用流式细胞仪-PI标记法检测椎间盘细胞凋亡情况;利用氯胺-T法和DMB比色法分别检测细胞培养液中羟脯氨酸及蛋白多糖的含量。结果①不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子（10,100,1000μg/L）椎间盘细胞凋亡率（87.62±11.06）,（53.30±9.23）,（16.75±4.21）%与对照组比较差异均有显著性意义（P＜0.01）。②随着碱性成纤维细胞生长因子浓度的增加（10,100,1000μg/L）,羟脯氨酸含量、蛋白多糖含量明显增加,[羟脯氨酸含量（6.71±0.33）,（9.12±0.41）,（11.58±0.12）μg/L,P＜0.01;蛋白多糖含量（23.21±2.87）,（32.45±5.23）,（37.18±3.22）μg/L,P＜0.01]。碱性成纤维细胞生长因子的浓度与两者呈正相关（ra=0.972,P＜0.01:rb=0.907P＜0.01）。结论碱性成纤维细胞生长因子可以抑制体外培养的椎间盘细胞凋亡,促进椎间盘细胞基质中胶原及蛋白多糖的合成。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 前言
• 背景回顾
• 1. 细胞凋亡
• 2. 细胞外基质
• 2.1 胶原蛋白
• 2.2 蛋白多糖
• 3. 碱性成纤维细胞生长因子
• 材料与方法
• 1. 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器
• 1.4 实验器材
• 2. 实验方法
• 2.1 主要溶液配制
• 2.2 建立大鼠椎间盘细胞培养体系及分组
• 2.3 透射电镜观察细胞超微结构
• 2.4 流式细胞仪 PI标记法检测细胞凋亡率
• 2.5 氯胺T法检测羟脯氨酸的含量
• 2.6 DMB比色法检测蛋白多糖的含量
• 3. 统计学处理
• 结果
• 1. 椎间盘细胞形态学观察
• 2. 透射电镜观察
• 3. 流式细胞仪检测细胞凋亡情况
• 4. 细胞培养液中羟脯氨酸和蛋白多糖的含量
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的论文目录
• 致谢
• 缩略词
• 附录