论文摘要
目的探讨金葡素（金黄色葡萄球菌滤液制剂）对兔ACL重建后腱-骨愈合的影响。方法采用自体趾长伸肌肌腱建立兔ACL重建动物模型,成年新西兰大白兔24只随机分为2组（实验组和空白对照组）,实验组于胫骨隧道建立后立即向隧道内均匀注射金黄色葡萄球菌滤液制剂（金葡素,Highly Agglutinative Staphylococcin, HAS,一种能够促进骨折愈合的生物制剂）0.2m1,分别于术毕及术后第2周于胫骨端腱-骨界面再次均匀注射金葡素0.08m1。对照组以相同时间和方法注射等量0.9%Nacl注射液。分别于术后第4、8和12周各处死动物8只,自膝关节囊至胫骨结节下方横断取材,完整保留胫骨端骨隧道及移植肌腱,固定包埋后均行HE、VEGF免疫组化、苦味酸-天狼猩红和甲苯胺蓝染色,组织学评价腱-骨界面组织愈合情况。HE染色定性观察腱-骨愈合程度,并以Yamakado分型方法进行评估；苦味酸-天狼猩红染色定性评价腱-骨界面Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维增生、排列分布情况；VEGF免疫组化染色定量评价腱-骨界面血管生成情况；甲苯胺蓝染色定量评价腱-骨界面新骨生成情况。结果实验组术后第4周腱-骨界面由纤维结缔组织填充,结合较为紧密,新生血管分布其间,成纤维细胞和成软骨细胞增生活跃,胶原纤维含量不多、排列尚不规则。术后第8周腱-骨结合较紧密,胶原纤维大量生成,部分区域可见Sharpey’s纤维,形成间接止点,大量新生血管分布其间,肌腱周围成骨明显丰富,整个界面呈现新骨组织包围肌腱并向内侵入的趋势。第12周移植肌腱与骨隧道之间形成典型的间接连接,可见Sharpey’s纤维排列有序,集结成束,血管生成较第8周有所减少,仍较丰富,新骨生成进一步增加,可见不成熟的纤维软骨。Yamakado腱-骨界面形态学分型显示术后第4、8和12周实验组腱-骨界面愈合情况优于对照组。实验组在第12周有1个标本可观察到典型的直接连接结构。组织定量学分析表明术后第4、8和12周实验组新骨生成面积和新生血管所占比例均显著高于对照组（p≤0.05）。通过本实验组织学研究及大量相关基础和临床研究可得,金葡素在多种成分（葡萄球菌肠毒素C、血浆游离凝固酶、蛋白质、多肽和氨基酸等）的共同作用下,能够促进新生血管迅速长入腱-骨界面,丰富的血供一方面能够为新骨和胶原纤维的生成提供丰富的营养物质和细胞因子,启动骨代谢,激活骨细胞,加快骨坏死区的吸收与重建。同时也将大量的间充质细胞带入腱-骨界面,通过增殖,分化为成纤维细胞、成软骨细胞和成骨细胞。结论金葡素能够协同其多种成分的生物学作用,在增加腱-骨界面血液供应的基础上,共同促进新骨及胶原纤维的生成由此达到促进兔ACL重建后腱-骨愈合的作用。